干细胞研究进展

干细胞包括胚胎干细胞与成体干细胞。介绍了近年来诱导胚胎干细胞向多种或某一种组织细胞分化的实验报道 ,并对成体干细胞“可塑性”分化的几个问题进行了讨论     

骨髓内皮细胞条件培养液促进小鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞

目的:为观察骨髓内皮细胞务件培养液(mouse bone marrow stromal cell-conditional medium,mBMEC-CM)对鼠胚胎干细胞生成造血集落形成细胞的影响.方法:将鼠胚胎干细胞系D3细胞(embry-onic stem cell line-D3,ES-D3)形成4 d拟胚体(day-4 embryoid bodies,4dEBs),再用mBMEC-CM诱导4dEBs生成高增殖潜能集落形成细胞(high proliferation potential-colony formation cell,HPP-CFC)和红系爆式集落形成单位(burst forming unit-erythroid,BFU-E).以形成造血集落的数量为检测指标,观察mBMEC-CM诱导浓度、天数和诱导生成的细胞数与形成HPP-CFC和BFU-E数之间的关系.结果:形成的HPP-CFC和BFU-E集落数均与诱导生成的4dEBs细胞数呈正相关(HPP-CFC:r=0.916,P＜0.05;BFU-E:r=0.927,P＜0.05),且均随着种入的细胞数(在1×107～4×107/L范围内)增加而呈现相应的增加.当种入的细胞数增加到5×107/L时两种集落数均不再增加.mBMEC-CM诱导浓度(在0～20%范围内)与其诱导生成的HPP-CFC和BFU-E数呈剂量依赖性正相关(HPP-CFC:r=0.909,P＜0.05;BFU-E:r=0.927,P＜0.01).20%浓度mBMEC-CM诱导4dEBs来源的细胞于3,6和9 d形成的HPP-CFC和BFU-E数,以诱导3 d者最高,6 d次之,9 d最低.结论:骨髓内皮细胞条件培养液能促进鼠胚胎干细胞分化为HPP-CFC和BFU-E.     

血清及细胞因子对人骨髓间质干细胞增殖的影响

目的 :探讨影响体外骨髓间质干细胞增殖的因素。方法 :取胸部外科手术无血液系统疾病病人肋骨 ,采用密度梯度离心法分离单个核细胞 ,以每皿 5× 10 5个的细胞浓度接种 ,9d后 ,瑞士 吉姆萨染色 ,计数集落并进行统计分析。结果 :在 5 %～ 30 %的血清浓度范围内 ,骨髓间质干细胞集落数随血清浓度的升高而增多。bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6等细胞因子可促进骨髓间质干细胞的增殖。结论 :血清浓度与细胞因子bFGF ,IL 1α ,IL 3,IL 6可促进MSC的增殖     

粒-巨噬细胞集落刺激因子对小鼠骨髓内皮细胞增殖的促进作用

本研究以内皮细胞培养液（Endo-M）培养小鼠骨髓内皮细胞,探讨粒-巨噬系集落刺激因子（rmGM-CSF）对骨髓内皮细胞增殖的影响。用Endo-M培养小鼠骨髓内皮细胞,通过Wright-Giemsa染色计数内皮细胞集落、应用免疫荧光法观察内皮细胞表型;加入不同浓度的GM-CSF,通过集落形成率、MTT法和流式细胞术检测内皮细胞生长周期,观察GM-CSF对内皮细胞体外扩增的影响。结果表明：Endo-M诱导的骨髓细胞可以生成内皮细胞集落,vWF检测呈阳性;集落形成率检测及MTT法测定均证实GM-CSF对内皮细胞的增殖具有明显的促进作用;生长周期检测结果显示,GM-CSF处理组的细胞进入S期的比率为9.3%,而对照组为2.1%,说明GM-CSF可以通过促使内皮细胞进入S期而加快细胞的分裂,促进细胞增殖;比较第1代和第4次传代后细胞的生长曲线,两者无明显差别,说明多次传代后的细胞仍保持传代早期的增殖潜能。结论：GM-CSF对内皮细胞的增殖具有促进作用,经多次扩增传代后内皮细胞的增殖潜能无明显改变。     

前列腺素与造血调节

近20年来,研究者们发现前列腺素(PG)尤其是前列腺素E(PGE)在正常及缺氧、感染等异常情况下对造血都有重要调节作用.PGE能在骨髓、脾脏、肾脏等主要造血相关器官中合成,促进造血干细胞的增殖,促进红系祖细胞的增殖和分化,抑制粒单系尤其是单核细胞系的增殖和分化;这些作用受造血细胞表面Ia抗原的表达及细胞增殖状态、造血调节细胞、造血调节因子的相互作用等许多因素影响;且有证据表明,PGE是通过膜受体——cAMP系统将信息传递进细胞内的.PG在造血相关器官中的合成     

胚胎干细胞形成拟胚体的几个影响因素

胚胎干细胞 (ｅｍｂｒｙｏｎｉｃｓｔｅｍｃｅｌｌｓ,ＥＳｃｅｌｌｓ)来源于囊胚的内细胞团 ,在体外长期培养 ,能保持高度未分化状态[1] 。胚胎干细胞体外悬浮培养 ,可形成含内胚层、中胚层、外胚层的拟胚体 (ｅｍｂｒｙｏｉｄｂｏｄｉｅｓ,ＥＢｓ) [1,2 ] 。应用ＥＢｓ模拟体内环境研究胚胎发育和定向诱导 ,首先要解决的问题是形成足量的ＥＢｓ。本文以小鼠的胚胎干细胞系ＥＳ Ｄ3为例 ,探讨有效形成ＥＢｓ的几个影响因素。1　材料与方法1.1　材料　ＥＳ Ｄ3由中山大学北校区实验动物中心陈系古教授提供。胚胎成纤维细胞取自孕 12 .5ｄ昆明鼠的鼠胚。胎牛血清分别购自Ｈｙｃｌｏｎｅ公司和杭州四季青     

定量测定造血干细胞的体内扩散盒琼脂培养技术 Ⅱ.寄主小鼠接受~(60)Co 预照射或长春新碱对体内扩散盒琼脂培养中细胞团产率的影响

本文报道了采用不同寄主小鼠进行小鼠造血干细胞体内扩散盒琼脂培养的结果比较。寄主小鼠在植入扩散盒1～2小时前接受750拉德~(60)Co照射或在植入前24小时注射VCR1.6毫克/公斤并未能提高CFU-C细胞团产率。这种情况是否是由于正常小鼠体液内的CSF水平已足以有效地刺激小鼠骨髓CFU-C生成细胞团,故提高CSF浓度不能再增加细胞团的产率。有待在掌握本实验小鼠的种属特性及调整照射剂量后作进一步研究。     

骨髓内皮细胞分泌的抑制CFU—F生长的因子

为探讨骨髓微环境中内皮细胞调节造血的可能机制,本实验研究了骨髓内皮细胞无血清条件培养液（ＢＭＥＣ－ＣＭ）及其不同分子量组分对骨髓成纤维祖细胞（ＣＦＵ－Ｆ）生长的作用。在体外培养条件下,收集人和小鼠纯骨髓内皮细胞无血清条件培养液,应用连续超滤技术从其中制备出分子量〉１０ｋＤ,３－１０ｋＤ和〈３ｋＤ三种组分,进行骨髓ＣＦＵ－Ｆ集落形成实验,检测这些条件培养液及其超滤组分的作用。结果显示,人和小鼠骨髓内