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为了研究硫代磷酸化修饰的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对人淋巴瘤细胞系Namalwa细胞VEGF表达的影响,将终浓度分别为5、10、20μmol/L的VEGFASODN和错义序列与人淋巴瘤细胞系Namalwa细胞分别孵育24、48小时,采用RT-PCR检测VEGFmRNA的表达,采用链酶菌抗生素蛋白-过氧化酶免疫组织化学法(streptavidin/peroxidase,SP法)检测VEGF的表达。结果表明:VEGFASODN3个浓度组(5、10和20μmol/L)处理的Namalwa细胞VEGFmRNA的表达分别为1.38、0.96、0.57,错义序列组和对照组分别为1.79、1.84。当加入20μmol/LVEGFASODN作用48小时后,细胞内VEGF蛋白水平显著减少,而错义序列组Namalwa细胞VEGF蛋白水平未见明显改变。结论:VEGFASODN在体外能够抑制Namalwa细胞VEGF的表达。 相似文献
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目的研究锤头状核酶通过调控CD95的表达,对小鼠胰岛细胞凋亡的影响;探索提高胰岛移植物存活率的新途径。方法体外构建针对CD95mRNA93位点的锤头状核酶(pU6-Rz93)和突变型核酶(pU6-dRz93)。采用Ⅴ型胶原酶消化法分离小鼠胰岛细胞,通过干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素1α(IL-1α)诱导其高表达CD95后,经钠米载体-Effectene将核酶转染至该细胞。通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹检测(Westernblot)法检测胰岛细胞CD95的表达。胰岛细胞经抗CD95的抗体(JO2)作用后,以Caspase-3活性检测试剂盒检测转染前后细胞Caspase-3活性的变化;MTT法测细胞的增殖;Annexin-Ⅴ凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡,并观察了各组细胞对细胞毒T淋巴细胞(CTL)杀伤的反应能力。结果细胞因子可诱导小鼠胰岛细胞高表达CD95分子。转染pU6-Rz93组的胰岛细胞CD95的表达与转染空载体组和转染pU6-dRz93组相比,明显下降。经JO2处理后,转染pU6-Rz93组胰岛细胞的Caspase-3活性和凋亡率明显降低,细胞增殖活性和抵抗CTL杀伤的能力显著增强。结论针对FasmRNA93位点的锤头状核酶能显著抑制小鼠胰岛细胞CD95的表达,使其免于CD95途径的凋亡;为提高胰岛移植物的存活率提供了实验基础。 相似文献
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VEGF反义寡核苷酸对K562细胞VEGF表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 研究硫代磷酸化修饰的血管内皮生长因子 (VEGF)反义寡核苷酸 (ASODN)对慢性红白血病细胞K 5 62VEGF表达的影响。方法 将终浓度分别为 10、2 0、3 0 μmol·L-1的VEGFASODN和错义序列与K 5 62细胞分别孵育 2 4、48h ,另设空白对照组。采用RT PCR检测VEGFmRNA的表达 ,免疫组织化学方法检测VEGF蛋白的表达。结果 VEGFA SODN对K 5 62细胞VEGF表达有明显的抑制作用 ,与错义序列组和空白对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 5 )。错义序列组与空白对照组比较VEGF的表达无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 VEGFASODN可下调慢性红白血病细胞K 5 62VEGFmRNA和蛋白的表达水平 相似文献
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目的研究硫代磷酸化修饰的血管内皮生长因子(VEGF)反义寡核苷酸(ASODN)对裸鼠淋巴瘤血管生成的作用。方法将终浓度为20μmol/L的VEGFASODN、错义序列及PBS分别与人淋巴瘤细胞系Namal-wa细胞孵育24h,裸鼠随机分为VEGFASODN组、错义序列组和对照组,将上述处理的Namalwa细胞(5×106溶于PBS液20μl)接种于裸鼠皮下,4周后处死全部裸鼠,测定肿瘤大小,标本采用链酶菌抗生素蛋白-过氧化酶免疫组化法(SP法)检测肿瘤组织微血管密度(MVD)。结果第28天VEGFASODN组、错义序列组和PBS组肿瘤体积的大小分别为(212.6±196.5)、(468.2±161.3)和(473.1±166.7)mm3。VEGFASODN组微血管密度(12.26±0.78)较对照组(24.13±1.21)显著减少。结论VEGFASODN对裸鼠淋巴瘤的生长及其新生血管的生成有明显的抑制作用。 相似文献
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目的:比较甲氨蝶呤联合来氟米特或柳氮磺吡啶治疗类风湿关节炎的疗效和不良反应。方法:40例活动性类风湿关节炎病人随机分为实验组和对照组,实验组用甲氨蝶呤(10mg/周)及来氟米特(20mg/d)治疗,对照组用甲氨蝶呤(10mg/周)及柳氮磺吡啶(2.0g/d)治疗,疗程为24周,对两种方案在12、24周时的疗效及观察指标进行评估。结果:实验组在12、24周时的总有效率分别为85%、95%,对照组为60%、70%,显示两组间差异有显著性。总副反应发生率两者差异无显著性。结论:甲氨蝶呤联合来氟米特治疗类风湿类节炎的疗效优于甲氨蝶呤联合柳氮磺吡啶,但前者副反应略大于后者。 相似文献
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强直性脊柱炎是以脊柱特别是骶髂关节的慢性炎症为特征的一类疾病。目前多主张早期用慢作用药物:甲氨喋呤、柳氮磺吡啶及雷公藤多甙等。来氟米特是一种新型的免疫抑制剂,我们用来氟米特治疗强直性脊柱炎,观察其对强直性脊柱炎的疗效,并与柳氮磺吡啶作对照,现将结果报道如下。对 相似文献