巴龙霉素和庆大霉素伍用成功治疗小鼠皮肤利什曼病

皮肤利什曼病的治疗通常采用20天锑剂注射疗法,但毒副作用较大。此外还有采用巴龙霉素(15％)配伍氯化甲基苄甲乙氧铵(MBCL,12％)或尿素(10％)用于治疗病人,效果亦不甚理想。 本文作者将巴龙霉素(15％)与庆大霉素(0.5％)配伍制成白软石蜡软膏WR279,396,用于治疗皮肤利什曼病,并与其它配方的疗效进行了比较。实验采用20克重的雄性BALB/c小鼠作为动物模型,剪去尾根部毛以暴露皮肤,皮下接种5×10~6个相应种的利     

结核病诊断技术及其临床应用

对TB作出及时准确的早期诊断对控制TB疫情至关重要。近年来随着生物技术和分子生物学的快速发展,在改善原有诊断技术的基础上也引入了多种新的TB诊断技术。新型培养技术大大缩短了细菌学检查和结核菌药敏试验的时间;分子扩增技术的应用(比如PCR)使得当日诊断成为现实;血清学方法的改善以及噬菌体测定等新技术的引入给TB临床诊断带来了希望。本文对TB的临床诊断、实验室诊断及最新技术进行了综述。     

结核分枝杆菌H37Rv株重组抗原ESAT-6的表达纯化研究

目的表达纯化结核分枝杆菌(简称:结核杆菌)H37Rv株重组抗原ESAT-6,为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础。方法重组质粒pET23b-ESAT-6转化E.coli表达菌株BL21(DE3)plysE,IPTG诱导重组抗原ESAT-6表达。经SDS-PAGE电泳和Western印迹鉴定后,优化表达条件用镍离子鳌合亲和层析柱纯化重组抗原。结果成功构建了重组质粒pET23b-ESAT-6并且重组抗原ESAT-6以可溶性形式高效表达,经亲和层析后得到高纯度有免疫原性的重组抗原(纯度>95%)。结论高纯度有免疫原性的重组抗原ESAT-6为新型亚单位疫苗的研发及其结核病血清学诊断价值研究奠定了基础。     

结核杆菌H37Rv株重组PstS1蛋白的表达纯化及其免疫反应性分析

目的:表达、纯化结核杆菌H37Rv株重组Psts1(简称rPstS1)蛋白,为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础.方法:重组质粒pET15b-Pstsl转化大肠埃希菌表达菌株BL21(DE3)plysE,IPTG诱导rPstSI蛋白表达.经SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定后,优化表达...     

结核分枝杆菌rESAT-6-CFP-10融合蛋白的构建和表达及其免疫反应性分析

Objective To construct esat-6-cfp-10 fusion gene (ec) and its expression vector pET-23b( + )-esat-6-cfp-10 [pET-23b( + )-ec], and express rESAT-6-CFP-10 (rEC)fusion protein of Mycobacterium tuberculosis (MTB) H37Rv and evaluate its immunoreactivity. Methods Fused gene encoding ESAT-6 and OP-10 of MTB was linked with the (Gly4Ser)3 linker by gene SOEing. Construction of TA cloning vector pMDR 19-T-esal-6-cfp-10 (pMDR 19-T-ec) was identified by PCR, restriction analysis and sequencing. After pMDR 19-T-ec was digested with double restriction enzymes (Nde Ⅰ and Xho Ⅰ ), the fused gene was inserted into prokaryotic expression vector pET-23b ( + ). The recombinant plasmid pET-23b( + )-ec was transformed into E. coli BL21(DE3) pLysE, and IPTG was used to induce the expreestion of rEC. Its expression was detected with sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and Western blot. rEC was purified by nickel-chelate affinity chromatography. The immunoreactivity of rEC was preliminarily evaluated by Western blot. Results A recombinant plasmid pET-23b( + )-ec was successfully constructed and could stably express a 21 000 rEC, which accounted for 35% total proteins of bacillus. It existed in soluble form in E. coli. After purification, the purity of rEC reached 97.2% . Its immunoreactivity was confirmed by Western blot. Conclusions The prokaryotic expression vector pET-23b( + )-ec has been constructed and the fusion protein rEC has been obtained successfully, which provides an experimental basis for the application of rEC in the diagnosis of tuberculosis.     

~(60)Co-γ射线辐照对蛤蟆油营养成分的影响研究

目的:研究食品原料蛤蟆油经60Co-γ射线照射后营养成分的变化。方法:采用0、5、10、15 kGyγ射线对蛤蟆油进行辐照,以加速试验来评价辐照前后营养成分变化与辐照剂量的相关性。结果:在5~15 kGy剂量范围内,5 kGy辐照前后维生素D,E含量变化均无显著性差异(P0.05),而10~15 kGy辐照以及加速试验均使蛤蟆油中维生素A,E含量显著降低(P0.01),维生素D受照射影响较小;脂肪酸在5~15 kGy辐照后变化不明显,但加速试验发现15 kGy使脂肪酸含量显著提高;经SDS-PAGE分析其分子量为20 KD的蛋白区带随辐照剂量增加而变深。结论:60Co照射动物性高蛋白、低脂肪、低维生素固体样品,在高辐照剂量下加速试验均有不同程度影响,但5 kGy剂量辐照还是安全的。     

结核杆菌H37Rv株重组KatG蛋白的表达纯化研究

目的表达纯化结核杆菌H37Rv株重组KatG（简称rKatG）蛋白，为深入研究异烟肼耐药机制奠定基础。方法重组质粒pET23b—KatG转化大肠埃希菌表达菌株BL21（DE3）plysE,IPTG诱导rkatG蛋白表达。经SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定后，优化表达条件，用镍离子鳌合亲和层析柱纯化rKatG蛋白，对纯化产物进行过氧化氢酶活性测定。结果成功构建了重组质粒pET、23b-KatG,rKatG蛋白以可溶性蛋白形式表达，经亲和层析后的rKatG蛋白纯度为95．6％，过氧化氢酶试验阳性。结论构建的pET23b-KatG重组质粒能高效表达有酶活性的可溶性rKatG蛋白，经亲和层析后可得到高纯度的纯化蛋白。     

单克隆抗体的制备及其应用研究进展

抗体是机体免疫系统的重要效应分子,从第一代多克隆抗体(polyclonal antibody,PcAb)到第二代单克隆抗体的成功制备,人们投入了大量的临床应用研究,对医学和生     

副衣原体及其潜在致病性研究进展

副衣原体是1997年首次在自生生活的阿米巴中发现的细胞内共生体，可观察到原体和网状体两种不同的发育期。副衣原体的生命周期与衣原体非常相似，两者的核糖体rRNA基因具有80%-90%的同源性。呼吸道感染可能因衣原体属或两种副衣原体菌株（Z-agent和Bng）而引起，最近有研究从支气管肺泡灌洗液中鉴别出副衣原体的16S rRNA基因序列，进一步证明了副衣原体是一种潜在的致病菌。本文就近年有关副衣原体的分类、宿主、潜在致病性及诊断方法等研究进展作了综述。