2016-2020年河南省平顶山市97例HIV抗体不确定样本的首次检测和随访结果

目的 分析97例人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）抗体不确定样本的首次检测和随访结果,探讨HIV抗体不确定样本的转归规律。方法 选取2016-2020年平顶山市疾病预防控制中心艾滋病确证实验室检测的97例HIV抗体不确定病例为研究对象,分析其一般信息、发现途径、免疫印迹（western blot,WB）带型,将不确定样本按照WB条带数量和S/CO值大小各分三组,分析六组间的首次病毒载量（viral load,VL）和WB实验随访结果。结果 97例样本中,带型最多的是一条带,以p24单条带数量最多（25例,37.88%）,其次是两条带,其中以gp160+P24为最常见（15例,22.73%）。按照不确定样本的WB带型所分的三组间随访结果阳转率有统计学意义（χ2=11.789,P<0.05）,三条带及以上组阳转率最高;按照S/CO值划分的三组间随访结果阳转率有统计学意义（χ2=12.684,P<0.05）,S/CO≥6.0组阳转率最高;各组的VL检测结果与最终的WB实验阳转结果基本一致。结论 HIV抗体不确定样本在首次检测和随访...     

平顶山市、县、乡三级疾控体系建设现状分析

根据河南省疾病预防控制体系建设情况专项调查结果，分析了2007年平顶山市、县、乡三级疾病预防控制体系的人力资源、房屋基础建设、财政拨款及支出、实验室设备及开展检测工作等情况。结果表明：全市疚控人员整体超编，但乡镇仍有空缺；人员结构不合理，普遍缺乏高技术人才；经费投入少，业务经费极少；办公用房基本保障，实验室建设及检测能力有待提高；此外，没有建立人员培训机制以及设备的补给运行机制。     

沙眼衣原体主要外膜蛋白多表位基因的免疫原性研究

目的 构建包含沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)主要外膜蛋白(major outermembrsne protein,MOMP)多表位基因的真核表达质粒PcDNA3.1-Ct MOMP168,检测其诱导BALB/c小鼠产生Ct MOMP特异性体液和细胞免疫反应的水平.方法 构建包含Ct MOMP多表位基因的重组质粒PcDNA3.1-Ct MOMP168并以肌肉注射方式免疫BALB/c小鼠,同时设置pcDNA3.1组和PBS组对照(每组12只,每只100μg/次).采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、乳酸脱氢酶释放法及细胞内细胞因子染色-流式细胞术(ICS-FACS)分别检测免疫小鼠血清中Ct MOMP特异性抗体的滴度及其抗体亚型、脾脏中细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤活性及特异性分泌细胞因子,如γ-干扰素-(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)等的CD3+T细胞的水平.结果 同pcDNA3.1(A490=0.180±0.025)和PBS免疫(A490=0.110±0.015)相比,PcDNA3.1-Ct MOMP168免疫可刺激小鼠产生高效价Ct特异性IgG抗体(A490=0.973±0.136;血清滴度1:1000),且抗体亚型以IgG2a为主,差异有统计学意义(F=106.884,P<0.05);pcDNA3.1-Ct MOMP168免疫组小鼠脾细胞中CTL杀伤活性(41.71%±8.34%)高于pcDNA3.1组(18.40%±3.45%)和PBS组(14.50%±2.42%),差异有统计学意义(F=22.315,P<0.05;效靶比为50:1);pcDNA3.1-Ct MOMP168免疫组小鼠的脾细胞中Ct MOMP特异性CD3+IFN-γ+T细胞的水平(1.15%±0.16%)高于pcDNA3.1组(0.12%±0.08%)和PBS组(0.09%±0.03%),差异有统计学意义(F=99.638,P<0.05),而PcDNA3.1-CtMOMP168组IL-4+CD3+T细胞(0.13%±0.08%)和IL-10+CD3+T细胞(0.14%±0.08%)的水平与pcDNA3.1(0.07%±0.05%,0.13%±0.06%)和PBS(0.08%±0.04%,0.07%±0.04%)组比较差异无统计学意义(F值分别为0.886、1.112,P值均>0.05).结论pcDNA3.1-Ct MOMP168重组质粒能诱导BALB/c小鼠产生Ct MOMP特异性的体液免疫和细胞免疫应答.     

嗜肺巴氏杆菌在实验大鼠和小鼠中的传染性研究

目的观察不同来源的嗜肺巴氏杆菌在实验大鼠和小鼠中的传染性.方法取源于野鼠、实验大鼠和小鼠的嗜肺巴氏杆菌3株,对30只受试大鼠和小鼠进行交叉人工感染,并于感染后不同时期取咽拭子分离培养,对感染前后菌株,应用RAPD-PCR、SDS-PAGE和Western blot进行基因型、蛋白和抗原成份比较,以及生物学特性的比较.结果受试实验动物对3株嗜肺巴氏杆菌均易感,被接种的动物能稳定携带嗜肺巴氏杆菌直到试验结束,重新分离的嗜肺巴氏杆菌在生物学特性、蛋白成份、抗原性和基因型方面无明显改变.结论同一株嗜肺巴氏杆菌能在实验大鼠和小鼠中相互传染.     

E血清型沙眼衣原体主要外膜蛋白B细胞表位的预测

基于E血清型沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,CT)主要外膜蛋白(Major outer membrane protein, MOMP)氨基酸序列,采用Hopp-Woods的亲水性方案、Emini表面可及性方案、Jameson-Wolf 抗原指数方案和Janin可及性方案等,辅以对MOMP蛋白的二级结构中的柔性区域及跨膜区域的分析,预测CT MOMP蛋白的B细胞表位.推测最有可能的B细胞表位位于MOMP蛋白N端第73～81区段、217～225区段、第377～386区段、第261～270区段和第161～175区段内或它们的附近.用多参数预测CT MOMP蛋白的B细胞表位,为进一步研究蛋白特性及表位疫苗研制奠定了基础.     

2019—2021年平顶山市性病门诊男性就诊者艾滋病哨点监测结果分析

目的 了解平顶山市性病门诊男性就诊者的一般人口学和行为学特征,以及HIV、丙肝（HCV）和梅毒（TP）感染情况,为当地性病、艾滋病防控策略的制定提供参考依据。方法 对平顶山市2019—2021年性病门诊男性就诊者监测数据进行分析,并对TP感染的影响因素进行单因素和多因素分析。结果 2019—2021年共监测性病门诊男性就诊者1 202例,平均年龄（36.87±9.35）岁,76.96%已婚;累计检出HIV 5例,HCV 12例,TP 90例,阳性率分别为0.42%,1.00%,7.49%。3年艾滋病相关知识知晓率分别为79.00%, 84.50% 和91.29%。该人群与暗娼有过性行为的发生率呈降低趋势（P<0.01）;与临时性伴（包括同性肛交）有过性行为的发生率逐年升高（P<0.01）,最近1年患过性病和接受安全套宣传、艾滋病咨询检测的发生率也逐年升高（P<0.01）。TP感染的影响因素分析显示,艾滋病相关知识不知晓（OR=3.11）、最近3个月与临时性伴发生性行为（OR=1.87）、最近3个月与暗娼有性行为（OR=3.25）、曾与同性发生肛交行为（OR=4.01）、近1年患过性病（OR=4.29）是TP感染的危险因素。结论 建议依靠性病门诊开展健康教育和行为干预,加强性病门诊男性就诊者的HIV/HCV/TP检测咨询服务,进一步降低该人群性病和艾滋病感染风险。     

平顶山市艾滋病检测实验室网络化建设现状

目的 了解平顶山市艾滋病检测实验室网络化建设现状,为进一步提高检测能力提供借鉴.方法 对平顶山市艾滋病检测实验室的建设现状进行整理,并对2016-2020年检验能力验证资料上报情况进行汇总分析.结果 2003-2020年,平顶山市共建立艾滋病检测实验室196家,包括艾滋病确证实验室兼筛查中心实验室1家,艾滋病筛查实验室42家,艾滋病检测点153个,覆盖全市综合医院、疾控中心、采供血机构以及专科医院.2016-2020年,艾滋病筛查实验室总体优秀率为12.05％(21/174),良好率为33.33％(58/174),合格率为54.60％(95/174),检测点合格率为 100.00％.HIV 筛查、HCV 筛查、TP特异性检测结果总体符合率均为100.00％,TP非特异性检测结果总体符合率从2016年的70.59％提高至2020年的88.89％,总体呈上升趋势(趋势x2=4.16,P＜0.05).结论 平顶山市艾滋病检测实验室网络化建设覆盖面广,检测水平较高,考评模式健全.     

682名吸毒人员性病、艾滋病危险行为特征及血清学调查

目的 了解平顶山市吸毒人员的艾滋病相关危险行为特征及人类免疫缺陷病毒(HIV)、丙型肝炎病毒(HCV)、梅毒螺旋体(TP)感染现状,为制订防控策略和措施提供依据.方法 对吸毒人员进行个人访谈,并采用统一调查表进行问卷调查,采集血样检测HIV抗体、HCV抗体、梅毒抗体.结果 2010~2013年平顶山市共监测682人,HIV抗体阳性者3人,阳性率0.43%;HCV阳性157人,阳性率为23.02%;TP阳性36人,阳性率为5.27%.吸毒人员年龄主要集中在20~40岁年龄段,占 88.27%(602/682);初中及以下文化程度占90.18%(615/682).注射吸毒者占17.30%(118/682),注射吸毒者中针具共用率为7.11%(8/118).有商业性行为者占31.23%(213/682),其中坚持每次使用安全套者仅占21.22%(45/213).结论 吸毒人员HIV感染率仍属低流行状态,HCV、TP的感染率显著高于一般人群.吸毒人群中存在着共用针具及商业性行为等危险因素,应进一步加强对此类人群的宣传教育和行为干预,防止HIV、HCV、TP的蔓延.     

密码子优化的HPV6b L1 DNA诱导BALB/c小鼠产生增强的免疫应答

目的 探讨真核细胞偏好密码子优化对人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)6b型L1 DNA诱导BALB/c小鼠特异性体液和细胞免疫应答的增强效应.方法 利用PCR从尖锐湿疣组织中扩增HPV6b L1基因,将其克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(+),构建野生型pcDNA3.1(+)/HPV6bL1(wt)并进行鉴定;同时,对HPV6b L1基因进行真核细胞偏好密码子优化,进一步通过重叠PCR的方法获得全长基因,构建密码子优化的重组质粒pcDNA3.1(+)/HPV6bL1(mod.)并进行鉴定.将6～8周龄雌性BALB/c小鼠分成4组,分别肌肉注射3次pcDNA3.1(+)/HPV6bL1(mod.)、pcDNA3.1(+)/HPV6bL1(wt)、pcDNA3.1(+)载体和PBS,间隔2周,每次剂量为150μg/鼠.分别于免疫前和免疫后每隔2周,收集血清,用间接ELISA检测血清igG抗体;并于第8周取小鼠脾细胞,采用乳酸脱氢酶释放法,按效应细胞与靶细胞之比(E:T)为5:1、10:1、20:1进行免疫小鼠特异性CTL杀伤活性检测.结果 成功构建了密码子优化的HPV6b L1重组质粒.小鼠免疫后血清特异性IgG抗体水平随着免疫时间和次数的增加而升高.pcDNA3.1(+)/HPV6bL1(mod.)组血清IgG抗体在第8周达到高峰,与pcDNA3.1(+)/HPV6bL1(wt)、载体和PBS对照组相比差异均有统计学意义(t=18.138、t=29.140、t=30.840,P值均＜0.01);而pcDNA3.1(+)/HPV6bL1(wt)组与载体和PBS组比较差异也有统计学意义(t=20.072、t=22.457,P值均＜0.01).在特异性CTL杀伤实验中,当E:T分别为5:1、10:1、20:1时,pcDNA3.1(+)/HPV6bL1(mod.)组的脾细胞特异性CTL杀伤率明显高于pcDNA3.1(+)/HPV6bLl(wt)组(t=11.892、t=15.329、t=2.911,P值均＜0.05)、载体组(t=12.936、t=16.613、t=13.90l,P值均＜0.01)和PBS对照组(t=14.768、t=18.935、t=10.925,P值均＜0.01).结论 密码子优化的HPV6b L1 DNA可诱导BALB/c小鼠产生增强的特异性体液和细胞免疫应答.