维生素K代谢相关基因CYP4F2参与凝血因子FⅨ活化的研究

目的探索维生素K代谢相关基因CYP4F2对维生素K依赖性凝血因子活化(凝血因子FⅨ为例)的影响。方法构建同时含有CYP4F2-cDNA片段与FⅨ-cDNA片段的pIRES质粒,通过酶切验证。使用Lipofectamine 2000转染试剂,将构建成功的pIRES-FⅨ-CYP4F2质粒以及pIRES-FⅨ质粒、pIRES空白对照质粒瞬时转染LO2细胞。在不同质粒转染的细胞中,通过Western blotting验证CYP4F2和FⅨ蛋白的表达,应用FⅨa Assay检测试剂盒检测FⅨa活性。结果经酶切证实,pIRES-FⅨ-CYP4F2质粒构建成功。Western blotting证实,pIRES-FⅨ及pIRES-FⅨ-CYP4F2质粒成功转染LO2细胞。FⅨa Assay检测发现,在过表达FⅨ的LO2细胞培养上清和细胞裂解液中,FⅨa活性较对照组显著升高;当同时过表达CYP4F2和FⅨ后,LO2细胞培养上清和细胞裂解液中的FⅨa活性较单独过表达FⅨ组明显降低。结论维生素K代谢相关基因CYP4F2的过表达对维生素K依赖性FⅨ的活化具有抑制作用。     

健康成年男性血栓弹力图参考值范围的研究

目的测定健康成年男性血栓弹力图(TEG)的参考值范围,并与厂家提供的数据进行比较。方法采集60例北京地区中国健康成年男性志愿者外周静脉血,应用西芬斯血栓弹力图仪LEPU-8800(北京乐普)分别测定凝血反应时间(R)、凝血形成时间(K)、凝固角(a-Angle)、30min纤维蛋白溶解率(LY30)、综合凝血指数(CI)、二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板抑制率及MA值。结果 60例志愿者平均年龄(24.84±4.21)岁,TEG各参数范围分别为R:4.89~10.77min,K:1.31~4.05min,a-Angle:42.64°~66.16°,MA:41.35~62.39mm,LY30:―2.35%~1.95%,CI:―7.12~0.32。4项主要指标(R、K、a-Angle、MA)中53.3%(32/60)的志愿者至少有1项指标在厂家参考值范围之外。根据Kaufmann分类法,20%(12/60)的志愿者被诊断为凝血异常。ADP抑制率检测37例小于20%,23例约为20%~50%;MA值检测42例约为31~47mm,18例大于47mm。结论北京地区健康成年男性TEG参数实际参考值与厂家提供的参考值存在差异,实验室应对该地区人群特点建立新的TEG参考值范围。     

基于中国健康人群血栓弹力图正常参考区间的建立及必要性分析

目的通过测定中国健康志愿者血栓弹力图(TEG)正常参数值范围,探讨建立符合中国人群区域特征的正常参考值范围的必要性。方法于2017年7月,在北京乐健体检中心连续募集了凝血四项检测正常的中国汉族健康成年志愿者。采集所有入选者外周静脉全血,应用TEG分析仪测定如下参数:R、K、Alpha-angle(α)、MA、LY30和CI值的正常值范围,分析其与现有TEG正常参考值范围的差异,以及与凝血四项指标包括凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化的部分凝血活酶时间(APTT)和血浆纤维蛋白原(Fib)的相关性。结果总计募集了303例(男性138名,女性165名)符合入选标准的健康志愿者,TEG各参数正常值范围分别为R:4.1~8.9min,K:1.1~3.1min,Alpha-angle(α):49.5°~72.3°,MA:54.4~71.2mm,LY30:0%~1.7%,CI:-3.6~2.6。各参数在不同年龄区间无明显差异,R、K、α-angle、MA和CI在不同性别间存在显著的统计学差异(P<0.05)。参照现有TEG正常参考值范围,健康志愿者中的7.3%将被诊断为凝血异常,检测的特异性为77.2%。对TEG和凝血四项的相关性分析发现,APTT与R值呈正相关,FIB与α-angle、MA及CI呈正相关,PT和TT与TEG参数无明显相关性。结论有必要建立符合中国人群特征的TEG正常参考值范围,TEG不可替代传统的凝血四项检测。     

血小板源性 miR-126 的功能基因多态性与急性冠状动脉综合征患者氯吡格雷抗血小板反应性及疗效的相关性

目的分析血小板源性miR-126的功能基因多态性rs4636297与急性冠状动脉综合征(ACS)患者氯吡格雷抗血小板反应性及疗效的相关性。方法连续募集2015年11月至2017年2月在解放军总医院第一医学中心心血管内科住院期间接受氯吡格雷联合阿司匹林双联抗血小板治疗,同时在稳定抗栓治疗第3天接受血小板反应性检测的ACS患者。提取患者外周全血DNA并进行miR-126的功能基因多态性rs4636297的基因检测。对所有患者进行1年随访,主要监测缺血事件发生情况。采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析。通过logistic回归分析与氯吡格雷抗血小板反应性以及1年内主要缺血终点事件相关的独立影响因素。结果入选364例经氯吡格雷和阿司匹林双联抗血小板治疗的ACS患者,根据血小板反应性检测结果,193例入选血小板高反应性(HTPR)组,171例入选血小板低反应性(LTPR)组。经多因素校正分析后,HTPR组携带rs4636297 A等位基因的比例仍明显高于LTPR组(OR=1.85,95%CI:1.16~2.96;P=0.010);通过1年随访观察发现,A等位基因携带者发生主要缺血终点事件的风险明显高于非携带者(OR=4.09,95%CI:1.25~13.35;P=0.020)。结论血小板源性miR-126的功能基因多态性rs4636297可能影响ACS患者氯吡格雷抗血小板治疗的反应性及疗效。     

某干休所高龄冠心病和房颤患者抗栓治疗情况调查

目的分析某军队干休所高龄冠心病(CHD)和心房颤动(AF)患者抗栓治疗的现状,为制定针对该人群的个体化治疗方案提供参考依据。方法募集2015年7月至2016年7月生活于某军队干休所的高龄(≥80岁)患者190例,男性167例,女性23例,年龄81~98(87.8±3.6)岁,通过收集临床病历资料,了解不同类型冠心病患者和房颤患者抗栓治疗情况。采用SPSS 18.0统计软件对数据进行分析。组间比较采用χ2检验。结果 190例患者中CHD患者占41.05%(78/190),AF患者占14.74%(28/190),AF合并CHD患者占4.21%(8/190)。CHD患者中91.02%(71/78)接受了抗栓治疗,其中69.23%(54/78)患者采用双联抗血小板治疗(DAPT)方案,17.95%(14/78)患者单用阿司匹林或氯吡格雷治疗,1.28%(1/78)患者使用华法林治疗,2.56%(2/78)患者使用其他抗血小板药物。8.97%(7/78)患者未使用任何抗栓药物,无1例患者使用新型强效抗血小板药替格瑞洛。AF患者中28.57%(8/28)接受抗凝治疗,其中21.43%(6/28)使用华法林,7.14%(2/28)使用新型口服抗凝药。60.71%(17/28)接受抗血小板治疗,其中21.43%(6/28)患者接受DAPT方案,7.14%(2/28)的患者使用氯吡格雷,32.14%(9/28)患者使用阿司匹林。10.71%(3/28)患者未接受任何抗栓治疗。8例AF合并CHD患者中,2例使用华法林或肝素联合DAPT方案,4例使用DAPT方案,2例仅使用阿司匹林治疗。3组不同冠心病类型患者抗栓治疗比较结果表明,稳定性冠心病(SCAD)患者中单用阿司匹林者占25.00%(9/36),明显高于急性冠脉综合征(ACS)和经皮冠状动脉介入(PCI)术后1年患者,差异具有统计学意义(P=0.005)。PCI术后1年患者中使用DAPT方案占92.86%(26/28),明显高于SCAD和ACS患者,差异具有统计学意义(P=0.000)。结论尽管军队干休所医疗条件好,高龄CHD和AF患者抗栓治疗仍不够规范,新型口服抗血小板和抗凝药物应用经验不足。     

老年急性冠脉综合征或经皮冠状动脉介入术后患者应用替格瑞洛早期停药对临床转归的影响

目的探讨≥75岁急性冠脉综合征(ACS)或经皮冠状动脉介入(PCI)支架植入术后患者应用替格瑞洛早期停药对临床转归的影响。方法连续募集2014年1月至2016年5月在解放军总医院心血管内科住院期间接受替格瑞洛联合阿司匹林双联抗血小板治疗的≥75岁ACS或PCI支架植入术后患者。分析患者早期(服用3个月内)替格瑞洛停用发生情况、停药原因及停药对患者1年内发生主要缺血终点事件(心源性死亡、非致死性心肌梗死、非致死性脑卒中、紧急血运重建、早期支架内血栓形成、晚期支架内血栓形成)及主要出血终点事件(出血学术研究联合会≥3型)的影响。结果本研究共募集190例符合入选标准的病例,年龄(78. 7±3. 6)岁,其中65例(占34. 2%)患者早期停用替格瑞洛。早期停药患者1年内主要缺血终点事件的发生率显著高于持续替格瑞洛治疗患者(13. 8%vs 5. 7%;HR=3. 57,95%CI 1. 15~11. 09;P=0. 03)。1年内主要出血终点事件在早期停药患者与持续替格瑞洛治疗患者之间差异无统计学意义(1. 5%vs 2. 4%;HR=0. 57,95%CI0. 05~6. 00;P=0. 64)。结论老年(≥75岁) ACS或PCI术后患者早期(3个月内)停用替格瑞洛可能增加主要缺血事件发生风险。