结核分枝杆菌Ag85A蛋白的原核表达、纯化和免疫反应性

目的通过原核表达获得结核分枝杆菌Ag85A蛋白。方法用PCR从结核分枝杆菌H37Rv菌株中扩增出编码Ag85A的fbpA基因,克隆入原核表达载体pProEXHTb,产生重组质粒pPro85A后,转化至大肠杆菌感受态细胞BL21并诱导大量表达。用镍纯化系统纯化重组Ag85A蛋白,用不同分枝杆菌感染的小鼠血清通过ELISA确定其免疫反应性。利用PCR技术鉴定fbpA基因在不同分枝杆菌的分布。结果32 ku的Ag85A蛋白获得高效表达和纯化。表达Ag85A蛋白的fbpA基因在结核分枝杆菌H37Rv、H37Ra、BCG、草分枝杆菌、土地分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和次要分枝杆菌中均有表达,但在牝牛分枝杆菌中未表达。结核病患者和结核分枝杆菌毒株H37Rv感染小鼠血清所产生的抗Ag85A抗体滴度最高。结论重组Ag85A蛋白已成功表达纯化,并保留了免疫反应性。     

黄芩苷对沙眼衣原体宿主细胞抗凋亡活性的抑制作用

目的:探讨黄芩苷对沙眼衣原体感染诱导宿主细胞抗凋亡效应的影响,并分析其可能的作用机制。方法:沙眼衣原体D型菌株感染HeLa229细胞并予以黄芩苷干预后,Hoechst33258染色和AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,流式细胞术检测活化Caspase3表达水平,Western blot检测CPAFc及唯BH3域前凋亡蛋白(Bim、Bik、Puma)的表达水平。结果:黄芩苷干预能显著提高沙眼衣原体感染宿主细胞凋亡百分比及感染细胞内活化Caspase-3水平,抑制CPAF表达并阻碍Bim、Bik、puma的降解。结论:黄芩苷明显抑制沙眼衣原体宿主细胞的抗凋亡活性,而阻碍CPAF对唯BH3域前凋亡蛋白的降解可能是其重要机制。     

医学微生物学数字标本库在实验教学中的应用

构建全面高效、安全保存、实用可靠的医学微生物学实验教学数字化标本库,在收集和整理医学微生物学理论课教学所讲授的病原微生物菌种、涂片染色制备标本片的基础上,利用全自动显微镜进行扫描,得到了包含病原微生物生物学特性的数字化标本片,并应用于医学微生物学实验教学,取得了较好的教学效果.     

肝癌细胞低氧环境下分泌的外泌体对同源细胞活性的影响

目的 探讨肝癌细胞低氧环境下分泌的外泌体对同源细胞活性的影响.方法 采用差速超速离心法提取低氧环境下人肝癌细胞(HHCC)分泌的外泌体,通过投射电子显微镜观察外泌体的形态学特征,Western印迹检测外泌体特异性蛋白表达.采用CCK-8检测细胞增殖能力,细胞划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能...