IL-2预孵育影响G-CSF动员的小鼠脾淋巴细胞增殖及极化观察

目的 探讨IL-2预孵育对粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员后的小鼠脾淋巴细胞功能的影响,从而为减轻异基因造血干细胞移植时急性移植物抗宿主病(GVHD)的发生提供一种新途径.方法 IL-2(50 U/ml)预孵育rhG-CSF(每天0.25 μg/g)体内动员的C57BL/6N小鼠脾细胞和na(i)ve CD4+T细胞6 h,然后在体外以BALB/c小鼠异基因抗原分别对其进行刺激,测定动员后的C57BL/6N小鼠脾细胞和na(i)ve CD4+T细胞的增殖能力以及上清液IL-4、IFN-γ的浓度,实验分为G-CSF+IL-2组、G-CSF组、IL-2组和对照组.结果 G-CSF+IL-2组较列照组A值降低(P＜0.01);G-CSF+IL-2组IL-4水平高于对照组(P＜0.01),而IFN-γ水平低于对照组(P＜0.01).结论 rhG-CSF动员的C57BL/6N小鼠脾细胞和na(i)ve CD4+T细胞经IL-2预孵育后对同种异基因抗原免疫增殖能力明显减弱并向Th2方向分化,两者合用对诱导T淋巴细胞免疫耐受有协同效应.

Abstract：

Objective To explore the influence of IL-2 pretreatment on splenic lymphocyte following mobilization with G-CSF, which may provide a new approach to attenuate acute graft-versus-host disease (GVHD). Methods Splenic cells and na(i)ve CD4+T cells from C57BL/6N mice receiving G-CSF-mobilized were pretreated with IL-2(50 U/ml) , and cocultured with the allogeneic antigens from BALB/c mice. The proliferation responses and the polarization of T cells were determined. C57BL/6N mice were randomly divided into 4 groups: G-CSF + IL-2 group, G-CSF group, IL-2 group , control group. Results Compared with the control group, IL-4 increased obviously while IFN-γ decreased significantly in the group of G-CSF + IL-2. The proliferation responses were also suppressed in vitro. Conclusion The proliferation responses of splenic cells and naive CD4 + T cells from C57BI/6N mice receiving G-CSF-mobilized to the allogeneic antigens were significantly abrogated by the pretreatment with IL-2, T cells were polarized toward the production of type-2 cytokines. The combination of G-CSF and IL-2 is potentially synergetic in the induction of T lymphocyte immune tolerance.     

宫颈癌手术前后气道变化及其相关因素分析

目的:探讨腹腔镜和经腹宫颈癌根治术术后气道变化的情况及相关因素。方法:选择美国麻醉医师协会(ASA)Ⅰ~Ⅱ级择期行腹腔镜和经腹宫颈癌根治术的患者各20例。记录两组患者术前、术后1h、术后24h的麦氏评分、咬唇试验和颈围,分析三者与术中气道压和中心静脉压的关系。结果:腹腔镜组与经腹组患者麦氏评分、咬唇试验和颈围在术前、术后1h和术后24h差异均无统计学意义。腹腔镜组患者术后1h麦氏评分(P=0.001)、咬唇试验结果(P=0.003)与术前差异均有统计学意义,术后24h麦氏评分、咬唇试验结果与术前差异均无统计学意义;腹腔镜组患者颈围术后1h[(34.18±2.50)cm]、术后24h[(32.98±2.30)cm]与术前[(32.48±2.58)cm]差异均有统计学意义(P0.05)。经腹组术后1h和术后24h麦氏评分、咬唇试验及颈围与术前差异均无统计学意义。术后1h麦氏评分与手术开始后1h、2h气道压及手术开始后1h中心静脉压正相关(P0.05),而术后1h咬唇试验与手术开始后1h、2h、3h气道压及手术开始后2h中心静脉压正相关(P0.05)。结论:与经腹宫颈癌根治术相比较,腹腔镜下宫颈癌根治术术后早期气道变化明显,并且这种气道变化可能与术中早期气道压和中心静脉压有关。     

地塞米松联合IL-2对供鼠体内调节性T细胞选择性扩增作用及对急性移植物抗宿主病反应的抑制作用

目的 通过地塞米松(Dex)联合IL-2处理小鼠,建立体内扩增调节性T细胞(Treg细胞)的方法 .观察用该方法 处理的小鼠脾细胞移植后受鼠急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生与转归.方法 使用Dex和IL-2处理雄性C57BL/6N供鼠3 d后提取脾单个核细胞(MNC),用流式细胞术(FCM)分析CD4~+ CD25~+、CD25~+ FOXP3~+细胞的变化.,以以上方法 处理的雄性C57BL/6N小鼠为供者,对雌性BALB/c受鼠进行非清髓异基因淋巴细胞移植.移植后观测受鼠的生存率、生存时间、组织病理学变化,以及用PCR和FCM分析测定受鼠嵌合体等来评价aGVHD的发生.结果 经过Dex和IL-2联合处理,供鼠脾CD4~+ CD25~+ FOXP3~+ Treg细胞数量[(24.2±7.6)%]明显高于对照组[(4.0±0.8)%](P=0.01).Dex联合IL-2组供鼠Treg细胞与效应T细胞(Teff)的比值(0.43±0.15)显著高于对照组(0.14±0.01)(P=0.01).经过Dex联合IL-2处理供鼠后进行异基因淋巴细胞移植,受鼠aGVHD明显减轻,中位生存时间＞60 d,与对照组的中位生存时间12 d相比明显延长(P=0.0045).对照组出现典型的aGVHD表现,移植后2周Dex联合IL-2组和对照组的总体死亡率分别为29.4%和71.4%(P＜0.05).结论 经IL-2和糖皮质激素处理供鼠后进行主要组织相容性抗原复合物完全不相合脾淋巴细胞移植能明显减轻aGVHD,显著延长生存时间,可能与供者体内诱导扩增的Treg细胞增加有关.     

糖皮质激素联合IL-2提高调节T细胞/效应T细胞比例抑制异基因抗原反应

目的 建立糖皮质激素联合IL-2选择性提高调节T细胞(Tr)/效应T细胞(Te)比例的方法,观察其对异基因抗原反应的抑制效应.方法 体内使用地塞米松(DxM,5 mg·kg-1·d-1)和IL-2(300 000 IU/d)处理C57BL/6N3d后提取脾单个核细胞(MNC);流式细胞仪(FCM)分析CD4+CD25+、cD25+Foxp3+等的变化.取经IL-2和DXM联合处理后第10天的C57BL/6N脾细胞,用BALB/c小鼠脾细胞作为异基因抗原对其进行刺激,测定其增殖反应.结果 经过糖皮质激素和IL-2联合处理,C57BL/6N鼠脾CD4+Cd2525Foxo3+Tr数量明显增加,DXM+IL-2组CD4+中CD25+Foxp3+Tr比例为24.22%±7.60%,与对照组相比(4.02%±0.84%)差异具有统计学意义(P=0.01).DXM+IL-2组供鼠Tr与Te之比显著上升(0.43±0.15),与对照组(0.14±0.01)相比,差异具有统计学意义(P=0.01).DXM+IL-2组表达更强的糖皮质激素诱导肿瘤坏死因子受体(GTTR),该组小鼠T细胞体外异基因抗原增殖反应明显减低(P<0.05).结论 DXM联合IL-2体内应用有效提高Ir/Te比例,抑制异基因抗原增殖反应.     

Valsalva动作对颈内静脉穿刺成功率的影响

正中心静脉穿刺置管的并发症包括误伤动脉、气胸、血胸、血肿和导管位置异常等,其发生率可高达10%,颈内静脉置管失败率可超过19%[1,2]。如何提高颈内静脉穿刺成功率,减少并发症发生率具有重要意义。在麻醉后使用呼气末正压可以提高颈内静脉充盈度,从而提高穿刺成功率[3]。但对于清醒患者能否通过Valsalva动作提高穿刺成功率,文献报道很少。本研究拟