窒息新生儿脐血D-二聚体水平和红细胞膜Na~+-K~+-ATP酶活性变化

目的:分析窒息新生儿脐血pH、D-二聚体水平及红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性变化。方法 :选择临产过程出现急性胎儿窘迫孕妇40例,其剖宫娩出新生儿以1min Apgar评分确定为正常者20例(窘迫组),出现窒息者20例(窒息组);另选无急性胎儿窘迫、同样剖宫娩出的正常新生儿20例作为对照组。取各组脐动脉血,血气分析仪检测pH值,免疫比浊法检测D-二聚体水平,定磷法检测红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性。比较各组上述指标的差异。结果:方差分析显示,各组脐动脉血pH值、D-二聚体水平和红细胞膜Na+-K+-ATP活性差异均有统计学意义(P0.05)。窒息组脐动脉血pH值明显低于对照组和窘迫组(P均0.05),D-二聚体水平显著高于对照组和窘迫组(P均0.05),红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性显著低于对照组与窘迫组(P均0.05);窘迫组pH值和红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性显著低于对照组(P均0.05)。结论 :窒息新生儿纤溶和红细胞膜泵功能检测结果,可为新生儿窒息治疗措施的选择提供实验依据。     

解偶联蛋白2基因表达对游离脂肪酸升高所致β细胞功能障碍的影响

目的观察血浆游离脂肪酸（FFA）水平短期升高对β细胞胰岛素分泌功能的影响,探讨线粒体氧化应激在其中的作用及机制。方法将24只8周龄体重160-170g雄性SD大鼠采用随机数字表法分为脂肪乳输注组（FFA组,12只）和生理盐水输注组（NS组,12只）。分别输注48h,检测以下指标：（1）采静脉血检测胰岛素和FFA水平;（2）静脉葡萄糖耐量实验,评价活体胰岛β细胞分泌功能;（3）胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;（4）实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测胰岛细胞胰岛素受体底物1和2（IRS-1、IRS-2）和解偶联蛋白-2（UCP-2）mRNA表达的变化。两组间差异比较采用独立样本t检验。结果FFA组血胰岛素水平较NS组增高[（25．2±2．3）比（18．6±1．7）mU／L,t=7．9,P〈0．05],FFA水平也显著高于Ns组[（1．39±0．18）比（0．64±0．10）mmol／L,t=12．8,P〈0．05]。FFA刺激后,FFA组活体和离体的胰岛β细胞分泌功能均较NS组增强[活体分别为（137±24）、（80±16）mU／L,t=6．8,P〈0．05;离体分别为（272±4）、（227±4）mU／L,t=28．6,P〈0．05]。与NS组相比,FFA组胰岛细胞IRS-1mRNA表达增加了29．3％4-2．6％（t=2．2,P〈0．05）,IRS-2mRNA及UCP-2mRNA表达分别增加了345．1％±4．7％、228．4％±4．2％（t=3．4、3．0,均P〈0．05）。结论血浆FFA水平短期升高对β细胞胰岛素分泌有刺激作用,但同时激活线粒体氧化应激,使UCP-2表达相应增加。     

非诺贝特对胰岛素抵抗大鼠肌肉过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α基因表达的影响

目的 观察非诺贝特干预对高游离脂肪酸(FFA)所致胰岛素抵抗大鼠肌肉组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ协同刺激因子1α(PGC-1α)基因表达的影响.方法 将8周龄体重300 g左右雄性SD大鼠分为3组,即正常对照组(10只)、脂肪乳输注组(FFA,10只)及非诺贝特+脂肪乳输注组(F-FFA,10只).3组大鼠在空腹8～10 h后给予颈静脉插管,其中对照组以1 ml/h的速度输注生理盐水6 h,FFA组以1 ml/h的速度输注20%脂肪乳(加入40 U/ml肝素)6 h,F-FFA组为正常大鼠以非诺贝特(100 mg·kg-1·d-1)管喂14 d后继以1 ml/h的速度输注20%脂肪乳(加入40U/ml肝素)6 h,在输注4 h后开始做正常血糖高胰岛素钳夹试验,以葡萄糖输注率(GIR)评价胰岛素敏感性.试验结束后,取骨骼肌肌肉组织,待提取总RNA,行实时定量PCR检测PGC-1α基因的表达.结果 (1)输注脂肪乳6 h后,FFA组血FFA、胰岛素水平较对照组明显增高,F-FFA组血FFA、胰岛素水平较FFA组明显下降[FFA:对照组0.46(0.08～0.72)mmol/L,FFA组1.45(0.87～1.70)mmol/L,F-FFA组0.54(0.06～0.84)mmol/L,均P＜0.01;胰岛素:对照组(6.56±0.78)μIU/ml,FFA组(10.54±0.86)μIU/ml,F-FFA组(6.69±0.84)μIU/ml,均P＜0.01].(2)FFA组GIR较对照组下降约55.6%,存在明显的胰岛素抵抗,非诺贝特干预逆转了约110%[对照组(25.13±2.10)mg·kg-1·min-1,FFA组(10.16±0.75)mg·kg-1·min-1,F-FFA组(21.72±2.89)mg·kg-1·min-1,均P＜0.01].(3)FFA组肌肉组织PGC-1α基因表达较对照组减少约71%,非诺贝特干预后肌肉PGC-1αmRNA表达较FFA组增加约1.50倍(P＜0.01).结论 (1)升高循环中的游离脂肪酸水平可以导致胰岛素抵抗并影响肌肉组织PGC-1α基因的表达.(2)非诺贝特可以改善胰岛素抵抗及PGC-1α基因表达.     

氧化应激与β细胞脂性凋亡关系及机制研究

目的:观察长期高脂饮食对大鼠胰岛β细胞凋亡影响,探讨氧化应激相关因子及基因表达与β细胞脂性凋亡关系及可能机制.方法:41只SD雄性大鼠随机分为高脂饲料喂养的肥胖组(n=21)和普通饲料喂养的正常对照组(n=20),喂养28周后,检测血浆及胰腺组织中的丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)浓度;静脉葡萄糖耐量试验评价早相胰岛素分泌反应(AIR);TUNEL法观察胰岛β细胞凋亡情况并计数每个胰岛中β细胞凋亡率;采用荧光定量PCR(Real-time PCR)比较两组大鼠胰岛细胞解偶联蛋白-2(UCP-2)mRNA表达的情况.结果:28周时高脂饲养组血浆及胰腺组织中MDA高于正常饲养组(P<0 05),而高脂饲养组血浆及胰腺组织中GSH低于正常饲养组(P<0 01).与基础值比较,高脂饲养组糖负荷后胰岛素增高的幅度低于正常饲养组(3 0倍vs 5 7倍,P<0 05).高脂饲养组1 min后血糖浓度下降缓慢,3、5、10 min血糖水平均高于正常饲养组(P<0 05).高脂饲养组胰岛β细胞凋亡率比正常饲养组增加40 0%(P<0 01).高脂饲养组胰岛细胞UCP-2基因mRNA表达与正常饲养组相比升高22 4%(P<0 01).结论:高脂喂养28周后SD大鼠胰岛β细胞凋亡率明显增加,血浆及胰岛细胞中MDA升高、GSH降低, 而且胰岛细胞UCP-2基因mRNA表达升高,提示氧化应激可能参与了高脂引起的β细胞脂性凋亡.     

实验性2型糖尿病大鼠模型的研究

目的　制作一种与人类 2型糖尿病发病过程类似的动物模型。方法　选体重 16 0～ 180 gWistar大鼠 ,雌雄各半 ,先喂以高脂高糖饲料 4周 ,促发胰岛素抵抗 ,继以小剂量链脲佐菌素 (STZ) (30mg/kg ,每周 1次 )连续腹腔注射 2次 ,诱导建立 2型糖尿病模型。结果　高脂高糖饲料喂养 4周后大鼠空腹胰岛素显著高于对照组(P <0 0 5 ) ,出现胰岛素抵抗 (胰岛素敏感指数ISI =- 5 72± 0 4 3,对照组ISI =- 4 37± 0 6 1,P <0 0 1) ,第 2次注射STZ后大鼠于 1周始出现葡萄糖负荷后 6 0、12 0min血糖显著升高 (P <0 0 1) ,造模成功 ;18周时出现空腹和葡萄糖负荷后血糖均明显升高 (P <0 0 5 ) ,而空腹胰岛素分泌与对照组相比差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　本实验方法建立的 2型糖尿病大鼠模型 ,与人类 2型糖尿病代谢特征相似 ,是研究人类 2型糖尿病较理想的动物模型     

脂肪分存的顺序及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨高脂饲养SD大鼠脂肪分存的顺序及其与胰岛素抵抗的关系。方法将8周龄雄性SD大鼠随机分为2组：正常饲养组（NC，n=40）、高脂饲养组（HF，n=40）。在不同周龄测定血清、肝脏、肌肉组织中甘油三酯（TG）含量；进行正常血糖高胰岛素钳夹试验评估胰岛素的敏感性；并用定量PCR方法分析肝脏和肌肉中脂代谢调控基因mRNA表达的变化。结果（1）与NC组比较，高脂饲养4周、8周时血TG无明显变化，12周时明显增高[0．52（0．15-1．00）mmol／L vs 0．31（0．09-0．53）mmol／L，P〈0．01]，持续至20周。（2）HF组肝脏TG含量从高脂饲养4周始便明显增高[（34．38±11．12）mg／g vs（1．65±0．37）mg／g，P〈0．01]，一直持续至20周；肌肉TG在高脂饲养4、8、12周均无明显变化，高脂饲养20周时明显增高[（32．24±7．24）mg／g vs （2．77±0．76）mg／g，P〈0．01]。（3）正常血糖高胰岛素钳夹试验表明，HF组高脂饲养4周始葡萄糖输注率（GIR）呈下降趋势，高脂饲养8周时明显下降[（21．81±7．20）mg·kg^-1·min^-1 vs （8．44±1．77）mg·kg^-1·min^-1，P〈0．01]，一直持续至20周。（4）脂代谢调控基因的检测表明，高脂饲养4周时肝脏中合成基因乙酰辅酶A羧化酶（ACC1）的表达无明显增高而氧化基因肉毒碱酰基转移酶（CPT-1）的表达下降20．3％（P〈0．05），肌肉组织ACC2、CPT-1的表达均无明显变化（P〉0．05）；高脂饲养8周时肝脏中ACC1的表达增高20．6％、CPT-1的表达下降27．1％（P〈0．05），肌肉组织ACC2的表达增高18．6％、CPT-1的表达下降19．2％（P〈0．05）；高脂饲养20周时肝脏ACC1表达增高48．3％（P〈0．05）、CPT-1表达无明显变化（P〉0．05），肌肉ACC2表达增高101．1％、CPT-1的表达下降71％（P〈0．05）。结论高脂饲养SD大鼠脂肪分存过程中，肝脏早于肌肉，肝脏TG含量增加可能是胰岛素抵抗的早期标志之一。脂代谢调控基因的表达可能在其中起了重要作用。     

糖尿病肾病中血小板的异常

糖尿病肾病阶段血小板发生了形态、数量、体积、释放和聚集反应以及前列腺素代谢的变化,这些变化是由于糖尿病肾病代谢异常所致,同时在糖尿病肾病的发病过程中起一定的作用。     

组织细胞增生症X临床及细胞学观察：附26例报告

本文对我院１９７１年－１９９１年２０年共诊治的２６例组织细胞增生症Ｘ病人进行临床及细胞学分析。发现本病临床症状，体征多种多样；该病类型与年龄密切相关；骨髓细胞学检查缺乏特异性改变，但可共同表现为不同程度的组织细胞增多；皮疹印片可为本病的重要诊断依据。强调指出：本病诊断率的提高应结合临床，Ｘ线和皮疹印片。     

N-乙酰半胱氨酸改善高游离脂肪酸所致大鼠外周胰岛素抵抗

目的 探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对高游离脂肪酸(FFA)导致的外周胰岛素抵抗的影响及机制.方法 SD大鼠随机分为对照组(NS组,12只)、脂肪乳输注组(FFA组,13只)和脂肪乳 NAC组(NAC组,12只).输注48 h,(1)测血浆硝基酪氨酸,丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;(2)高胰岛素正糖钳夹试验,评价外周胰岛素抵抗程度;(3)实时荧光定量PCR方法测定肌肉组织胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)mRNA表达.结果 (1)FFA组硝基酪氨酸,MDA高于NS组,GSH低于NS组,NAC分别改善28.6%,33.1%,22.9%(P＜0.05);(2)FFA组葡萄糖输注率(GIR)比NS组降低(P＜0.05),用NAC后GIR升高36.6%(P＜0.05);(3)FFA组肌肉组织IRS-1、IRS-2 mRNA表达比NS组降低87.7%、50.7%(P＜0.05);NAC组肌肉组织IRS-1、IRS-2表达比FFA组增加370.1%、46.2%,(P＜0.05).结论 NAC干预能改善高FFA所致的外周胰岛素信号传导障碍,逆转外周胰岛素抵抗,可能与NAC纠正机体氧化及抗氧化失衡有关.     

大剂量抗氧化剂对高脂饲养大鼠胰岛β细胞分泌功能的影响及机制

目的:探讨大剂量抗氧化剂-N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-l-cysteine,NAC)对高脂饲养大鼠胰岛β细胞分泌功能的影响及可能机制。方法:将59只8周龄SD大鼠随机分为正常饲料组(NC组)、高脂饲料组(HF组)和高脂 NAC组(NAC组)。饲养20周,(1)测血浆及胰腺组织丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)水平;(2)正常血糖高胰岛素钳夹实验,评价外周组织胰岛素抵抗程度;(3)胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;(4)实时荧光定量PCR方法比较各组大鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)和葡萄糖转运子-2(Glut-2)mRNA表达的变化。结果:(1)HF组血浆及胰腺MDA水平明显高于NC组,GSH水平低于NC组,NAC可以改善以上变化;(2)HF组葡萄糖输注率(GIR)比NC组降低(P<0.01),用NAC后GIR明显改善(P<0.01);HF组葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS)功能下降,用NAC后可逆转上述变化;(3)HF组胰岛细胞IRS-1、IRS-2、Glut-2mRNA表达降低42.3%、28.1%、22.9%(P均<0.05);NAC组胰岛细胞IRS-1、IRS-2、Glut-2 mRNA表达与HF组相比增加40.2%、30.2%,19.1%(P均<0.05)。结论:大剂量抗氧化干预治疗能改善胰岛细胞胰岛素信号传导,逆转高脂饲养导致的大鼠胰岛细胞分泌功能紊乱,其机制可能与NAC纠正机体氧化及抗氧化失衡有关。