丹参素和克伦特罗对兔骨髓间充质干细胞成纤维细胞集落的影响

目的以丹参素和克伦特罗为干预药物,观察对兔骨髓间充质干细胞增殖的影响。方法用梯度密度法分离和培养兔骨髓间充质干细胞,18只兔子随机被分到空白组、丹参素和克伦特罗组。观察形成的骨髓间充质干细胞成纤维样集落数目。并利用骨髓间充质干细胞诱导成骨法和骨髓间充质干细胞表面标志流式分析法鉴定。结果和其它浓度相比,浓度为10ug/ml的丹参素和浓度为1.0ug/ml的克伦特罗有较大生成成纤维样集落数目能力。结论丹参素和克伦特罗对兔骨髓间充质干细胞有增殖作用。     

丹参素和克伦特罗对兔骨髓间充质干细胞成纤维细胞集落的影响

目的以丹参素和克伦特罗为干预药物,观察对兔骨髓间充质干细胞增殖的影响。方法用梯度密度法分离和培养兔骨髓间充质干细胞,18只兔子随机被分到空白组、丹参素和克伦特罗组。观察形成的骨髓间充质干细胞成纤维样集落数目。并利用骨髓间充质干细胞诱导成骨法和骨髓间充质干细胞表面标志流式分析法鉴定。结果和其它浓度相比,浓度为10ug/ml的丹参素和浓度为1.0ug/ml的克伦特罗有较大生成成纤维样集落数目能力。结论丹参素和克伦特罗对兔骨髓间充质干细胞有增殖作用。     

骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的新技术

骨髓间充质干细胞移植是治疗心肌梗死的新途径之一,其技术和方法不断发展。诸如建立更好的大型活体实验动物模型；改进对植入细胞的标记追踪技术；进一步研究细胞植入的适宜方式和时间等。骨髓间充质干细胞移植和基因疗法相结合可能得到叠加的治疗效果。     

低温致乳鼠心肌细胞损伤中Bim蛋白的作用及PI3K/Akt相关机制

背景:寒冷刺激可引发心血管疾病或导致其加重,研究极端气候条件下心血管疾病的发病规律及其分子生物学机制对制定有效的防范和治疗措施有重要意义。目的:观察低温对心肌细胞凋亡率、乳酸脱氢酶活性及促凋亡蛋白Bim表达的影响,并从PI3K/Akt信号通路探讨低温影响心肌细胞中Bim表达的可能途径。方法:将体外培养的心肌细胞在4℃冷水浴中处理1h后,放入37℃CO2培养箱中继续培养0,4,8,12,16,24h,AnnexinV-FITC/PI双染检测细胞凋亡率,MTS/PMS法检测细胞存活情况,全自动生化分析仪测细胞培养基中乳酸脱氢酶活性。Western blot测定Bim在心肌细胞中的表达情况,并在Bim蛋白开始表达的时间点向培养的心肌细胞中加入PI3K/Akt阻断剂LY29004,观察心肌细胞凋亡率、乳酸脱氢酶活性及Bim、p-PI3K蛋白表达的变化。结果与结论:冷处理后,心肌细胞凋亡率增加、存活率降低、培养基中乳酸脱氢酶活性增高、Bim表达增加(P<0.05),均在冷处理后24h达到极点。加入LY29004后,心肌细胞凋亡率增加更明显,培养基中乳酸脱氢酶活性及Bim表达也有所增加,p-PI3K表达降低(P<0.05)。说明低温能够通过促进Bim表达诱导心肌细胞凋亡,而PI3K/AKT信号通路可能参与了Bim的诱导表达。     

阿托伐他汀干预减轻缺血复合冷应激诱导的大鼠心肌损伤

 摘要：目的 分析缺血复合冷应激对大鼠心肌的影响,探讨阿托伐他汀干预对这种复合应激下心肌的作用及可能机制。方法 以永久性左冠状动脉前降支结扎术+4℃冷刺激（8小时/天,4天）建立心肌缺血复合冷应激大鼠模型,复合应激前3天及后4天给以阿托伐他汀灌胃（20mg.kg-1.d-1）。超声心动图评价心功能,TTC染色法测定心肌梗死面积,western blotting法检测心肌p-PI3K、p-GSK3β、Bim、Caspase3蛋白表达。结果 心肌缺血复合冷应激使心功能恶化、梗死面积增大(P<0.01);阿托伐他汀干预后心功能改善、梗死面积缩小(P<0.01), p-PI3K、p-GSK3β表达上调(P<0.01),Bim、Caspase3表达下降(P<0.01)。结论 心肌缺血复合冷应激加重心肌损伤,阿托伐他汀干预能部分减弱此作用,其机制可能与激活PI3K/Akt/GSK3β通路及下调Bim表达有关。     

低温致乳鼠心肌细胞损伤中Bim蛋白的作用及PI3K/Akt相关机制

背景：寒冷刺激可引发心血管疾病或导致其加重,研究极端气候条件下心血管疾病的发病规律及其分子生物学机制对制定有效的防范和治疗措施有重要意义。 目的：观察低温对心肌细胞凋亡率、乳酸脱氢酶活性及促凋亡蛋白Bim表达的影响,并从PI3K/Akt信号通路探讨低温影响心肌细胞中Bim表达的可能途径。 方法：将体外培养的心肌细胞在4 ℃冷水浴中处理1 h后,放入37 ℃ CO2培养箱中继续培养0,4,8,12,16,24 h,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡率,MTS/PMS法检测细胞存活情况,全自动生化分析仪测细胞培养基中乳酸脱氢酶活性。Western blot测定Bim在心肌细胞中的表达情况,并在Bim蛋白开始表达的时间点向培养的心肌细胞中加入PI3K/Akt阻断剂LY29004,观察心肌细胞凋亡率、乳酸脱氢酶活性及Bim、p-PI3K蛋白表达的变化。 结果与结论：冷处理后,心肌细胞凋亡率增加、存活率降低、培养基中乳酸脱氢酶活性增高、Bim表达增加(P < 0.05),均在冷处理后24 h达到极点。加入LY29004后,心肌细胞凋亡率增加更明显,培养基中乳酸脱氢酶活性及Bim表达也有所增加,p-PI3K表达降低(P < 0.05)。说明低温能够通过促进Bim表达诱导心肌细胞凋亡,而PI3K/AKT信号通路可能参与了Bim的诱导表达。     

不同缺氧状态下骨髓间充质干细胞表达血管内皮生长因子的差异

背景：骨髓间充质干细胞在植入心肌缺血/梗死区域后，面临缺氧缺血微环境，其如何通过旁分泌细胞因子来发挥重建侧支微循环、修复心肌的作用，是目前存在争论的焦点之一。 目的：探讨骨髓间充质干细胞在不同时程缺氧环境下血管内皮生长因子的表达规律。 设计、时间及地点：细胞学体外实验，于2008-03/11在南昌大学第二附属医院分子医学实验中心完成。 材料：清洁级新西兰大白兔2只，由南昌大学医学院实验动物中心提供。 方法：常规差速贴壁法分离培养兔骨髓间充质干细胞。细胞缺氧微环境在AnaeroPack密闭方盒中产生，盒中置入一次性缺氧催化袋GENbox anaer(可吸收O2，产生CO2)，指示条监测氧的耗竭，根据缺氧培养时程分为缺氧0，6，12，24 h组。 主要观察指标：RT-PCR法检测血管内皮生长因子 mRNA的表达，Western Blot法检测血管内皮生长因子蛋白的表达。 结果：血管内皮生长因子mRNA及蛋白的表达水平均为缺氧0 h组< 6 h组< 12 h组< 24 h组(P < 0.01)。 结论：缺氧24 h以内的培养环境下，骨髓间充质干细胞表达血管内皮生长因子的水平呈缺氧时程依赖性增加。     

极端热环境心肌细胞损伤乳鼠心肌细胞凋亡与Bim及caspase-3蛋白的表达

背景：目前有关极端气候条件下疾病发生规律、机制及防治措施的研究，国内只有零星报道，均为病理生理表现的研究，尚未深入到分子机制的研究。 目的：观察前凋亡蛋白Bim及caspase-3在极端热环境致乳鼠心肌细胞损伤中的作用。 方法：体外培养1~3 d龄SD大鼠心肌细胞，建立心肌细胞热环境损伤模型(42 ℃，60 min)。观察热处理后恢复37 ℃孵育0，4，8，12，16，24 h时心肌细胞损伤情况。倒置显微镜下观测各组心肌细胞搏动频率和节律；MTS/PMS法检测细胞存活率；全自动生化分析仪测定心肌细胞培养液乳酸脱氢酶活性；Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率；Western blot检测Bim及caspase-3蛋白表达。 结果与结论：体外培养乳鼠心肌细胞热处理后即刻（0 h）搏动频率略有增加，并可见异常节律，此后随时间的延长心肌细胞搏动频率逐渐减慢，存活率下降(P < 0.05)，乳酸脱氢酶活性升高（P < 0.05）；恢复37 ℃孵育8 h时前凋亡蛋白Bim显著升高(P < 0.05)；caspase-3从恢复37 ℃孵育时表达即明显升高(P < 0.05)。因此，提示极端热环境使心肌细胞发生了损伤，且以凋亡为主要损伤形式，前凋亡蛋白Bim与caspase-3可能参与了极端热环境致乳鼠心肌细胞凋亡的过程。     

我国商业医疗责任保险现状及发展途径探讨

医疗风险具有不可抗拒性,世界各国都致力于医疗风险防范体系的构建.医疗风险防范体系的运作,需要行业管理部门、医疗机构、医务人员、患者及保险机构等几方面的协同合作.     

骨髓间充质干细胞表达的hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白的提纯及功能鉴定

目的:用hVEGF_(121)/EGFP真核质粒转染骨髓间充质干细胞,提纯其表达的hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白,并体外检测其功能.方法:用课题组前期工作构建的pEGFP-N_2-hVEGF_(121)重组质粒提取质粒DNA.通过阳离子脂质体介导pEGFP-N_2-hVEGF_(121)重组质粒DNA转染体外培养的骨髓间充质干细胞,使用荧光显微镜检测hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白表达.用Amicon超滤离心管纯化融合蛋白.结果:荧光显微镜下观察到转染pEGFP-N_2-hVEGF_(121)重组质粒的骨髓间充质干细胞,Westen blot证实转染骨髓间充质干细胞的培养液中存在hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白表达.MTT试验证实人脐静脉内皮细胞数量在hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白组明显多于对照组(P<0.05).Miles实验证实hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白增加血管壁的通透性.结论:①携带hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白表达基因的真核表达质粒,在骨髓间充质干细胞中获得表达.②骨髓间充质干细胞表达的hVEGF_(121)/EGFP融合蛋白在体外具有野生型血管内皮细胞生长因子的功能.