基于网络药理学研究金银花在盆腔炎性疾病中的作用机制

目的：通过网络药理学方法研究金银花对于盆腔炎性疾病的有效活性成分、靶点和潜在分子机制。方法：TCMSP数据库筛选金银花的活性成分及作用靶点,GeneCards数据库检索出盆腔炎性疾病靶点,通过Drugbank和Uniprot数据库将靶点标准化后取交集;Cytoscape 3.9.0构建药物—成分—靶点网络,交集基因建立蛋白质相互作用网络,利用MCODE和Metascape数据库分析核心靶点基因,通过Metascape数据库对相关靶点GO生物富集分析和KEGG通路分析,体外测金银花对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度。结果：筛选到金银花119个有效靶点和盆腔炎性疾病相关的疾病靶点1 038个,两者共同靶点有62个;PPI网络中核心基因有APP、NTRK1、TP53、EGFR、ESR1。GO富集分析主要涉及丝氨酸水解酶活性、磷酸酶的结合、丝氨酸肽链内切酶活性、蛋白酶结合;KEGG通路富集分析结果显示,共同靶点可通过细胞流体切应力与动脉粥样硬化、AGE-RAGE细胞传导通路和IL-17细胞传导通路等多条信号通路发挥作用;体外抑菌实验表明金银花在6.25 mg/mL及以上浓度对金黄色葡萄球菌具有明显...     

AMD3100干预调节性T细胞迁移机制研究

CXCR4+细胞在CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞亚群中占有一定的比例。趋化因子CXCL12与细胞表面的特异性受体CXCR4相互作用,调节这些细胞的迁移和归巢等生理过程。AMD3100是一种人工合成的大环类拮抗剂,可特异性拮抗CXCR4。本研究采用磁珠亲和细胞分选术纯化BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞,并采用transwell共培养系统,研究AMD3100对调节性T细胞迁移的影响。研究发现,AMD3100以剂量依赖性模式抑制CXCR4+CD4+CD25+T细胞从transwell培养系统的上室迁移至下室,采用中和抗体阻断CXCR4可观察到相似效应。当AMD3100终浓度为2.0μg/ml时,迁移到下室的CXCR4+细胞占总数的2.2%,显著低于磷酸盐缓冲液对照组(36.2%)(P<0.01)。此外,CD4+CD25+细胞24h迁移率也显著下降(AMD3100处理组和磷酸盐缓冲液对照组分别为3.1%和35.5%,P<0.01)。提示AMD3100可特异性抑制CXCR4+CD4+CD25+细胞迁移。由于CXCR4是CXCL12的特异性受体,这一效应提示AMD3100可削弱CXCL12的作用。此外,由于AMD3100处理后可使CD4+CD25+细胞24h迁移率下降,提示这种拮抗剂有可能短时间内削弱调节性T细胞的功能。     

顺铂耐药卵巢癌细胞化疗敏感性实验

【目的】研究顺铂（DDP）、洛铂（LBP）、紫杉醇（PTX）、吉西他滨（GEM）对卵巢癌SKOV3细胞及顺铂耐药SKOV3/DDP细胞增殖的影响。【方法】培养基中不含药物的处理组为对照组,加入不同浓度化疗药物的处理组为实验组。在相差显微镜下观察细胞形态变化;用MTT法测定单药应用、双药联合使用对两种细胞生长的影响;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化。【结果】SKOV3∕DDP细胞耐药指数为7.10&#177;2.19。紫杉醇、洛铂、吉西他滨对两种细胞的抑制率无明显差别。洛铂、紫杉醇、吉西他滨两药联合组与相应单一用药组相比,能显著抑制肿瘤细胞的生长,其中吉西他滨＋洛铂及紫杉醇＋洛铂组抑制率明显增高。相同浓度顺铂作用48h后,SKOV3/DDP细胞的凋亡率低于SKOV3细胞。洛铂、紫杉醇、吉西他滨作用两种细胞48h后,细胞凋亡率差异无统计学意义。顺铂、洛铂与紫杉醇、吉西他滨主要作用于不同的细胞周期。【结论】SKOV3/DDP细胞对紫杉醇、洛铂、吉西他滨无交叉耐药。联合用药有高效协同抑制细胞生长作用,临床治疗卵巢癌顺铂耐药患者可考虑选择吉西他滨＋洛铂、紫杉醇＋洛铂联合化疗。     

FTY720抑制TLR4信号转导的炎症反应

FTY720是一种1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)受体拮抗剂。为阐明FTY720抑制炎症反应的机理,本研究采用流式细胞术检测FTY720对细菌脂多糖(LPS)刺激后小鼠脾脏细胞TLR4表达水平的影响。研究发现,注射适当剂量的FTY720可削弱LPS所引起的TLR4表达水平增强(FTY720处理组与对照组相比,TLR4+细胞构成比分别为6.7%±1.5%和38.6%±3.1%,P<0.01),并可消除LPS刺激所引起的外周血TNF-α、IFN-γ和IL-12等Th1型细胞因子表达水平增高(FTY720组血清TNF-α、IFN-γ和IL-12浓度分别为(72±22)ng/ml、(46±21)ng/ml和(19±4)ng/ml,LPS组分别为(300±75)ng/ml、(175±35)ng/ml和(50±8)ng/ml,均为P<0.01)。相反,FTY720组血清Th2型细胞因子IL-4水平与对照组相比分别为(7±3)ng/ml和(7±2)ng/ml,无显著性差异。在体外细胞培养实验中可观察到一致的结果。这些发现提示,FTY720可能通过抑制LPS/TLR4信息转导通路,下调TNF-α、IFN-γ和IL-12等Th1型细胞因子表达而抑制炎症反应。     

顺铂耐药卵巢癌细胞化疗敏感性实验

【目的】 研究顺铂(DDP)。洛铂(LBP)。紫杉醇(PTX)。吉西他滨(GEM)对卵巢癌SKOV3细胞及顺铂耐药SKOV3 /DDP细胞增殖的影响。【方法】 培养基中不含药物的处理组为对照组,加入不同浓度化疗药物的处理组为实验组。在相差显微镜下观察细胞形态变化;用MTT法测定单药应用。双药联合使用对两种细胞生长的影响;流式细胞仪分析细胞周期和凋亡率的变化。【结果】 SKOV3∕DDP细胞耐药指数为7.10 ± 2.19。紫杉醇。洛铂。吉西他滨对两种细胞的抑制率无明显差别。洛铂。紫杉醇。吉西他滨两药联合组与相应单一用药组相比,能显著抑制肿瘤细胞的生长,其中吉西他滨 + 洛铂及紫杉醇 + 洛铂组抑制率明显增高。相同浓度顺铂作用48 h后,SKOV3/DDP细胞的凋亡率低于SKOV3细胞。洛铂。紫杉醇。吉西他滨作用两种细胞48 h后,细胞凋亡率差异无统计学意义。顺铂。洛铂与紫杉醇。吉西他滨主要作用于不同的细胞周期。【结论】 SKOV3/DDP细胞对紫杉醇。洛铂。吉西他滨无交叉耐药。联合用药有高效协同抑制细胞生长作用,临床治疗卵巢癌顺铂耐药患者可考虑选择吉西他滨 + 洛铂。紫杉醇 + 洛铂联合化疗。     

脂多糖对蜕膜NK细胞表达NKG2D水平的促进作用

为探讨脂多糖(LPS)及其受体TLR4相互作用并影响蜕膜NK细胞的可能机制,在孕E6.5给BALB/c×C57BL/6孕鼠腹腔注射LPS,而E10.5采用流式细胞术检测小鼠蜕膜NKG2D+TGF-β-NK细胞构成比,计算小鼠胚胎吸收率。此外,采用磁珠亲和细胞分选术纯化E10.5小鼠蜕膜NK细胞并培养,用LPS刺激所培养的细胞,并观察刺激后NK细胞表达NKG2D水平的变化。研究发现,在体内和体外实验中LPS刺激均可显著增高BALB/c×C57BL/6孕鼠蜕膜NK细胞NKG2D的表达水平,其中腹腔注射可显著增高胚胎吸收率。在体外细胞培养实验中,预先在培养基中加入抗TLR4抗体,则LPS刺激后细胞NKG2D表达水平无显著升高。这些结果提示,LPS与TLR4相互作用可增强小鼠蜕膜NK细胞NKG2D的表达,而NKG2D的过高表达不利于同种异基因妊娠成功。     

高压氧联合湿性愈合理论辅助治疗压疮的效果分析

目的观察高压氧联合湿性愈合理论治疗压疮的临床应用效果。方法将2016年3月—2017年9月科室内收治的44例带入压疮患者随机分为治疗组21例和对照组23例。治疗组给予高压氧并且利用湿性愈合理论进行治疗,对照组利用湿性愈合理论进行常规治疗,比较两组压疮的治疗效果。结果治疗组总有效率是91%,明显高于对照组的61%,两组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论高压氧联合湿性愈合理论可增加血液内的含氧量,有利于改善微循环功能,促进创面结痂,有利于愈合,治疗压疮效果显著。     

子宫动脉栓塞在中期妊娠引产中的应用

目的 评估子宫动脉栓塞在中期妊娠合并胎盘前置状态引产中的作用。 方法 对上海国际和平妇幼保健院2007年1月-2017年1月中期妊娠合并完全性胎盘前置状态下引产的33例病例进行回顾性分析,11例引产同时行预防性子宫动脉栓塞+氨甲蝶呤介入治疗作为观察组,另22例引产同时未行预防性子宫动脉栓塞作为对照组,比较2组的基本情况及引产结局,评估预防性子宫动脉栓塞在引产中的作用。电话随访引产后月经恢复情况及再次妊娠情况。采用SPSS 23.0统计软件分析数据。 结果 ①观察组和对照组年龄、孕次、产次、胎盘主体位置、前次剖宫产史、引产方法、感染、引产成功率、胎盘黏连情况比较差异无统计学意义(均P>0.05);观察组引产时间明显长于对照组(P=0.021),引产出血明显少于对照组(P=0.031)。②对照组中有8例引产出血量>300 ml,有4例发生了较严重的出血,急诊行子宫动脉栓塞+氨甲蝶呤介入治疗,均取得良好的效果,保留了患者的生育能力。③电话随访:子宫动脉栓塞病例患者和非子宫动脉栓塞病例患者月经恢复时间比较差异无统计学意义(P=0.093)。 结论 对于中期妊娠合并完全性胎盘前置状态的患者,引产前预防性应用子宫动脉栓塞能够减少引产出血,子宫动脉栓塞作为引产出血时的急救处理也是安全有效的。子宫动脉栓塞对引产后月经恢复及生育能力无明显影响。      

原因不明复发性流产与CD56CD16NK细胞的相关性研究

目的:探讨原因不明复发性流产(URSA)与外周血和蜕膜组织中CD56+CD16-、CD56+CD16+NK细胞水平及CD56+CD16-/CD56+CD16+平衡的相关性。方法:选取30例早孕原因不明复发流产患者为试验组,20例正常早孕人流妇女为对照组,采集两组病例的蜕膜组织及外周血标本,分离淋巴细胞,用流式细胞技术检测各组标本中CD56+CD16-、CD56+CD16-NK细胞的数量,计算ED56+ED16-/CD56+ED16+平衡偏移。结果:两组外周血中CD56+CD16-细胞和CD56+CD16+NK细胞水平以及CD56+CD16-/CD56+CD16+比值差异均无统计学意义(P>0.05);两组蜕膜组织中,URSA组CD56+CD16+NK细胞水平升高,ED56+CD16-/ED56+CD16+比值降低,差异均有统计学意义(P<0.05),CD56+CD16-细胞与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组蜕膜组织中CD56+CD16-NK细胞数及CD56+CD16-/CD56+CD16+比值均高于其外周血相应值,差异有统计学意义(P<0.05),CD56+CD16+NK细胞数在两组间差异无统计学意义(P>0.05);在URSA组中,蜕膜组织中的CD56+CD16-和CD56+CD16+NK细胞数均显著高于其外周血,差异均有统计学意义(P<0.05),CD56+CD16-/CD56+CD16+比值蜕膜组织中虽高于外周血,但无统计学意义(P>0.05)。结论:蜕膜组织中CD56+CD16+NK细胞水平升高以及由此引起的CD56+CD16-/CD56+CD16+比值的变化可能是原因不明复发性流产发生的一个主要因素。     

ICAM-1参与脂多糖刺激引起蜕膜细胞应激状态的机制研究

为探讨细胞间粘附分子-1(ICAM-1)参与脂多糖(LPS)刺激引起蜕膜细胞应激状态的机制,本研究采用LPS刺激和联合阻断ICAM-1及其受体LFA-1(CD11a/CD18,α1β1整合素)的策略,观察小鼠蜕膜LFA-1+细胞和调节性T细胞相对数量的改变,并检测胚胎吸收率的相应变化。LPS刺激可使小鼠胚胎丢失率显著增高,而采用中和抗体抑制ICAM-1/LFA-1通路则可基本消除这一效应。进一步研究发现,LPS可使小鼠蜕膜LFA-1+细胞相对数量显著增多,调节性T细胞相对数量显著减少。相反,抑制ICAM-1/LFA-1可消除上述LPS所造成的影响。结果提示,LPS刺激可激活ICAM-1/LFA-1信息通路,减少蜕膜Treg细胞的相对数量,并导致小鼠母-胎间免疫耐受失衡而发生流产。