DNA微条形码技术在降解检材种属鉴定中的应用及法医学意义

【立题依据】 标准DNA条形码技术是基于COI基因序列分析而建立的一种物种鉴定方法,但由于目的基因扩增片段长达645bp,在法医物证降解检材中的应用受到限制。因此,本研究拟建立DNA微条形码技术,以解决法医物证特殊检材种属鉴定的难题。 【设计思路】 设计分别扩增不同近缘动物COI基因的通用引物,构建相应的复合扩增体系,并从种属特异性、林敏性、稳定性、案件适应性等方面进行验证。 【实验内容】 DNA提取及处理:有机溶剂法提取实验样本的基因组DNA;制备DNA<200bp的降解检材和两种动物DNA不同比例混合的混合检材。引物设计与合成:设计4对种属特异性引物和1对无种属特异性的ND3引物,并合成COI基因的标准引物。PCR扩增:①以10种动物基因组DNA为模板,分别用自行设计的4对引物进行扩增,以检验引物种属特异性;②以10种动物不同浓度基因组DNA为模板,分别用对应种属特异性的引物进行扩增,以检验引物扩增效能;③以降解检材基因组DNA为模板,分别用自行设计引物和标准引物进行扩增,以评估引物应用价值。PCR复合扩增:在确定自行设计引物特异性、扩增灵敏度的基础上,通过调整引物量和退火温度构建含有5对引物的复合扩增体系,并用于单一样本和混合样本基因组DNA的扩增。扩增产物检测:用聚丙烯凝胶电泳结合银染的方法检测各种动物模板DNA的扩增效果,以判定引物的扩增特异性和灵敏度,及降解检材和混合检材的扩增效果;用循环测序的方法获得各扩增产物的碱基序列,并通过BLAST软件与DNA数据库比对及遗传距离分析,判定检材的种属来源。 【实验材料】 常见家禽(鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鸽子)和常见家畜(水牛、黄牛、山羊、绵羊、马、驴、犬)共7科18种动物及人类血液样本各5例。 【可行性】 (1)不同种属动物COI基因序列可从相应DNA数据库获得;(2)熟练掌握引物设计的操作方法和PCR技术;(3)具备本研究所需的各种仪器、设备和试剂。 【创新性】 为法医物证降解检材的种属鉴定提供一种有效的方法。     

单核苷酸多态性在代谢综合征研究与防治中的应用

单核苷酸多态性(SNP)是第三代分子标记技术,成为当今医学研究最常用的方法之一。随着遗传学、分子生物学的发展,SNP的检测和分析方法趋于多样化,并逐步深入到临床疾病的研究和防治过程中,如代谢综合征。以SNP为基础的基因芯片技术用于筛查代谢综合征快速而准确,得到广泛应用,正逐步取代传统的DNA检测。将SNP检测结果作为参数来构建代谢综合征风险预测模型,从而起到风险预测评估,指导预防疾病发生的作用。同时,代谢综合征关联基因的确定有助于治疗方案的制订。     

水冷式微波天线热凝固离体猪肝的实验研究

微波辐射器的热场特性对肿瘤热疗有重要的实用意义,它直接决定了治疗肿瘤的尺寸和大小.本文通过水冷式微波天线在离体猪肝热消融的实验,研究其治疗区域的形态、温度分布等信息,将有助于临床参考.结果表明,水冷式微波天线沿径向方向的温度衰减快,能量主要集中在天线半径1cm以内;天线轴向上的温度分布由于有冷却水是非对称的,从而影响了凝固区的形状;增加加热时间会在一定程度上增加凝固范围.     

患者手术体位摆放的原则方法以及注意事项

手术室护士不仅要保证患者手术顺利进行,而且还要根据每个患者的实际情况,安置好手术体位,使患者皮肤、神经、血管、组织避免受压损伤,顺利度过手术关,以利病情早日康复。手术体位是指术中患者的位式,包括患者的卧姿、体位垫的使用、手术床的正确操纵等。正确摆放手术体位,是手术成功的基本保证。     

高校教师职业紧张的调查研究

目的了解高校教师职业紧张现状并分析紧张感的主要影响因素。方法从某高校选取178名教师作为研究对象,采用职业紧张量表(OSI-R)和艾森克人格问卷简式量表(EPQ-RSC)作为研究工具,运用多重线性回归分析紧张反应的影响因素。结果①职业任务、个体紧张反应、应变能力3个分量表的得分均略高于常模;②高校教师职业任务、个体紧张反应、应变能力的紧张程度处于中高度的分别占20.55%、34.25%、38.36%;③对教师职业紧张反应的影响因素拟合多重线性回归模型,纳入的影响因素为人格特质、职业任务、应变能力和性别。结论①部分高校教师存在不同程度的职业紧张感;②职业紧张反应的主要影响因素为人格特质、职业任务和应变能力。     

高中生学习策略的调查研究

目的了解高中生学习策略并分析学习策略在不同维度上的差异。方法从几所高中选取278名高中生作为研究对象,采用《中学生学习策略问卷》作为研究工具进行分析。结果①学习策略发展水平存在显著的年级差异(t=4.064,P<0.01)和性别差异(t=1.975,P<0.05);②女生在复述策略(t=-2.611,P<0.05)和精加工策略(t=-2.362,P<0.05)维度上的得分高于男生,男生在计划策略(t=4.454,P<0.01)、监视策略(t=4.948,P<0.01)、调节策略(t=4.073,P<0.01)3个维度上的得分显著高于女生;③不同类型学校高中生在学习策略水平上存在显著差异(t=5.256,P<0.01)。结论①学生的学习策略并未表现出随年级增长而提高的趋势;②不同性别学生在认知策略和元认知策略水平上存在显著差异;③重点中学学生学习策略的总体水平显著高于普通中学。