一株猪圆环病毒3型的鉴定和遗传演化分析

目的 了解宜宾市养殖场猪圆环病毒（PCV）3型的基因组特征和遗传变异规律。方法 本试验利用PCR方法从患有呼吸困难仔猪中鉴定出一株PCV3,命名为SC-YB2212。经过PCR方法扩增衣壳蛋白序列,对测序结果拼接并进行系统进化树分析。结果 SC-YB2212与国内株PCV3序列同源性为97%～97.9%。遗传进化分析发现SC-YB2212与河北株MF318449和广西株MG650174和云南株MG650176属于同一分支,与西班牙株MH579746和美国株MK496280亲缘关系较近,与四川株MZ449244和重庆株KY075992亲缘关系较远。结论 本研究为深入了解PCV3的感染及其毒株的分子特征和遗传变异,为PCV3的致病性研究和防控提供参考。     

马乙型脑炎病毒E蛋白的原核表达及间接ELISA的初步应用

目的原核表达马乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)E蛋白,建立JEV间接ELISA诊断方法。方法根据GenBank(AF315119.1)公布的JEVSA14-14-2株E蛋白基因序列设计一对引物,提取病毒RNA经反转录和RT-PCR扩增获得E蛋白编码基因片段,将该片段插入表达载体pET30a(+),转化BL21(DE3)后经IPTG诱导蛋白表达,Western blot检测活性,以表达的E蛋白为包被抗原建立间接ELISA诊断方法。结果获得约1500bp目的片段,与GenBank上的序列同源性100%,其表达产物相对分子质量约为60000,Western blot结果显示该蛋白可与JEV阳性血清结合,具有免疫反应性。建立了间接ELISA检测方法,对不同省份的340份马血清进行检测,其中154份为阳性。结论原核表达JEV的E蛋白具有良好的免疫活性,建立的间接ELISA诊断方法特异性和灵敏性较好,可用于JEV的现地检测。