多重PCR快速检测金黄色葡萄球菌中氨基糖苷类抗生素耐药基因及其临床应用

目的 建立金葡菌氨基糖苷类抗生素耐药基因的多重PCR快速检测体系,了解耐药基因acc(6')-Ie+aph(2″)、aph(3')-Ⅲat ant(4')-Ia在广州地区的流行分布.方法 采用VITEK-60或PHOENIX-100微生物自动鉴定系统鉴定菌株及药敏试验,利用琼脂扩散法检测4种氨基糖苷类抗生素的耐药表型.通过优化PCR体系建立多重PCR并应用于检测金葡菌氨基糖苷类抗生素耐药基因.结果 构建了四重PCR快速检测体系, 124株金葡菌临床分离株中,acc(6')-Ie+aph(2″)、aph(3')-Ⅲa和ant(4') -Ia的检出率分别为62.1%、32.3%和1.6%;所有庆大霉素、奈替米星以及阿米卡星耐药的金葡菌菌株均检测到上述3个耐药基因中的1个或1个以上基因;74株mecA阳性菌株中72株(97.3%)检测到acc(6')-Ie+aph(2″) 基因.结论 所构建的多重PCR检测体系为临床实验室提供快速而有效的菌株耐药基因检测手段.编码AAC(6')-APH(2″)双功能酶的acc(6')-Ie+aph(2″) 基因是金葡菌最重要的氨基糖苷类抗生素耐药基因,其次为aph(3')-Ⅲa,ant(4')-Ia则少见.     

肺炎衣原体PCR诊断盒的研制

肺炎衣原体ＰＣＲ诊断盒的研制广东省老年医学研究所广州５１００８０汪玎妍，蒋文玲，罗宪玲，李质怀，谭新洪，魏惠永，董婷肺炎衣原体是１９８９年版Ｂｅｒｇｅｙ＇ｓ系统细菌手册中正式命名的第三种衣原体，已于世界上多个国家和地区引起流行。主要引起急性呼吸道感染...     

两种基因检测方法在病毒性心肌炎诊断中的应用

目的:阐明基因检测手段在病毒性心肌炎(VMC)病原诊断中的作用。方法:采用RT-PCR、地高辛标记CBV3 -cDNA探针对PCR扩增产物进行斑点杂交,检测血标本中的柯萨奇病毒B组病毒(CBV)。结果:RT-PCR阳性检出率:心肌炎组为48.33%.对照组4.41%(P<0.01)。斑点杂交阳性率:心肌炎组为51.67%,对照组4.41% (P<0.01)。检测CBV的两种方法阳性率无显著差异(P>0.05)。结论:两种方法特异性均高,敏感性无显著差异。     

柯萨奇B 组病毒感染与心血管疾病关系的流行病学调查

为了解心血管疾病患者柯萨奇Ｂ组病毒(ＣＢＶ)感染状况,探讨ＣＢＶ感染与心血管疾病的关系,我们于1996年2月至1997年2月对广州地区部分心血管疾病患者进行了ＣＢＶ感染的血清流行病学和分子流行病学调查。一、对象与方法:心血管疾病组包括临床诊断冠心病、风湿性心脏病、高血压性心脏病人192例,均为广东省人民医院心血管门诊和住院病人,年龄37～84岁,平均年龄56岁。正常对照组78例,年龄28～66岁,平均年龄48岁。正常对照组采血时3个月内无呼吸道、肠道及心血管疾病史,均取外周静脉血。ＣＢＶ检测采用间接酶联免疫吸附试验(ＥＬＩＳＡ)和逆转…     

柯萨奇B组病毒在心血管疾病发生中的作用

目的：了解柯萨奇B组病毒（CVB）在心脏疾病患者中的感染状况,探讨CVB感染与心血管疾病的内在关系。方法：采用间接酶联免疫吸附测定（ELISA）和反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）。进行CVBIgG抗体和核酸检测。结果：心脏病组CVBIgG阳性率为44．8％（112／250）,对照组抗体阳性率为16．7％（18／108）,两者有显著性差异（P〈0．05）。CVBRNA检测结果显示,心脏病组阳性率为20．4％（51／250）,对照组为3．7％（4／108）．两者比较有显著性差异（P〈0．05）。结论：在心脏病患者中CVB感染较普遍,应引起重视。     

冠心病与肺炎衣原体感染的相关性研究

目的了解冠心病患者肺炎衣原体(Chlamydiapneumoniae,Cpn)感染状况,探讨肺炎衣原体感染与冠心病的关系。方法采用聚合酶链式反应、双抗体夹心法和间接ELISA法对200例经冠状动脉造影证实的冠心病患者和非冠心病患者,进行CpnDNA、血清循环免疫复合物和IgG抗体检测。结果冠心病组CpnDNA、血清循环免疫复合物和IgG抗体阳性检出率依次为43.4%、64.2%、65.4%。对照组CpnDNA、免疫复合物、IgG抗体阳性检出率依次为7.3%、39.0%、31.7%。冠心病组CpnDNA、循环免疫复合物和IgG抗体阳性率均高于对照组(P<0.01)。结论Cpn感染与冠心病关系密切。     

-α3.7伴有anti4.2片段的α地中海贫血基因型的研究

在我国广东、广西两省人群中α地中海贫血(α地贫)基因携带率约高达10%[1].其中东南亚型缺失(--SEA)、右向缺失(-α3.7)和左向缺失(-α4.2)占α地贫的96%以上[2-3].一些更复杂的交叉重组可能产生更复杂的异常基因型(如HKαα,在同一条染色体上含有-α3.7及anti4.2不平衡交叉连接片段).     

广州地区部分人群庚型肝炎病毒感染的流行病学调查

目的 为了解广州地区庚型肝炎病毒（HGV）感染的现状和流行特点，我们对348例住院和门诊的肝病患者进行了HGV RNA、HGV抗体（HGV－Ab)检测，现将结果报道如下。材料和方法，从广东省人民医院门诊和住院肝病患者收集血清标本348份，其中丙型肝炎93份，乙型肝炎120份，肝硬化75份，肝细胞癌60份。采用逆转录套式PCR检测HGV RNA。引物序列为：HGV1（F外）5′-CGCTCAAGCCAGCGAAGTAAGCA－3′，HGV2(R外）5′－CAATACCTCTCACCGACGGG－3′，HGV3（F内）5′－GGACTTCCGGATAGCTGAAAGCT－3′，HGV4（R内）5′－GCGTCCACACAGATGGCGA－3′。两次PCR循环条件相同，均为：94℃ 1min、55℃ 1min、72℃ 1min，35个循环。产物进行琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下观察结果。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HGV－Ab。诊断试剂为北京大学医学院产品。结果 348份标本中，HGV RNA阳性检出率为8．62％（30／348）。其中丙肝标本检出率为6．45％（6／93），乙肝标本检出率为7．50％（9／120），肝硬化标本检出率为8．00％（6／75），肝细胞癌标本检出率为15．00％（9／60）。HGV－Ab阳性检出率为12．93％（45／348）。其中丙肝标本检出率为12．90％（12／93），乙肝标本检出率为10．00％（12／120），肝硬化标本检出率为8．00％（6／75），肝细胞癌标本检出率为25．00％（15／60）。30份HGV RNA阳性标本中HGV－Ab均为阳性。结论 HGV在广州地区多种肝病人群中的感染状况较普遍，与其它肝病重叠感染的情况较严重。应得到足够重视。℃℃℃     

无症状女性人群及宫颈炎患者泌尿生殖道标本的沙眼衣原体 …

目的 了解广东省部分地区沙眼衣原体泌尿生殖道感染者的基因分布特点。方法 运用扩增沙眼衣原体外膜蛋白（ＭＯＭＰ）基因限制性内切酶片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法对无症状女性及宫颈炎患者泌尿生殖道标本进行了基因分型检测。结果 基因Ｅ型在两组人群中分布最高，宫颈炎患者以Ｆ、Ｇ二型多见，无症状组以Ｄ型多见。结论 实验结果对进一步分析常见的沙眼衣原体慢性迁延感染机理提供了实验依据。