TDP43慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞与软骨细胞共培养后的增殖与凋亡

文题释义： TTDP43：一种高度保守、广泛表达的核蛋白,多功能地与DNA和RNA结合参与RNA转录、选择性剪接,并可调节细胞中mRNA的稳定性,可从细胞核到细胞质中形成泛素阳性包涵体,对肌萎缩侧索硬化症和额颞叶变性具有神经毒性。 RACK1：是G蛋白β亚基的同族体,一种胞浆内游离的支架蛋白,通过不同的WD40位点,结合、转运PKC到细胞内相应的位置,并使其保持活性状态;除可与细胞膜上活化的PKC结合发生反应外,还可结合多种胞浆蛋白或亚细胞结构,参与多条代谢通路,发挥不同的生理作用。 背景：在缺血缺氧条件下TDP43可能为MAPK信号通路关键的负调控因子,但其在骨性关节炎中对JNK及p38 MAPK信号通路的作用并不清楚。 目的：研究野生型TDP43介导骨性关节炎中软骨细胞病变的靶基因RACK1表达,分析其发挥应激作用的效应。 方法：以TDP43慢病毒载体转染人脐带间充质干细胞,分析其体外分化为软骨细胞的能力。将TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞、空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞、未转染脐带间充质干细胞分别与人软骨细胞共培养12 d,倒置显微镜下观察软骨细胞形态变化;共培养第0,3,6,9,12天,分析软骨细胞增殖水平;共培养第3天,流式细胞仪检测软骨细胞凋亡率;共培养第3天,qRT-PCR检测软骨细胞内TDP43、RACK1、p38、JNK、AP-1和cl-xl的基因表达。 结果与结论：①TDP43慢病毒载体转染后,人脐带间充质干细胞可分化为软骨细胞;②与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞形态发生显著改变,细胞变得粗大,并出现多个分枝情况;与空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞、未转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞形态未出现变化,呈梭形贴壁生长;③软骨细胞与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养后,促使软骨细胞凋亡而抑制了细胞增殖(P < 0.05);④软骨细胞与TDP43慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养后,TDP43、RACK1、JNK、AP-1和Bcl-xl基因表达高于与未转染脐带间充质干细胞、空载体慢病毒转染脐带间充质干细胞共培养的软骨细胞(P < 0.05);⑤结果表明,软骨细胞高表达TDP43可激活RACK1的表达,进而调控软细胞增殖和凋亡。 ORCID: 0000-0002-4563-8652(黄永明) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

自噬基因结肠癌预后模型建立及验证

目的 通过筛选结肠癌预后自噬相关基因,构建一种基于差异表达自噬基因的结肠癌预后模型,探讨其特征及临床意义.方法 在癌症基因组数据库(TCGA)中,检索结肠癌的转录组数据,利用wilcox检验进行差异分析,筛选出结肠癌差异表达的自噬基因,对其进行KEGG pathway和GO功能富集分析.结合临床信息,使用COX分析筛选...     

关节镜联合内侧开放式胫骨高位截骨术治疗膝骨关节炎合并半月板损伤

目的探讨关节镜联合胫骨高位截骨术(high tibial osteotomy,HTO)治疗膝骨关节炎合并半月板损伤的短期临床疗效。方法选取2017年10月至2018年10月本院接收的关节镜联合内侧开放式胫骨高位截骨术治疗膝关节内侧间室骨关节炎合并半月板损伤患者38例(38膝)为研究对象,其中男8例,女30例;左膝20例,右膝18例;年龄51~63岁,平均(57.78±2.68);身体质量指数(body mass index,BMI)平均为(26.74±2.03)kg/m^2;病程2~8年,平均(5.16±1.72)年。采用美国特种外科医院(the hospital special surgery,HSS)膝关节评分、疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、胫骨近端内侧角(medial proximal tibial angle,MPTA)及股胫角(femur tibia angle,FTA)进行疗效评估。结果2例患者在关节镜检查中发现了HTO禁忌证而改行其他手术,余36例在关节镜辅助下行胫骨高位截骨术。36例患者均获随访,随访时间10~18个月,平均(13.41±2.16)个月。所有患者术后切口均愈合良好,术后未出现下肢深静脉血栓、感染、截骨未愈合或延迟愈合等并发症;X线片复查所有患者截骨处均达骨性愈合。末次随访时,患者的HSS膝关节评分由术前的(60.97±2.89)分升至(86.14±3.09)分,VAS评分由术前的(6.56±0.91)分降至(1.75±0.60)分,MPTA由术前的(83.00±2.16)°改善为(92.16±2.93)°,FTA由术前的(177.68±1.36)°改善为(174.07±1.95)°,手术前后各指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论关节镜联合内侧开放式胫骨高位截骨术治疗膝骨关节炎合并半月板损伤的短期临床疗效满意,诊断精确,但远期疗效还需进一步验证。     

全麻手术注意事项有哪些?

<正>全麻手术便是我们经常说的全身麻醉,它指代的是将麻醉药肌肉注射、静脉注射或者直接吸入患者体内,来短时间内抑制患者中枢神经的过程,其临床表现为患者出现骨骼肌松弛、全身痛觉消失、神志消失等。结合我国当前医院麻醉现状来看,常用的麻醉药物为七氟烷、氧化亚氮以及地氟烷等等,此类型的药物属于吸入性麻醉药物,向患者静脉注射的麻醉药物有氯胺酮、异丙酚以及阿片类、巴比妥类。肌肉松弛类的药物包含有去极化肌松药以     

免疫检查点抑制剂在晚期非小细胞肺癌治疗中的应用进展

随着程序性死亡受体1(PD-1)、程序性死亡配体1(PD-L1)以及细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA-4)等免疫检查点的发现，免疫检查点抑制剂（ICI）逐渐成为肿瘤治疗领域中最有前景的方法之一，已被证实可以提高晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者的生存率。与化疗相比，对于肿瘤细胞表面PD-L1高表达的晚期NSCLC患者，抗PD-1/PD-L1治疗后生存期显著延长且不良反应较少。抗CTLA-4药物单药治疗效果有限，通常与PD-1/PD-L1药物联合可进一步提高抗肿瘤效果。另外一些新型免疫检查点抑制剂，如依吉利单抗、替拉戈鲁单抗等在临床试验中也表现出一定的抗肿瘤作用，未来在晚期NSCLC患者的治疗中或许能提供帮助。对ICI在NSCLC治疗中的临床应用进行总结，同时对未来免疫治疗的发展和预测性生物标志物进行展望，可以为晚期NSCLC患者的治疗提供新的靶点和思路。