口腔局部使用干扰素对小鼠唾液SIgA的调节

目的 :了解干扰素对口腔粘膜分泌SIgA的调节作用。方法 :以生物素 -ELISA法检测口腔使用干扰素前后小鼠唾液SIgA的水平。结果 :大、小剂量干扰素组在用药后 10天、2 0天和 3 0天都能增高唾液SIgA ,并同对照组相比有显著差异 (P <0 0 5 ) ;大剂量组SIgA的增高更多 ,特别是在 2 0天时明显高于小剂量组 (P <0 0 5 ) ;干扰素的调节作用持续至少 3 0天 ,小剂量在维持作用方面不亚于大剂量。结论 :干扰素直接作用于口腔粘膜 ,可提高局部的SIgA的分泌水平。     

静脉用丙种球蛋白治疗新生儿重症感染对细胞免疫功能的影响

应用静脉注丙球(IVIG),配合抗生素(An)治疗重症感染新生儿12例,在观察疗效及不良反应的同时,通过检测患儿治疗前后T细胞亚群及白细胞介素Ⅱ(IL-2)产生水平的变化,观察IVIG对细胞免疫功能的影响。结果显示:患儿CD_3~+、CD_4~+、CD_8~+细胞及IL-2产生水平均明显低于正常同龄新生儿。经IVIG+An及单用An治疗后,T细胞各亚群及IL-2水平均明显增高。IVIG组与An组比较,诒疗后IVIG组CD_4~+细胞明显高于An组,IL-2水平也较An组为高,但无统计学意义。疗效观察,中毒症状及原发病体征好转消失时间IVIG组较An组明显缩短。本文还就IVIG对细胞免疫功能影响的可能机制进行了讨论。     

人脐静脉内皮细胞产生IL—6的研究

本文在建立了人脐静脉内皮细胞体外培养的基础上，用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法检测了培养的人脐静脉内皮细胞产生ＩＬ－６的情况。结果表明：Ｗ本外培养的人脐静内皮细胞可自然分泌少量的ＩＬ－６，而在ＬＰＳ、类脂Ａ、ＨｒＴＮＦα，ＨｒＩＬ－１β等炎性因子刺激下，其产生ＩＬ－６的能力明显增强，且呈剂量依赖。同时还发现，上述因子诱导内皮细胞产生ＩＬ－６的能力不同，ＬＰＳ类脂Ａ明显低于ＨｒＴＮＦα和ＨｒＩＬ１β，而以Ｈ     

ConA诱导人T抑制细胞活性的微量检测法——K562细胞测定法

抑制性T细胞(Ts)在免疫反应及各种免疫疾患的发生发展中均起着重要作用,测定其功能,有助于探讨这些疾病的发病机理并指导治疗。常用的测定方法是ConA诱导抑制细胞(ConA-SC)活性测定法。传统的方法有不少缺点,我们对其进行了改进,建立了一种PAK562细胞为靶细胞进行微量测定的方法,现简要报告如下。 材料与方法 常规分离人外周血单个核细胞(MNC),与ConA(对照管不加ConA)共育48小时后,用Hanks液洗3次,以培养液配成浓度为     

重组人L型丙酮酸激酶N末端单克隆抗体的制备与鉴定

目的 制备抗人L型丙酮酸激酶N末端(PK-N)的单克隆抗体并对其特异性进行鉴定.方法 以PK-N-GST-tag表达蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O细胞融合,经多次筛选及克隆化,建立能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的杂交瘤细胞株.用ELISA、Western blot、免疫组化对此单克隆抗体特性进行鉴定.结果 筛选到两株能稳定分泌抗PK-N单克隆抗体的细胞株,亚类鉴定重链为IgGzb,轻链为kappa链.ELISA法测定腹水效价分别为1:409600和1:102400,抗体相对亲和力分别为3.54×108L/mol和2.72×108:L/mol.Western blot显示抗体能特异识别免疫原和人肝细胞株HL-7702中的天然丙酮酸激酶蛋白.免疫组化进一步显示了其在细胞及组织中的定位,均匀的分布于细胞的胞浆中.结论 成功制备了抗PK-N单克隆抗体.     

改良MTT法检测自然杀伤细胞的活性

采用经作者改良的ＭＴＴ比色测定自然杀伤细胞（ＮＫＣ）活性。结果显示：在效应细胞（ＥＣ）和靶细胞（ＴＣ）活性均≥９５％，ＥＣ≥３．０×１０２／Ｗｅｌ、ＴＣ≥１．６×１０２／Ｗｅｌ时，细胞还原ＭＴＴ产生的甲瓒溶解后的ＯＤ５７０ｎｍ值与细胞数成线性相关（ｒｅ＝０．９４，ｒｔ＝０．９７，Ｐ＜０．００１）。本法在测得ＥＣ∶ＴＣ为４０∶１时，正常人外周血ＮＫＣ活性为４５．６４％。用本法和３Ｈ－ＴｄＲ掺入抑制试验同时测定１０份白血病患者外周血ＮＫＣ活性，分别为３４．８６±７．８０％和３５．１６±８．４０％，两者呈良好的正相关（ｒ＝０．８７６，Ｐ＜０．００１）。本法简便、稳定可靠，是一种很有价值的测定ＮＫＣ活性的方法。     

重症肌无力患者外周血单个核细胞白细胞介素6活性变化

探讨白细胞介素 6(IL -6)在重症肌无力 (MG)发病机理中的作用及其临床意义。　　方法　采用3H -TdR掺入法检测 40例正常对照及 42例MG患者外周血单个核细胞IL -6分泌活性。　　结果　MG患者组IL -6活性显著高于正常对照组 ,且IL -6活性变化与乙酰胆碱受体抗体产生以及与MG临床类型、病情、预后密切相关。　　结论　IL -6在MG发病机理中起着重要作用 ,检测IL -6活性对区分MG临床类型、判断病情、推测预后、指导治疗有重要的参考价值。     

重组IL-1受体拮抗剂单克隆抗体的鉴定

采用点印迹法与Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ技术对ｒＩＬ－１ｒａＭｃＡｂｓ进行了鉴定。结果表明：抗ｒＩＬ－１ｒａＭｃＡｂ２Ｅ４在点印迹中识别信号为阳性（＋＋），经转移电泳后可在ＮＣ膜上特异性识别ｒＩＬ－１ｒａ（２０ｋｄ）；ＰｃＡｂ对照识别结果进一步表明Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ技术的高度敏感性及ＭｃＡｂ２Ｅ４的高度特异性。此株单抗的鉴定成功将有助于进一步认识ＩＬ－１的生物学活性，特别是在炎症疾病中的病理作用，以指导ｒＩＬ－１ｒａ治疗炎症的临床应用     

常染色体显性高度近视一家系连锁定位分析

目的 通过连锁定位分析,探讨一个中国原发性高度近视家系的致病基因与已报道高度近视相关连锁位点的关系.方法 选择一个连续3代发病的常染色体显性高度近视家系,选取位于18p11.31,12q21-23,7q36,17q21-23,4q22-27,2q,37.1,7p15.3,15q12-13,10q21.1这9个已报道的常染色体显性高度近视致病基因连锁位点的18个多态性微卫星标记物进行STR基因分型,采用两点法进行连锁分析.结果 本家系受累者皆为高度近视,屈光度从-6.00D到-20.00D不等,符合常染色体显性遗传特征.分析显示此9个遗传标记位点与该家系致病基因均不连锁,比值比均<-1.结论 该家系存在一个新的致病基因连锁位点,需进一步实施全基因组多态性微卫星标记连锁分析以确定该家系致病基因的染色体定位.