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目的探讨大麻二酚(cannabinoid, CBD)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的小鼠焦虑和抑郁样行为的作用和机制。方法腹腔注射LPS建立神经炎症诱导的C57BL/6J小鼠焦虑和抑郁模型, 对造模成功小鼠腹腔注射CBD, 行为学试验评价小鼠的焦虑和抑郁样行为, qRT-PCR方法检测小鼠皮层、海马和前额叶皮层中的肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α, TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β, IL-1β)以及CD86的表达水平。体外LPS刺激CBD预处理的小胶质细胞系BV-2, 定量PCR方法检测BV-2细胞中TNF-α、IL-1β以及CD86的表达水平。蛋白质印记法检测小鼠不同脑区和BV-2细胞核因子κB(nuclear factor kappa-B, NF-κB)的表达水平。结果 CBD显著提高了LPS组小鼠在开放旷场试验(open filed test, OFT)中央区的停留时间和中央区运动路程, 显著降低了悬尾试验(tail suspension test, TST)与强迫游泳试验(force sw... 相似文献
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目的:研究不同浓度神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对外胚层来源的颌骨骨髓间充质干细胞(jaw bone marrow mesenchymal stem cells,JBMMSCs)增殖及成骨分化的影响。方法:原代培养小鼠JBMMSCs并鉴定。然后分四组分别加入含0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml NGF培养液至第二代JBMMSCs中孵育3天,采用CCK-8检测JBMMSCs增殖,碱性磷酸酶试剂盒、qRT-PCR检测ALP、OCN、BMP2、RUNX2等重要成骨及增殖标记物Ki67、MCM-2的表达,Western blot检测OPN、RUNX2以及Ki67、MCM-2的表达。结果:采用骨片贴壁法原代培养的小鼠JBMMSCs经流式细胞术鉴定,表明成功获取JBMMSCs。CCK-8显示3种浓度的NGF均能促进JBMMSCs增殖,且呈浓度依赖性特点。qRT-PCR结果显示:ALP、OPN、RUNX2、BMP2、Ki67、MCM-2表达水平随浓度的升高而增加,但Ki67、MCM-2表达量在100 ng/ml NGF时下降。Wes... 相似文献
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目的 研究去泛素化酶Mysm1对神经干细胞(NSC)向星形胶质细胞分化的影响及其作用机制。方法从孕12.5 d C57BL/6胎鼠脑组织中分离NSC在体外进行培养,体外诱导NSC向星形胶质细胞分化。免疫荧光染色、实时定量PCR和蛋白质免疫印迹实验检测体外NSC向星形胶质细胞分化过程中Mysm1表达量的变化;使用慢病毒敲低NSC中Mysm1的表达量并通过实时定量PCR和蛋白质免疫印迹实验检测敲低效率;免疫荧光染色和蛋白质免疫印迹实验比较体外敲低Mysm1前后NSC向星形胶质细胞分化的变化;转录组学检测体外敲低NSC内Mysm1后差异基因情况;蛋白质免疫印迹实验验证差异基因相关蛋白的变化;Cut-Tag检测体外NSC向星形胶质细胞分化过程中Mysm1在胶质纤维酸性蛋白(GFAP)基因启动子区域富集情况;在敲低Mysm1的基础上过表达GFAP,免疫荧光染色和蛋白质免疫印迹实验检测体外过表达GFAP前后NSC向星形胶质细胞分化的变化。结果 体外诱导NSC向星形胶质细胞分化时,细胞表达Mysm1逐渐升高;Mysm1敲低会抑制体外NSC向星形胶质细胞分化;Mysm1通过调控GFAP的转录影响NSC... 相似文献
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