抗人DR5单抗-阿霉素交联物的制备及其细胞毒作用

目的：介绍抗人DR5单抗YM366EC-阿霉素结合物的制备及其细胞毒作用,以探讨YM366EC作为内源性导向载体的可能性。方法：采用氧化葡聚糖（Dex）T-40作为中介载体,联结抗人DR5YM366EC与阿霉素（ADR）制备交联物366EC-Dex-ADR,交联物中ADR与366EC的克分子比为71：1。经ELISA测定交联物的抗体活性大部分保持。MTT法体外测定其细胞毒性。结果：交联物对表达DR5受体的肿瘤细胞处理24小时的IC50是游离ADM的5倍,并且和肿瘤细胞DR5受体表达相关。结论：YM366EC具有良好的导向作用,结合物对肿瘤细胞有选择性杀伤作用。     

两种方法制备的旋毛虫ES抗原对小鼠免疫保护作用研究

旋毛虫病流行于世界各地,是一种危害严重的人兽共患病.旋毛虫的抗原可分为虫体抗原、表面抗原、杆细胞颗粒相关抗原以及排泄分泌抗原(excretory-secretory antigen,简称ES抗原).ES抗原是旋毛虫的代谢分泌产物,与宿主免疫系统直接接触,具有较强的免疫原性[1].ES抗原也可用于人旋毛虫病的诊断[2].     

解脲支原体检测试剂盒的研制

研制出一种快速、敏感、准确检测解脲支原体试剂盒。方法：筛选出促进解脲支原体生长的促 生长因子,替代新生牛血清。选用多种有效抑菌剂以省去固体培养基鉴定的步骤,并与Ｈａｙｆｌｉｃｋ培养基及无血培 养基进行对比研究。结果：７２小时自制试剂盒与Ｈａｙｆｌｉｃｋ培养基的检出符合率达９８．１％, １６小时内检出率自制 试剂盒、Ｈａｙｆｌｉｃｋ培养基、无血解脲支原体培养基分别为５２．６％、２７．６％、１６．３％,前者明显优于后两种培养基。结 论：自制解脲支原体试剂盒简便、快速、准确,是一种实用的检测试剂盒。     

致白内障基因Hsf4b K65R位点突变对下游热休克蛋白表达的影响

目的:探讨致白内障基因热休克因子4b(Hsf4b)K65R位点突变对其调控下游热休克蛋白(HSP)表达的影响。方法:采用KOD-Plus-Mutagenesis-Kit试剂盒构建pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R赖氨酸突变质粒;通过慢病毒感染小鼠晶状体上皮细胞mLEC构建稳定表达Hsf4b/K65R突变质粒的细胞株;Western blotting检测Hsf4b在mLEC K65R点突变细胞株和野生株中的表达;Western blotting及real-time PCR检测K65R点突变后下游蛋白Hsp70、Hsp90、Hsp27和CryAB表达的变化。结果:阳性克隆PCR及基因测序证明慢病毒载体pWZL-blast-HAHsf4b/K65R构建成功。K65R点突变后不影响Hsf4b在小鼠晶状体上皮细胞mLEC中的表达,但能影响下游蛋白CryAB、Hsp27、Hsp70i和Hsp90a的表达。结论:pWZL-blast-HA-Hsf4b/K65R载体可用于慢病毒感染稳定细胞株构建。Hsf4b K65R位点突变能显著影响其对热休克蛋白的调控功能。     

中西医结合治疗尖锐湿疣的疗效观察

目前治疗尖锐湿疣（ＣＡ）的方法有许多种,但均有一定的复发率,我们在用电灼法去除疣体后,使用小剂量干扰素的同时加用中药以增强病人免疫力及抗病毒能力,取得了较好的结果,现报道如下：１　材料与方法１１　临床资料　所有病例均来自开封医专男性病专科门诊,男１９８例,女５３例,合计２５１例,年龄１９～６２岁,平均年龄３２６岁;病程５～３００天;其中乳头状１０２例、菜花状１０８例、混合性４１例。所有病例均经醋酸白试验、病理学检查及临床检查确诊为ＣＡ。１２　治疗方法　将２５１例患者随机分为３组,第Ⅰ组７８…     

绒毛中TRAIL及其受体的表达与不明原因反复自然流产的相关性的探讨

目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体TRAIL及其受体在不明原因早期反复自然流产患者(URSA)绒毛中的表达及二者的相关性。方法选择实验组妊娠45～60 d的URSA患者15例,对照组健康人工流产15例。两组分别取绒毛组织采用免疫组化法检测TRAIL及其受体的表达,进行方差分析和t检验比较两组绒毛组织中TRAIL及其受体蛋白表达水平的差异。结果实验组绒毛组织中TRAIL及其受体DR4、DR5蛋白表达较强,而诱骗受体DcR1及DcR2蛋白与正常对照相比表达较少,P值均小于0.05。结论TRAIL及其受体可能是造成自然流产的机制之一。     

抗hDR5单抗对食管癌细胞的凋亡及CDC作用观察

目的：观察抗hDR5单抗对食管癌细胞的凋亡作用及CDC作用。方法：采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,采用MTT法及显微摄影观察McAb及补体作用后EC109的增殖及形态变化,流式细胞仪观察细胞凋亡。结果：获得了单克隆抗体,其对EC109的凋亡诱导作用呈剂量依赖性;与对照组比较,补体可显著提高单抗对EC109的细胞毒作用,二者联用其细胞生长抑制率可达83.04%,形态学观察可见凋亡小体及细胞溶解;结论：DR5单抗具有诱导EC109细胞凋亡的作用,与补体联合应用具有较强的CDC效应。     

klinefelter综合征8例报告

Klinefelter 综合征(克氏征)即伴随超数 X 染色体的男性性腺功能低下症,其发病率约占男性的1.3‰。我所男性不育症门诊在近2年的时间内发现8例,现将其临床资料、遗传学检查及血液激素检查结果报道如下:临床资料克氏征的典型临床表现为小睾丸和无精子症,男性副性征发育不良,有不同程度的女性化表现,如胡须稀少或缺如,喉结小甚至不能触及,阴毛稀少常呈女性型分布,约25%有乳房发育呈女性型。体型常呈去睾体型,身材较高,耻跟距常大于顶耻距。智能发育可正常,但大部分患者可有不同程度的智力低下。本组8例的临床表现见表1。遗传学检查结果见表2。可见,5例核型为47,XXY,3例为46,XY/47,XXY;     

抗人DR5抗体mDRA- 6细胞毒作用机制分析

目的:探讨鼠抗人DR5单克隆抗体(mAb)mDRA-6对Jurkat细胞的细胞毒作用及其机制。方法:以流式细胞术测定mAbmDRA-6对Jurkat细胞的细胞毒作用和细胞凋亡作用,以及caspase8、9的抑制剂对mAbmDRA-6诱导的Jurkat细胞凋亡的影响。在荧光显微镜下,观察mAbmDRA-6对Jurkat细胞形态的影响。以琼脂糖凝胶电泳检测Jurkat细胞中的DNA片段化。结果:mAbmDRA-6对Jurkat细胞具有显著的细胞毒作用,并呈剂量和时间依赖性。经mAbmDRA-6处理后,Jurkat细胞可出现典型的细胞凋亡的形态特征:细胞膜皱缩,出泡,染色质浓缩,形成凋亡小体等。经mAbmDRA-6处理后,Jurkat细胞膜表面高表达丝氨酸磷脂,并可导致Jurkat细胞中的DNA片段化。caspase8的抑制剂可明显抑制mAbmDRA-6诱导的Jurkat细胞凋亡,caspase9的抑制剂的影响很小。结论:mAbmDRA-6可通过死亡受体信号传导途径诱导Jurakt细胞凋亡,对Jurkat细胞产生细胞毒作用,其在以TRAIL/DR5系统进行的肿瘤治疗和探讨DR5功能结构域方面具有广阔的应用前景。