大鼠体内硝基精氨酸的手性代谢动力学

目的　应用毛细管电色谱 (CEC)对大鼠体内的硝基精氨酸手性转化和代谢动力学进行研究。方法　采用手性配体交换法检测大鼠血浆中D型硝基精氨酸 (D NNA)和L型硝基精氨酸(L NNA)的浓度,应用非房室模型对所获得的血药浓度-时间数据进行拟合,计算药动学参数。结果　D NNA和L NNA在大鼠体内代谢具有明显的异构体选择性,清除率分别为(0 46±0 02)ml·h-1·kg-1和(0 17±0 03)ml·h-1·kg-1 (P<0 05 );T1 /2分别为 ( 1 44±0 28 )h和(3 48±0 41)h(P<0 05)。D NNA到L NNA的单项手性转化率为(50 03±8 5)%。结论　D NNA和L NNA在大鼠体内的代谢有明显的异构体选择性 (其差异可能主要源于D NNA到L NNA的单向手性转化)。     

遭遇暴力怎么办？

某中学初三年级一位男生张某丢了一笔钱,他怀疑是隔壁班的学生孙某偷的。于是,张某把孙某叫到自己的宿舍,让他交出偷走的钱。孙某不承认自己偷了钱,结果,张某就和同宿舍的其他六位学生先是对他进行辱骂,然后打他的耳光、踢他的身体、撞他的头,接着又逼他喝下满满一瓶白酒,目的是让他酒后吐"真言"。孙某被折磨了整整一夜后,只好承认自己偷了钱,并答应双倍偿还。事后,张某警告孙某,不准将这件事告诉老师和家长。     

PCR和实时荧光PCR法检测华支睾吸虫的比较研究

目的 利用PCR技术建立快速、灵敏、特异的检测华支睾吸虫的方法,并比较PCR和实时荧光PCR检测华支睾吸虫的灵敏性和特异性,探讨其在华支睾吸虫检测中的应用价值.方法 根据华支睾吸虫的特异性基因序列,设计了PCR引物及实时荧光PCR的特异性引物和探针,分别进行灵敏性和特异性实验.结果 设计的引物能够扩增华支睾吸虫DNA,而且探针的特异性很高.实时荧光PCR对华支睾吸虫的检测阈值为3 fg/μl,灵敏度比PCR高两个数量级.结论 PCR和实时荧光PCR检测华支睾吸虫的灵敏性和特异性均很高,操作简便,为华支睾吸虫的检测提供了有效的技术手段和方法.     

基于Logistic回归和随机森林的心力衰竭预后预测建模

目的 基于电子病历系统结构化信息创建的临床数据库,通过机器学习算法进行数据预处理和特征选择,构建预测心力衰竭患者住院期间死亡和6个月内死亡预测模型,从而辅助识别高危患者,为治疗干预提供指导。方法 以PhysioNet网站上公开的一个数据集为研究数据来源,该数据集纳入了2016年12月至2019年6月在四川省自贡市第四人民医院住院的心力衰竭患者临床信息,利用Python进行数据预处理、特征选择,并构建Logistic回归及随机森林预后预测模型,以增大ROC曲线下面积（area under curve,AUC）为目标优化模型,并在测试集中以AUC、准确率、精确度、召回率和F1分数综合验证模型预测效果。结果 通过数据预处理共获得146项特征用于住院期间心力衰竭死亡预测建模,155项特征用于6个月内心力衰竭死亡预测建模,基于随机森林的建模方法用于住院期间死亡效果最佳,AUC为0.893 1;在6个月内死亡预测上,结合LASSO和RFE进行特征选择,筛选出包括出院去向（健康护理机构、家庭或未知）、入院病房（全科）、出院科室（心血管科）、Killip分级（Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级）、心肌梗死情况以及充血性心力衰竭情况共10个特征进行Logistic回归建模,AUC达到0.833 6,与基于全部特征进行随机森林特征效果（AUC=0.846 0）相当。结论 本研究探索出一套针对电子病历系统结构化临床数据进行数据预处理、特征工程、机器学习算法建模并验证模型的方法,利用真实世界数据构建兼顾预测准确性和高危个体检出率的心衰预后预测模型。     

小鼠膜型抗衰老蛋白Klotho基因特异片段的克隆、原核表达及多克隆抗体制备

目的 克隆小鼠膜型抗衰老蛋白Klotho基因特异片段,制备小鼠Klotho多克隆抗体.方法 以小鼠基因组为模板进行PCR,克隆了小鼠膜型抗衰老蛋白Klotho基因外显子Ⅳ部分序列,经BamHⅠ和NheⅠ双酶切后定向克隆到质粒pET-GST中,构建原核表达质粒pET-GST-Klotho,转化大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达.以重组GST-Klotho融合蛋白免疫家兔, 制备Klotho多克隆抗体.结果 表达产物经SDS-PAGE检测表明,在大肠埃希菌中成功表达了GST-Klotho融合蛋白,GST-Klotho融合蛋白表达量占菌体总蛋白的15 %左右;另外通过ELISA法测得抗血清抗体效价约为1∶ 10 000,Western印迹分析验证了抗体特异性.结论 GST-Klotho融合蛋白的表达和Klotho多克隆抗体的制备为进一步研究Klotho蛋白在小鼠体内的表达模式以及相关抗衰老药物的研制奠定了基础.     

卷积神经网络重建欠采的磁共振图像

目的使用卷积神经网络(convolutional neural network,CNN)从欠采样的磁共振成像K空间数据快速重建出无伪影的高质量图像。材料与方法实验数据包含60位自愿者矢状位、横断位、冠状位全采的T1加权脑部MR图像,使用旋转和拉伸等操作对训练数据进行扩增。不同欠采模式的MR图像和金标准图像分别输入CNN进行训练,学习获得的网络可实现由欠采图像到全采集图像之间的非线性映射。重建时,将CNN重建图像的K空间与原始的K空间数据进行合并保真。实验中利用金标准图像,计算重建图像的峰值信噪比(peak signal to noise ratio,PSNR)、结构相似度(structural similarity,SSIM)和高频误差范数(high frequency error norm,HFEN),定量评价重建结果。结果 (1)CNN重建出的中央采样MR图像的PSNR、SSIM、HFEN分别为31.13、0.93、223.81,优于Tukey窗函数的25.69、0.86、482.75;(2)CNN重建出的伪随机采样MR图像的PSNR、SSIM、HFEN分别为32.78、0.95、195.51,优于压缩感知的31.01、0.93、184.69。结论卷积神经网络可以从欠采数据重建出高质量的磁共振图像,无论是主观的视觉效果还是客观的评价参数都优于传统的处理方法。与K空间中央连续采集相比,伪随机采样模式更有利于CNN重建出高质量的MR图像。     

运用基因芯片技术检测三种寄生虫方法的研究

目的:利用基因芯片技术建立高效、特异的检测食品中绦虫、弓形虫和旋毛虫的方法。方法:本文选用弓形虫B1基因、旋毛虫SB2基因、绦虫12SrDNA上的可变区设计引物及探针,点样于玻片制成基因芯片。寄生虫DNA经过引物扩增后与芯片上的探针杂交,然后通过扫描图象对结果进行判断。对基因芯片检测的特异性、灵敏性进行了评价,并对模拟污染样本进行了检测,以验证所建立的方法。结果:设计的引物能够扩增三种寄生虫,而且探针的特异性很高。本体系的基因芯片杂交检测敏感度约为15 ng/m l。以食品中旋毛虫为例,可以检测出1条旋毛虫/200 mg。实际检测模拟污染的样本的正确率达到100%。结论:成功制备了检测弓形虫、旋毛虫和绦虫的基因芯片,具有快速、灵敏、特异等特点。     

TLR9对巨噬细胞向M1型极化及M1型巨噬细胞条件培养基诱导内皮细胞凋亡的影响

目的 探讨Toll样受体9(TLR9)对巨噬细胞向M1型极化及M1型巨噬细胞条件培养基诱导内皮细胞凋亡的影响.方法 培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人急性单核细胞白血病细胞(THP-1).THP-1细胞分为八组:A1组仅加入培养基培养;A2组用佛波酯(PMA)处理;A3组用PMA和脂多糖(LPS)处理,建立M1型巨...     

PCR和实时荧光PCR方法检测华支睾吸虫

目的利用PCR技术建立快速、灵敏、特异的检测华支睾吸虫的方法，比较PCR和实时荧光PCR检测华支睾吸虫的灵敏性和特异性，探讨其在华支睾吸虫检测中的应用。方法根据华支睾吸虫的特异性基因序列，设计了PCR引物及实时荧光PCR的特异性引物和探针，分别进行灵敏性和特异性试验。结果设计的引物能够扩增华支睾吸虫，而且探针的特异性很高。实时荧光PCR对华支睾吸虫的最低检测浓度为3fg/ul，实时荧光PCR的灵敏性比常规PCR高2个数量级。结论PCR和实时荧光PCR检测华支睾吸虫的准确性和特异性均高，操作简便，为华支睾吸虫感染的诊治和预防提供有效的技术手段和方法依据。