抗病毒红藻多糖的提取与测定

从我国沿海红灌中撮的粗多糖,经ＤＥＡＥ－纤维素柱层析得到红藻多糖ＲＰ１实验证实有明显抗病毒作用。通过气相色谱、红外光谱、Ｙａｐｈｅ测定方法,证明红藻多糖ＲＰ１含硫酸基是一种硫酸酯化多糖,其单糖组成为半乳糖和３,６－内醚半乳糖,定量分析含量分别为半乳糖７０．０４％、３,６－内醚半乳糖９．５６％１硫酸基１７．３０％。     

非病毒载体聚乙烯亚胺介导DNA转染的研究

目的研究新型非病毒类载体聚乙烯亚胺(PEI)的最适转染条件。方法分析各种因素对25 ku线性PEI转染效率的影响,优化实验条件。结果PEI与DNA的质量比≥2能保证DNA与PEI完全结合,最佳混合时间为10 min,但血清的存在将降低其结合效率。在一定范围内提高PEI与DNA的质量比有利于提高转染效率。293T细胞最适转染密度为培养面积的80%。结论确定了PEI转染细胞的最优条件。     

抗病毒红藻多糖的提取与测定

从我国沿海红灌中撮的粗多糖,经ＤＥＡＥ－纤维素柱层析得到红藻多糖ＲＰ１实验证实有明显抗病毒作用。通过气相色谱、红外光谱、Ｙａｐｈｅ测定方法,证明红藻多糖ＲＰ１含硫酸基是一种硫酸酯化多糖,其单糖组成为半乳糖和３,６－内醚半乳糖,定量分析含量分别为半乳糖７０．０４％、３,６－内醚半乳糖９．５６％１硫酸基１７．３０％。     

An Experimental Model for Screening Anti-AIDS Drugs with Bovine Immunodeficiency Virus

本文应用牛免疫缺陷病毒（ＢＩＶ）合胞体形成和ＢＩＶ长末端重复序列（ＬＴＲ）引导的萤火虫荧光素酶（Ｌｕｃ）基因表达分析，建立了抗艾滋病（ＡＩＤＳ）药物的筛选和评价模型。ＢＩＶ合胞体形成及ＢＩＶ－ＬＴＲ引导的Ｌｕｃ基因活力与ＢＩＶ感染的细胞呈线性关系。临床有效药物３′叠氮胸嘧啶脱氧核苷（ＡＺＴ）可显著抑制ＢＩＶ合胞体的形成及ＢＩＶ－ＬＴＲ引导的Ｌｕｃ基因表大家水平，并有剂量依赖关系。上述两种分得到ＡＺＴ的ＩＣ５０分别为０．２４和０．０５２ｍｍｏｌ／Ｌ。     

HBx蛋白在HBV与HIV超感染过程中的作用

乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)是一种常见的与人免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)发生超感染的病毒,能激活处于潜伏状态的HIV。HBVx基因编码的X蛋白(HBx)具有多种功能,它通过与多种宿主功能蛋白直接或间接的相互作用调节这些蛋白的功能,具有广泛的反式激活作用。在HBV、HIV超感染过程中,该蛋白起着极为重要的作用。     

用牛免疫缺陷病毒筛选抗艾滋病药物的实验模型

本文应用牛免疫缺陷病毒（ＢＩＶ）合胞体形成和ＢＩＶ长末端重复序列（ＬＴＲ）引导的萤火虫荧光素酶（Ｌｕｃ）基因表达分析，建立了抗艾滋病（ＡＩＤＳ）药物的筛选和评价模型．ＢＩＶ合胞体的形成及ＢＩＶ－ＬＴＲ引导的Ｌｕｃ基因活力与被ＢＩＶ感染的细胞数呈线性关系．临床有效药物３′－叠氮胸腺嘧啶脱氧核苷（ＡＺＴ）可显著抑制ＢＩＶ合胞体的形成及ＢＩＶ－ＬＴＲ引导的Ｌｕｃ基因表达水平，并有剂量依赖关系．上述两种分析得到ＡＺＴ的ＩＣ５０分别为０２４和００５２μｍｏｌ·Ｌ－１．     

大肠杆菌O110 O-抗原基因簇序列的破译及特异基因鉴定

目的 定大肠杆菌O110标准株的O-抗原基因簇序列，对其基因结构进行遗传学分析，鉴定可用于快速分型的特异DNA序列。方法 用长距离PCR扩增O-抗原基因簇序列，建立鸟枪法文库进行随机测序，用生物信息学的方法进行序列拼接与分析，根据测定的序列设计引物，用PCR的方法确定针对大肠杆菌O110的特异基因。结果与结论 确定了大肠杆菌O110标准株的O-抗原基因簇序列以及该基因簇中7个开放阅读框架(open reading frame，orf)的功能，分别为：糖基转移酶基因(orf1，orf2，orf7)，小分子修饰酶基因(orf3，orf5)，O-抗原转运酶基因(wxx)和O-抗原聚合酶基因(wzy)。鉴定出了可以用于PCR方法对大肠杆菌O110快速检测的特异基因。     

环媒恒温扩增技术(LAMP)检测原型泡沫病毒

目的 利用环媒恒温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),建立检测原型泡沫病毒(prototype foamy virus,PFV)的方法.方法 根据PFV的整合酶核心区基因序列设计了3对LAMP引物,利用有链取代活性的Bst DNA聚合酶在63℃对靶序列进行扩增.优化检测条件,建立PFV的检测方法.结果 以含目的片段的质粒为模板建立了PFV的检测方法,运用此方法可特异地检测出PFV,而人免疫缺陷病毒、牛免疫缺陷病毒、牛泡沫病毒检测均为阴性,检测灵敏度为50拷贝,较聚合酶链反应高一个数量级.系统可以在15 min内完成扩增,同时可以在细胞基因组干扰下检出病毒,对混有病毒基因的人外周血单个核细胞(PBMC)总DNA的检测呈现特异阳性反应.结论 建立基于PFV整合酶基因的LAMP检测方法,在PFV感染检测方面有应用前景.