初步建立胶体金免疫层析法快速检测东部马脑炎抗体

东部马脑炎病毒(eastern equine encephalitis virus, EEEV,以下简称为东马病毒)是引起东部马脑脊髓炎的病原体.东马病毒主要是通过黑尾脉毛蚊(Culisetamelanura)和环跗库蚊(Culex tarsalis)传播,而且可以经含有病毒的气溶胶通过呼吸道感染人类,感染后发病率高,传染性强,致死率高,缺乏有效的预防方法,病愈后多留有后遗症,所以被国际社会列为防制生物恐怖的主要病种之一,备受世界各国关注.     

饮食诱导代谢综合征小鼠模型的建立

目的 建立以高脂纯化饲料诱导的、遗传背景和环境因素共同起作用的C57BL/6J小鼠代谢综合征(MS)模型,为研究营养因素与代谢综合征的关系提供周期较短、稳定性好、可重复性、与人类发病可比性高的动物模型.方法 雄性3周龄C57BL/6J小鼠30只适应性喂养10 d后随机分为2组,其中一组(10只)给予普通生长饲料(对照组),另一组(20只)给予高脂纯化饲料(模型组).喂养期间对空腹血糖(FBG)、体重进行连续监测,同时监测体重指数(BMI)、血清胰岛素(FINS)、血清甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),实验期10周.实验结束时取内脏脂肪和肝脏称重,取肝胰做病理分析.结果 分组喂养1周时,模型组小鼠体重出现显著性升高(P＜0.001),并表现为中心型肥胖.4周时FBG显著性升高(P＜0.05),5周时FINS开始升高但无显著性差异.8周时血清TC、HDL-C显著性升高(P＜0.001),10周时TG、TC、HDL-C、LDL-C均升高(P＜0.01).HE染色显示肝脏中度脂肪变,胰岛细胞无明显改变.结论 单纯施以高脂饲料10周即可建立MS小鼠模型.并且该模型造模方法简单易行、周期较短、稳定性好、可重复性高,与人类MS自然发病过程类似,是MS较理想的动物模型.     

基孔肯雅病毒荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立一种快速、敏感、特异的实时荧光定量PCR方法,检测基孔肯雅病毒。方法通过序列比对挑选出基孔肯雅病毒基因组中高度保守的序列,在此序列上设计引物及TaqMan探针,建立实时荧光定量PCR反应体系。结果经优化的荧光定量PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒标准品的灵敏度可达21拷贝/μl,通过检测与传播媒介相似的流行性乙型脑炎病毒、黄热病毒、登革热病毒无交叉反应。结论该方法的建立在基孔肯雅热的疾病防控方面有较好的应用前景。     

马尔堡、埃博拉病毒双重荧光定量PCR检测方法的建立

目的 建立一种快速、敏感、特异的双重实时荧光定量PCR方法,可同时检测马尔堡病毒和埃博拉病毒.方法 通过序列比对挑选出两种病毒基因组中高度保守的序列,分别设计引物及Taqman探针,两条探针分别标记FAM和Texas Red荧光报告基因,建立双重实时荧光定量PCR反应体系.结果 双重荧光定量PCR方法检测两种病毒阳性标准品的灵敏度分别为30.5拷贝/μl和28.6拷贝/μl,通过检测日本脑炎病毒、黄热病毒、登革热病毒无交叉反应,有较好的灵敏度和特异性.结论 建立了马尔堡、埃博拉病毒双重荧光定量PCR检测方法,实现了两种病毒同时实时定量检测,在传染病防控领域有较好的应用前景.     

2022年中国眼科药物临床试验进展

目的:了解2022年我国眼科药物临床试验的进展,探讨其与2014～2021年的变化,为新药研发、临床试验的实施提供最新数据参考,为相关决策提供依据。方法:采用横断面研究,检索国家药品监督管理局“药物临床试验登记与信息公示平台”数据库,纳入公示日期为2022-01-01/12-31且适应证为眼病的眼科药物临床试验。描述眼科药物试验整体情况、适应证及试验分期及占比情况、实施效率、主要研究者的地域分布情况。结果:2022年我国眼科药物临床试验共公示55项,占所有临床试验的1.66%,呈稳步增长趋势,以化学药物占比最高为58.18%。开展试验最多的前三个适应证为年龄相关性黄斑变性、近视、干眼。开展基因治疗药物临床试验2项。7个药物品种开展≥2项临床试验,其中以硫酸阿托品、重组抗血管内皮生长因子(VEGF)人源化单克隆抗体开展数量最多,分别为7、5项。试验分期以Ⅰ期、Ⅲ期为主,分别占比36.36%、27.27%。2022年Ⅰ期试验启动耗时为2.72(0.77,3.47)mo,较2014～2021年的启动耗时3.87(3.00,6.30)mo显著缩短(Z=-2.630,P=0.009),BE、Ⅱ、...     

农村地区40岁以上近视人群黄斑病变患病率及影响因素分析：邯郸眼病研究

目的 探索我国农村地区40岁以上人群的近视性黄斑病变患病率,并基于人工少数类过采样法（Synthetic Minority Over-Sampling Technique,SMOTE）探索近视性黄斑病变患病的影响因素。设计 横断面研究。研究对象 2012-2013年邯郸眼病研究中年龄在40岁及以上的近视人群1177例。方法 通过问卷调查获取受试者的基本人口学资料及吸烟、饮酒等行为资料;通过体格检查获取受试者的身高、体重、血糖、血压等信息;通过实验室检查（采集血样）获取受试者的血液指标信息;采用“糖尿病视网膜病变早期治疗（Early Treatment Diabetic Retinopathy,EDTRS）”视力表测量受试者的生活视力和最佳矫正视力;采用Kowa压平眼压计（Tokyo,日本）测量眼压;采用Topcon自动验光仪（KR8800）测量屈光度;采用A超（10 MHz）对眼轴等生物学参数进行测量;采用Canon眼底相机（CR-2）分别拍摄以视盘和黄斑为中心的眼底照片各一张;近视性黄斑病变的阅片诊断方法：基于近视人群（等效球镜小于-0.5 D）,眼底出现以下任意症状即判断为近视性黄斑病变：弥漫性脉络膜视网膜萎缩、斑片状脉络膜视网膜萎缩、黄斑萎缩、漆裂纹、后极部出现近视性脉络膜新生血管,Fuchs斑归类于近视性脉络膜新生血管中。采用我国第六次人口普查数据对近视性黄斑病变的患病率按年龄性别进行标准化;采用SMOTE算法对近视性黄斑病变资料的均衡性进行处理;采用Logistic回归探索近视性黄斑病变的影响因素;采用ROC曲线评估影响因素的预测效能。主要指标 近视性黄斑病变的粗患病率及年龄-性别标准化患病率。结果 在5055例有清晰可读眼底照片的40岁以上农村地区受试者中,1177例患有近视,其中35例患有近视性黄斑病变。在近视人群中,近视性黄斑病变的粗患病率为2.97%,年龄-性别标准化的患病率为2.65%。单因素分析结果显示：年龄 （t=10.910,P<0.001）、教育程度 （χ2=21.511,P<0.001）、婚姻状态 （χ2=62.488,P<0.001）、BMI（t=-6.400,P<0.001）、血糖（t=-4.199,P=0.014）、屈光度值 （Z=-15.766,P<0.001）、眼压（Z=-7.384,P<0.001）以及最佳矫正视力（t=-24.384,P<0.001）在近视性黄斑病变组与对照组间有统计学差异。Logistic回归分析显示：年龄和屈光度是近视性黄斑病变的危险因素,眼压是近视性黄斑病变的保护因素,三者的OR值分别为1.056 （95%CI：1.025,1.087）,0.667 （95%CI：0.603,0.738）和0.841 （95%CI：0.762,0.928）;ROC曲线分析结果显示,采用年龄、屈光度和眼压对近视性黄斑病变进行预测,曲线下面积可达0.936（95%CI: 0.918,0.953）。结论 在我国农村地区40岁以上近视人群中,年龄-性别标准化的近视性黄斑病变患病率为2.65%。年龄、屈光度和眼压是近视性黄斑病变的影响因素,年龄越大患病风险越大、眼压越低患病风险越大,近视度数越大患病风险越大。（眼科,2021, 30： 177-183）     

2010年中蒙边境甘其毛都口岸地区蜱携带病原体调查研究

目的为了解中蒙边境蜱传疾病病原体携带情况,对2010年中蒙联合监测小组在内蒙古乌拉特中旗甘其毛都口岸地区采集的162只亚东璃眼蜱进行病原体检测。方法采用RT-PCR法检测蜱标本中的森林脑炎病毒、克里米亚-刚果出血热病毒、布尼亚病毒,PCR方法检测蜱标本中的伯氏疏螺旋体、西伯利亚立克次体、贝氏柯克斯体,嗜吞噬细胞无形体。结果森林脑炎病毒、克里米亚-刚果出血热病毒、布尼亚病毒、嗜吞噬细胞无形体检测结果均为阴性,PCR方法检出5例伯氏疏螺旋体、3例西伯利亚立克次体、16例贝氏柯克斯体,检出率分别为3.7%、2.2%和11.9%,并发现2例伯氏疏螺旋体和贝氏柯克斯体复合感染的情况。结论中蒙边境地区蜱携带伯氏疏螺旋体、贝氏柯克斯体和西伯利亚立克次体等病原体,应有针对性地加强当地蜱类和蜱传疾病的监测和防控。     

甲型H1N1流行性感冒病毒血凝素HA1氨基端的表达及双抗体夹心ELISA法的建立

甲型H1N1流行性感冒（简称流感）病毒是一种人类最常见的流感病毒之一,2009年引起流感大流行的病毒并非一种全新的流感病毒[1],陆一涵等[2]推测可能是北美地区的H1N4病毒发生了一定程度的变异（包括重组和重排）所致。基因组测序发现,该病毒包含禽流感、猪流感和人流感3种流感病毒的基因片段[3-4],其中血凝素(HA)蛋白来源于猪谱系,一直存在于经典猪流感病毒和三源重排子猪流感病毒中[5]。HA蛋白是流感病毒最主要的表面抗原,与病毒吸附穿膜及宿主对病毒易感性有关[6-8],其变异率较高,常通过突变使病毒逃脱宿主免疫引起新的流感大流行。这种变异主要体现在HA1氨基端球形头部的受体结合部位与抗原决定簇氨基酸的改变,因此甲型H1N1病毒HA1氨基端蛋白的表达是建立特异性检测方法的关键。笔者通过原核表达此次甲型H1N1流感病毒血凝素HA1氨基端蛋白,制备多抗血清,建立了特异性双抗体夹心ELISA检测法。     

中国眼科以产品注册上市为目的的药物临床试验的实施现状分析

目的 了解我国眼科以产品注册上市为目的 的药物临床试验的实施现状。设计回顾性观察性研究。研究对象2014-2021年国家药品监督管理局“药物临床试验登记与信息公示平台”中的眼科药物临床试验201项。方法对数据库进行检索,并进行相关的统计描述与分析。主要指标试验完成率、试验暂停/终止原因、启动耗时、完成耗时。结果截止到2021年12月底,201项试验中试验完成率为50.75%。生物等效性研究(BE)、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期试验完成率分别为85.71%、58.21%、39.39%、43.06%、71.43%。治疗年龄相关性黄斑变性(AMD)、黄斑水肿和糖尿病视网膜病变(DR)的药物试验完成率分别为57.45%(27/47)、46.88%(15/32)、63.16%(12/19)。试验暂停/终止12项,主要原因为批件失效(4/12)、研究方案问题(3/12)、不良事件(3/12)。试验的总体启动耗时中位数为4.28(3.00,6.02)个月,BE、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期试验启动耗时中位数分别为4.07(0.30,5.17)、3.87(3.00,6.30)、4.90(2.10,6.50)、4.63(3.2...     

中文版美国国家眼科研究所视功能调查问卷共享电子数据库的构建

目的构建低成本、标准化、可重复使用、便于数据交换、整合与共享的中文版国家眼科研究所视功能调查问卷(NEI－VFQ－25)电子数据库。 方法按照标准操作规范在云平台部署(REDCap)数据库。在应用市场下载REDCap移动客户端,根据软件说明文档建立与网页端的关联。文献检索获得经验证且被授权使用的中文版NEI－VFQ－25问卷,使用REDCap在线数据库设计工具,按照国际数据交换标准设置数据字典。使用REDCap可视化工具设立数据质量实时核查规则、进行权限与角色配置。通过数据备份和系统安全巡检方式建立系统维护与数据安全策略。 结果REDCap电子数据库部署成功,实现了中文版NEI－VFQ－25问卷的标准化采集,且无论有无网络均可使用。除网页版本外,还可基于移动客户端使用。数据库共享设置权限控制,应用于不同研究项目时生成独立的访问地址,并在数据采集、数据查看、数据下载方面设定各自独立的权限。数据的安全性、真实性、准确性、保密性及可溯源性均得到保证。 结论中文版NEI－VFQ－25问卷电子数据库构建成功,用户友好化程度高,为临床研究者开展糖网、青光眼、白内障等低视力人群的视觉生活质量研究提供一个便利、高效、高质量及标准化的数据管理工具。