SRC激酶抑制剂PP2 通过上调Cx43蛋白表达降低肺癌A549 细胞的侵袭和转移

目的观察SRC激酶抑制剂PP2对肺癌细胞A549侵袭转移能力的影响,并探讨相关机制。方法采用MTT法检测PP2对 A549细胞的增殖抑制作用;利用细胞划痕实验和Transwell 实验分别测定不同浓度PP2处理A549细胞24 h后的侵袭和转移能 力;采用Western blot法检测SiRNA沉默Cx43基因、mRNA过表达Cx43基因和PP2处理后细胞内Cx43、MMP-2的表达。结果 MTT法显示2、4、8、16、32 μmol/L PP2显著抑制A549细胞的增殖,且在该范围内有浓度依赖性。采用1、2、4、8、16 μmol/L PP2分 别作用于A549细胞24 h,细胞的侵袭、转移能力也逐渐降低（P<0.05）。4 μmol/L 和8 μmol/L PP2可以显著增加细胞Cx43蛋白 水平,降低MMP-2蛋白水平。过表达Cx43蛋白后,PP2抑制细胞侵袭转移能力增强;沉默Cx43蛋白后,PP2抑制细胞侵袭转移 能力降低（P<0.05）。结论SRC激酶抑制剂PP2可以降低肺癌细胞A549的侵袭转移能力,该作用与细胞Cx43蛋白的表达有关。     

甘珀酸增强RSL3对耐顺铂睾丸癌细胞增殖、侵袭和迁移的抑制作用

目的 探讨铁死亡诱导剂RSL3对耐顺铂睾丸癌细胞（I-10/DDP）增殖、侵袭和迁移能力的影响以及甘珀酸对RSL3抗耐药睾丸癌活性的作用。方法 MTT法检测不同浓度RSL3（0、1、2、4、8、16、32 μmol/L）及合用甘珀酸（100 μmol/L）作用后I-10/DDP细胞的存活率、铁死亡抑制剂Fer-1（2 μmol/L）的作用下RSL3（4 μmol/L）及甘珀酸（100 μmol/L）合用RSL3（4 μmol/L）处理后I-10/DDP细胞的存活率。后续实验分为Control组、甘珀酸（100 μmol/L）组、RSL3（2 μmol/L）组、甘珀酸（100 μmol/L）合用RSL3（2 μmol/L）组,采用集落克隆实验检测细胞增殖能力、划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭与迁移能力。Western blot检测GPX4水平、C11 BODIPY 581/591荧光探针检测lipid 活性氧（ROS）水平、FerroOrange荧光探针检测Fe2+水平。结果 RSL3呈浓度依赖性降低I-10/DDP细胞存活率,且在RSL3浓度2、4、8 μmol/L 时,合用甘珀酸后细胞存活率显著降低（P<0.05）;与Control组相比,RSL3处理后I-10/DDP细胞的集落形成数减少、划痕愈合率减小（P=0.012）、侵袭和迁移细胞数减少（P<0.001）;与单用RSL3相比,甘珀酸合用RSL3处理后I-10/DDP细胞的集落形成数显著减少、划痕愈合率显著减小（P=0.005）、侵袭和迁移细胞数显著减少（P=0.001,P=0.002）。Fer-1降低单用RSL3、甘珀酸合用RSL3对I-10/DDP细胞增殖的抑制率（P<0.01）;与Control组相比,RSL3作用后细胞内GPX4水平降低（P=0.001）、lipid ROS 水平（P=0.001）和Fe2+水平升高;且与单用RSL3相比,甘珀酸合用RSL3处理后细胞内GPX4水平明显降低（P=0.01）、lipid ROS 水平（P=0.001）和Fe2+水平明显升高。结论 RSL3可诱导耐顺铂睾丸癌细胞发生铁死亡,并能抑制细胞增殖、侵袭和迁移能力;甘珀酸通过促进RSL3诱导的铁死亡从而增强RSL3的抑制作用。     

Cx32、Src/FAK信号通路在肝癌组织中的表达及其与肝癌术后患者预后的关系

目的 探讨肝细胞癌（肝癌）组织中连接蛋白Cx32、磷酸化Src(p-Src)Y416、总Src(total Src)、磷酸化局部黏着斑激素（p-FAK）Y925、总FAK(total FAK)蛋白表达水平对肝癌术后患者预后的影响。方法 收集97例接受根治性手术肝癌患者的肝癌组织标本和相应的癌旁组织标本,使用免疫组织化学（免疫组化）染色法测定Cx32、p-Src Y416、total Src、p-FAK Y925和total FAK的蛋白表达水平,并对肝癌患者术后随访5年,采用单因素和多因素Cox回归分析肝癌患者术后死亡的影响因素,并使用Kaplan-Meier法计算生存率。结果 免疫组化染色结果显示肝癌组织中Cx32的阳性表达率低于相应的癌旁组织,而p-Src Y416、total Src、p-FAK Y925、total FAK的蛋白阳性表达率均高于相应的癌旁组织（P均<0.05）。单因素Cox回归分析显示,年龄、肿瘤分化程度、肿瘤直径、Cx32、p-Src、total Src、p-FAK Y925、total FAK是肝癌患者术后死亡的8个可疑影响因素（P均<0.05）...     

液相色谱-串联质谱法测定美托洛尔缓释片的人体药动学及生物等效性

目的建立测定人血浆中美托洛尔浓度的液相色谱-串联质谱(LC—MS/MS)法,研究健康受试者单剂量和多剂量口服美托洛尔受试制剂和参比制剂后的药动学和生物等效性。方法40名男性健康志愿者进行随机双交叉试验,分别单剂量和多剂量口服美托洛尔受试制剂和参比制剂100 mg,采用LC—MS/ MS法测定血药浓度,用DAS软件计算主要药动学参数。结果单剂量时受试制剂和参比制剂的主要药动学参数如下:c_(max)分别为(144±s 43)和(164±40)μg·L~(-1),t_(max)分别为(3.7±1.2)和(3.5±0.8)h,t_(1/2)分别为(6.0±2.5)和(4.9±2.0)h,AUC_(0～24)分别为(1 639±787)和(1 658±636)μg·h·L~(-1),相对生物利用度为(97±21)%。多剂量达稳态时受试制剂和参比制剂的主要药动学参数如下:c_(max)分别为(241±170)和(232±75)μg·L~(-1),c_(min)分别为(115±66)和(121±64)μg·L~(-1),t_(max)分别为(3.7±1.0)和(3.5±1.6)h,AUC_(ss)分别为(1 905±882)和(1 992±834)μg·h·L~(-1),c_(av)分别为(159±73)和(166±69)μg·L~(-1),DF分别为(77±30)%和(75±31)%。受试制剂与参比制剂的AUC_(0～t),AUC_(0～∞)或AUC_(ss),c_(max)和t_(max)均符合生物等效性要求。结论建立的LC—MS/MS法专属、准确、灵敏度适宜。测定的美托洛尔受试制剂和参比制剂生物等效。     

论双语教学在医学教育中的应用

双语教学的开展在医学教育中具有非常重要的作用,有助于中国学生对世界医学前沿知识的认识及在国际上的交流,但师资、教材、授课方法及学生问题仍然困扰着双语教学的顺利开展,需要得到相应的解决.     

平痤宁胶囊抗炎作用研究

目的观察平痤宁胶囊的抗炎作用。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀，角叉菜胶致大鼠足肿胀模型观察平痤宁胶囊的抗炎作用。结果连续3d口服平痤宁胶囊对小鼠耳肿胀、大鼠足肿胀模型均有明显的抑制作用（P〈0．01）。结论平痤宁胶囊具有较好的抗炎作用，并呈现一定的量效关系。     

硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对乳腺癌细胞的抑制与诱导凋亡作用

目的：观察两种硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）对MDA-MB-231乳腺癌细胞生长的影响及机制。方法：利用MTT 法和生长曲线的绘制检测不同浓度的HSPG在不同时间对MDA-MB-231细胞的抑制作用, 流式细胞术结合Annexin V-FITC 及PI双标记染色检测分析HSPG 对MDA-MB-231细胞凋亡的影响。结果： MTT法测得不同浓度MCF-7 type HSPG作用于MDA-MB-231后24h、48h、72h均可明显抑制肿瘤细胞生长，并且呈现出剂量依赖性；生长曲线结果显示不同浓度MCF-7 type HSPG可明显抑制MDA-MB-231的生长；流式细胞术显示MCF-7 type HSPG诱导MDA-MB-231细胞凋亡增加；MDA-MB-231 type HSPG对其源细胞（MDA-MB-231）则无明显的生长抑制作用，对其凋亡率无明显影响。结论：MCF-7 type HSPG对MDA-MB-231细胞生长具有显著的抑制作用，其机制可能与诱导细胞凋亡有关。     

对乙酰氨基酚过量致精神异常、肾损害及低血糖昏迷

1例29岁男性患者,1 d 内服用对乙酰氨基酚片(0.5 g)共20片后出现语无伦次,行为异常.入院后实验室检查:ALT 26 U/L,AST 16 U/L;BUN 43 mmol/L,SCr 235 μmol/L,血糖4.2 mmol/L.第2天患者出现昏迷,血糖1.2 mmol/L.经对症治疗,2周后血糖及肾功能均恢复正常.     

黄芩素对缝隙连接蛋白Cx32组成的GJIC功能的影响

目的:在转染并稳定表达Cx32的HeLa细胞上,观察黄芩素对Cx32组成的GJIC及Cx32蛋白表达水平的影响。方法:细胞接种荧光示踪法观察不同浓度黄芩素对GJIC的影响;细胞免疫荧光法观察黄芩素在影响GJIC功能浓度范围内对Cx32蛋白表达的影响。结果:黄芩素(2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L)增强Cx32组成的GJIC功能的荧光渗透率为10.04%,22.5%和35.33%;黄芩素(2.5μmol/L,5μmol/L,10μmol/L)增强组成GJIC的Cx32蛋白表达的荧光强度为(27.12±0.30)%,(56.31±1.02)%和(83.47±1.85)%。结论:黄芩素可增强缝隙连接蛋白Cx32组成的GJIC功能,其机制可能与增加Cx32蛋白表达水平有关。     

下调Pannexin2通道能增强顺铂诱导睾丸癌（I-10）细胞凋亡

目的 探讨Pannexin2（Panx-2）蛋白在睾丸癌细胞中的表达水平以及干扰Panx-2表达对顺铂诱导睾丸癌（I-10）细胞凋亡的影响。方法 免疫印迹法Panx-2蛋白在睾丸癌细胞中的表达水平；以睾丸癌I-10细胞株为研究对象，实验分为转染试剂对照组（mork组）、阴性对照质粒组（NC组）、干扰Panx-2组（shRNA1质粒组和shRNA2质粒组），采用免疫印迹法验证Panx-2的表达；在转染细胞中添加16 μmol/L的顺铂诱导细胞死亡，通过MTT法分别检测细胞在24、48、72 h的存活率，集落克隆法检测细胞的集落形成能力；在顺铂（16 μmol/L）处理8 h后，采用AnnexinV/PI双染法检测细胞的早期凋亡；在顺铂（16 μmol/L）作用24 h后， 免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白caspase 3、Bcl-2和Bax的表达水平。结果 与I-10细胞和Tcam-2细胞相比，I-10/DDP细胞（P< 0.001）和Tcam-2/DDP细胞（P<0.01）中Panx-2的表达显著增加；干扰Panx-2基因后，免疫印迹结果显示，与NC组相比，shRNA1和shRNA2组中Panx-2的表达量下降（P<0.05）；MTT法显示shRNA1和shRNA2组细胞的存活率均低于NC组（P<0.001）；在含顺铂培养基的培养下，集落克隆法显示shRNA1和shRNA2组细胞的集落形成能力低于NC组（P<0.001）；AnnexinV/PI双染法显示shRNA1和shRNA2组的早期凋亡率（P<0.01）均低于NC组；免疫印迹结果显示，与NC组相比，shRNA1和shRNA2组中凋亡相关蛋白caspase 3表达升高（P<0.05），Bcl-2表达降低（P<0.01），Bax表达升高（P<0.05）。结论 下调Pannexin2通道能增强顺铂诱导睾丸癌（I-10）细胞凋亡。