高糖微环境下糖原合酶激酶3β抑制剂Tideglusib干预大鼠骨髓间充质干细胞的增殖及成骨分化

背景：高糖环境能够抑制骨髓间充质干细胞的增殖和成骨分化能力,如何提高成骨细胞在高糖状态下的生物学活性,是改善糖尿病患者种植体骨结合的关键。目的：探究非ATP竞争性的特异性糖原合酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)抑制剂Tideglusib在高糖微环境下对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法：采用全骨髓贴壁法培养并纯化大鼠骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞分为4组：正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖),Tideglusib+正常对照组(5.5 mmol/L葡萄糖+20 nmol/L Tideglusib),高糖组(25.5 mmol/L葡萄糖),Tideglusib+高糖组(25.5 mmol/L葡萄糖+20 nmol/L Tideglusib)。(1)CCK-8法检测细胞的增殖情况;(2)成骨诱导培养4,7 d后检测碱性磷酸酶的活性;(3)成骨诱导培养21 d后采用茜素红染色检测钙化结节的形成;(4)细胞接种24 h后鬼笔环肽染色观察细胞的初期黏附形态;(5)RT-qPCR检测成骨基因Runx2、OPN的mRNA表达,Wester...     

黄连素在高糖环境下促进骨髓间充质干细胞的成骨分化

背景：糖尿病患者的口腔种植体骨结合率低下，失败率高，严重影响了生活质量，亟需有效手段改善糖尿病患者种植体骨结合以提高成功率。探究黄连素在高糖环境下对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及具体机制，将能为解决上述问题提供有效的理论支撑。目的：探讨天然提取物黄连素在高糖微环境下对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法：通过全骨髓贴壁法培养SD大鼠骨髓间充质干细胞。CCK-8法检测在高糖生理环境下添加不同浓度黄连素对骨髓间充质干细胞增殖的影响并筛选出最适黄连素浓度。通过碱性磷酸酶活性、茜素红染色以及PCR检测Runx2、Osx表达，判断黄连素在高糖环境下对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。为进一步探索作用机制，添加AMPK特异性抑制剂Dorsomorphin，使用DCFH-DA活性氧荧光探针检测活性氧水平，Western blot检测p-AMPK的表达。结果与结论：(1)10μmol/L为黄连素促进骨髓间充质干细胞增殖的最适浓度；(2)黄连素在高糖微环境下促进骨髓间充质干细胞矿化结节形成并提高碱性磷酸酶活性；(3)黄连素在高糖微环境下促进Runx2和OSx基因表达；(4)黄连素可有效抑制高糖环境下...