过氧化物酶体增殖物活化的受体γ特异配体罗格列酮对肝星状细胞生物学特性的影响

目的　研究过氧化物酶体增殖物活化的受体γ(PPARγ)特异配体罗格列酮对肝星状细胞(HSC)PPARγ 表达以及对HSC生物学特性的影响。　方法　设立空白对照组、3μmol L罗格列酮组、10μmol L罗格列酮组;分别 用RT PCR、Western印迹、免疫细胞化学方法检测PPARγ的表达;用Western印迹和免疫细胞化学方法检测α 平滑肌 肌动蛋白(α SMA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达;四甲基偶氮唑盐(methythiazolyltetrazolium,MTT)法检测细胞增殖;流式细胞 仪分析细胞凋亡。　结果　10μmol L罗格列酮组HSC的PPARγmRNA表达明显高于对照组(t=10.87,P<0.01), PPARγ蛋白表达也明显高于对照组(t=4.627,P<0.01);10μmol L罗格列酮组HSC的增殖活性显著低于对照组(t ≥5.542,P<0.01),其α SMA及Ⅰ型胶原表达明显低于对照组(t≥4.627,P<0.01),其凋亡发生率显著高于对照组 (χ2=16.682,P<0.01)。　结论　PPARγ特异配体罗格列酮通过增加PPARγ的表达,能够抑制激活的HSC表达α SMA及Ⅰ胶原,抑制激活的HSC增殖,诱导激活的HSC凋亡。     

大鼠肝星状细胞中生长抑素受体表达的研究

应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测肝星状细胞（HSC）中5个生长抑素受体（SSTR）亚型的表达情况，从侧面探索生长抑素影响肝纤维化的作用机制。针对试验结果中SSTR的表达情况，采用异硫氰酸荧光素（FITC）标记的奥曲肽（OCT）作用于体外培训的HSC，然后在共聚焦显微镜下观察活细胞中奥曲肽的分布情况，从形态学上证实SSTR的存在。     

人肝癌组织中核内转录基因Fos B和Jun D的表达及其意义

目的　探讨Fos和Jun的表达产物与人肝细胞癌发生、发展的关系。　方法　采用免疫组织化学S-P法和蛋白电泳技术对20例肝癌病人癌及癌旁组织中Fos和Jun核内癌蛋白的表达情况进行检测。结果　Westernblot结果示20例标本中有16例肝癌组织FosB、JunD蛋白含量高于癌旁组织。FosB光密度值在肝癌及癌旁组织中分别为2396±803和894±319,差异有显著意义（P＜0.01）;JunD光密度值在肝癌及癌旁组织中分别为1973±725和776±161,差异有显著意义（P＜0.05）。免疫组织化学结果显示FosB和JunD蛋白在肝癌组织细胞核中同步表达。　结论　在人原发性肝细胞癌组织中,核内转录基因FosB、JunD表达产物表达强度明显增高,这可能是肝细胞早期恶变的重要原因之一。     

白细胞介素-10对与枯否细胞共培养的肝星状细胞表达转移生长因子-β和血小板源生长因子的影响

目的　探讨白细胞介素 (IL) 10对与枯否细胞 (KC)共培养的肝星状细胞 (HSC)表达转移生长因子 (TGF) β和血小板源生长因子 (PDGF)的影响。 方法　分离培养大鼠的KC ,建立HSC与KC的共培养系统 ,分为 4组 :1组为HSC单独培养组 ;2组为HSC与KC共培养组 ,不加IL 10 ;3组为HSC与KC共培养组 ,加入 1.5 μg/LIL 10 ;4组为HSC与KC共培养组 ,加入 15 .0μg/LIL 10。培养 48h后 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR )法检测各组细胞中TGF β和PDGFmRNA的表达。Westernblot法检测各组细胞TGF β和PDGF蛋白的表达。 结果　KC能促进HSC表达TGF β和PDGF ;IL 10能抑制与KC共培养的HSC的TGF β和PDGF的表达。 结论　IL 10能通过KC对HSC的生物学活性产生影响。     

白细胞介素10对肝星状细胞激活的调节

目的 探讨白细胞介素10(IL-10)通过血小板衍生生长因子(PDGF)和丝裂原活化激酶(MAPK)信号通路蛋白对肝星状细胞(HSC)激活的影响。 方法 将培养的HSC随机分为4组:1组:对照组;2组:加入1 ng/ml IL-10;3组:加入5 ng/ml IL-10;4组:加入25 ng/ml IL-10。培养2d后,逆转录-聚合酶链反应法检测各组细胞中PDGF mRNA的表达;western blot法检测各组细胞PDGF、MAPK信号通路蛋白细胞外信号调节激酶(ERK)和p38以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。 结果 1、5、25 ng/ml的IL-10作用后,与对照组相比HSC的ERK、p38以及α-SMA的表达显著降低(F值分别为240.47、21.39、28.86,P值均<0.01),并呈量效依赖关系;5、25 ng/ml的IL-10可以使PDGF表达显著降低(P值均<0.01),并呈量效依赖关系。 结论 IL-10可通过PDGF/MAPK信号通路抑制肝星状细胞激活。