乳头瘤病毒E2蛋白的分子生物学研究进展

乳头瘤病毒E2蛋白是一种多功能蛋白,在乳头瘤病毒的生活史中处于核心的枢纽地 位。E2蛋白可在DNA复制水平、RNA转录水平上对基因表达进行调控。E2蛋白可启动、增强或抑制乳头瘤病毒早期启动子的表达。研究E2蛋白的功能有助于揭开乳头瘤病毒的生活史及其致病的分子机理。     

鲍温氏病组织人乳头瘤病毒16型结构基因L1的克隆及其序列分析

本研究采用ＰＣＲ法从中国妇女鲍温氏病组织标本扩增获得了宫颈癌密切相关的人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）的晚期基因Ｌ１,并装入测序载体测序分析了其ＤＮＡ的序列,与标准型进行了比较,发现有若干变异,此研究对序列及变异意义进行了分析和讨论,为今后Ｌ１基因分子流行病学调查,Ｌ１蛋白的结构与功能研究、疫苗研制以及ＨＰＶ相关的基础性研究提供了有用的资料,同时在国内外首次报道了鲍温氏病组织中ＨＰＶ１６Ｌ１的序列     

喷昔洛韦对宫颈癌细胞系抑制作用的研究

目的喷昔洛韦9位取代鸟嘌呤化合物,在体内外对单纯疱疹病毒I型(HSV-I)、II型(HSV-II),带状疱疹病毒(VIV)有良好的抑制作用。我们从基础研究入手,在细胞水平上探讨喷昔洛韦对HPV(人乳头瘤病毒)相关细胞系的作用,为扩大此药的治疗适应症提供新的思路。方法采用不同来源的宫颈癌细胞系CaSki(HPV16型阳性的人宫颈鳞状上皮细胞系)、Hela(HPV18型阳性的人宫颈腺上皮细胞系)、N(由HPV16E6/E7基因和HSV的N片断共转染得到的恶性转化宫颈鳞状上皮细胞系)和2BS(人正常纤维细胞)及原代培养的正常人鳞状上皮细胞,加入不同浓度的喷昔洛韦,测定不同细胞在喷昔洛韦药物作用下的半数致死浓度(ED50),喷昔洛韦对上述细胞的ED50分别是2.5×10-3mol.L-1,7.5×10-3mg.L-1,2.5×10-3mg.L-1,5.0×10-3mg.L-1,15.0×10-3mg.L-1。选择合适的喷昔洛韦浓度加到各种细胞系中,在不同时间下,用倒置显微镜观察细胞的形态结构改变及测定了各种细胞的生长速度(生长曲线),用透射电子显微镜观察了细胞的超微结构变化。结果选择7.5×10-3mol.L-1喷昔洛韦作用于不同细胞,比较各自变化。作为阳性对照的N细胞24h后出现死亡,加药的第4d细胞几乎死亡殆尽,CaSki与N细胞的改变相近,表明喷昔洛韦药物对鳞状上皮细胞抑制作用最强;对HeLa细胞抑制程度相对较弱;对2BS细胞也有较强抑制作用;对正常人原代上皮细胞抑制作用不明显。生长受抑制的细胞在电镜观察下呈现不同程度的坏死改变。结论喷昔洛韦对HPV相关细胞系有一定的抑制作用,可以进一步探讨此药对HPV引起的组织病变的治疗作用。     

HPV16预防性疫苗的相关研究动态

人类乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）在宫颈癌患者中检出率高达９０％。近年来通过基因工程方法对ＨＰＶ的晚期基因（Ｌ１和Ｌ２基因）编码的外壳蛋白产物的研究很多，发现主要壳蛋白（Ｌ１）可自我组装成病毒样颗粒（ＶＬＰ），并可用途预防性疫苗；基于次要壳蛋白（Ｌ２）的预防性疫苗和核酸水平的预防性疫苗也很有前途。本文就近几年的研究进展及趋势作一综述。     

杆状病毒载体的研究进展

重组杆状病毒目前代表了一种发展比较成熟的方法技术学。其中载体的发展,尤其是用于表达水平的调控方面已达到了一个相当的高度;但关于表达的其它方面.如多种蛋白产物在同一细胞中的产生.改进的蛋白产物的纯化方法以及充分的蛋白质翻译后加工方式,为新载体和宿主细胞的完善发展留下了广阔的空间和前景。     

人乳头瘤病毒外壳蛋白研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)的晚期转录区(L区)编码病毒的两个外壳蛋白:主要外壳蛋白(L1)和次要外壳蛋白(L2),外壳蛋白具有组装功能、有抗原表位、在宿主细胞表面有蛋白受体。本文就HPV外壳蛋白的分子特性、组装功能、表达、抗原表位及血清学、受体、病毒外壳蛋白的组织等研究进展作一综述。     

药物熏蒸配合手法整复治疗强直性脊柱炎

强直性脊柱炎是一种主要累及脊柱与四肢大关节,以椎间盘纤维环及其附近结缔组织纤维化、骨化及关节强直为病变特点的慢性结缔组织病.     

人乳头瘤病毒16型结构基因L1在昆虫细胞中的表达及其生物学活性

目的 研究与宫颈癌及人类其它多种组织癌症密切相关的人乳头瘤病毒16型（HPV16）的晚期基因L1的表达及其生物学活性。方法 采用PCR法从pBSSK-B/16L1扩增了来自中国妇女鲍温病组织标本的HPV16晚期基因L1,装入杆状病毒转移载体;在DH10Bac内通过转座子Tn7的介导,使携带有杆状病毒多角体蛋白基因启动子Ppolh的HPV16 L1基因整合入杆状病毒,形成重组杆状病毒;转染昆虫细胞Sf9进行表达;将感染72h的Sf9细胞包埋、切片、染色后,电镜观察。提取L1蛋白,免疫BALB／ c小鼠。结果 重组杆状病毒在Sf9细胞内高效表达出L1蛋白,经Western blot发现能与L1抗体特异地结合;薄层扫描显示所表达的L1蛋白占Sf9细胞总蛋白的比例高达31％。经透射电镜观察表明,在细胞核里有大量的重组杆状病毒形成;并且产生了大量的由HPV16 L1蛋白单体自组装的病毒样颗粒（virus-like particles,VLP)。小鼠免疫实验结果表明,所表达的HPV16 L1蛋白单体自组装的病毒样颗粒（virus-like particles,VLP)。小鼠免疫实验结果表明,所表达的HPV16 L1蛋白具有强免疫原性。结论 此研究为今后L1基因分子流行病学检查、L1蛋白的结构生物学研究、疫苗研制以及HPV相关基础性研究提供了有用的资料。