STCl过表达对宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响

【目的】研究转染STCl基因对人宫颈癌CaSki细胞生物学行为的影响。【方法】通过MTT、集落形成、划痕实验、Tranwell实验、裸鼠成瘤等方法检测STCl基因转染对宫颈癌CaSki细胞增殖、迁移、侵袭、体内成瘤能力的影响。【结果1MTT和集落形成实验表明,与空载体组相比,CaSki／STCl细胞生长受到抑制,细胞存活率和集落形成率较低（P〈0．05）。划痕实验显示CaSki／STCl较CaSki／NC组细胞迁移率降低（35±3．2％ VS 64±4．5％,P〈0．05）。TranweⅡ实验显示CaSki／NC的85±5,而CaSki／STCl组穿膜细胞数较少为54±4（P〈0．05）。裸鼠成瘤实验显示,CaSki／STCl组和CaSki／NC组的肿瘤平均质量依次为（O．285士0．057）g、（0．523±0．154）g,差异具有统计学意义（P,0．01）。【结论】sTCl过表达抑制宫颈癌细胞增殖、转移及侵袭,STCl基因可用于宫颈癌的基因治疗。     

脑死亡致肺损伤家兔热休克蛋白70的表达与作用

背景：脑死亡供体已成为当前器官移植的主要来源。研究有效的方法与手段,保护供体器官,提高器官质量至关重要。目的：观察热休克蛋白70在脑死亡状态致肺损伤中的作用。方法：60只家兔随机均分为3组,即正常对照组：不行手术;假手术组：行股动脉插管、气管插管及颅骨钻孔置管术,不行颅内加压脑死亡术;脑死亡组：行股动脉插管、气管插管、颅骨钻孔置管及颅内加压脑死亡术,呼吸机维持脑死亡状态。各组均在术后2,4,6,8h记录动脉血压及心率的变化。苏木精-伊红染色光镜观察肺脏结构改变,RT-PCR和免疫组化检测各组肺脏热休克蛋白70的mRNA及蛋白表达。结果与结论：脑死亡组较假手术组血压与心率尚未发现显著变化（P〉0.05）。假手术组各时间点肺脏组织损伤不明显。2-6h内,随着时间延长,脑死亡组家兔肺脏损伤逐渐加重（P〈0.05）,但8h出现一定程度好转。热休克蛋白70mRNA与蛋白表达呈时间依赖性增高（P〈0.05）,始于2h,于8h最高。结果证实,热休克蛋白70可能介入脑死亡状态诱导的肺脏损伤,发挥自身防御性保护作用。     

不同胰胃吻合方式对腹腔镜胰十二指肠切除术后患者胃排空障碍影响研究

目的探究胰胃吻合在腹腔镜胰十二指肠切除术(LPD)的临床疗效,分析引起胃排空障碍(DGE)的影响因素。 方法回顾性分析2015年1月至2018年3月60例接受LPD的资料,根据术中消化道重建方式不同分为胰胃吻合(PG)和胰肠吻合(PJ)两组。PG组28例,PJ组32例。使用SPSS 21.0统计学软件进行分析,围手术指标、营养指标等采用( ±s)表示,采用独立t检验;并发症发生率采用χ²检验。利用单/多因素进行分析,探究影响胃排空障碍的危险因素,P<0.05认为差异有统计学意义。 结果两组均顺利完成手术,无中转开腹病例;PG组近期并发症6例(21.4%),远期1例(3.6%);PJ组近期并发症12例(37.5%),远期4例(12.5%);PG组近、远期并发症少于PJ组(P<0.05); 60例PD患者术后共8例(13.3%)发生胃排空障碍,单因素分析发现,吻合方式、术后出血、胰瘘是引发胃排空障碍的影响因素(P<0.05)。多因素分析发现,胰瘘是引发胃排空障碍的独立危险因素(P<0.05),吻合方式是减少胃排空障碍的保护因素(P<0.05)。 结论LPD术后PG较PJ对降低术后胰瘘、胃排空障碍更有优势,吻合方式及胰瘘与DGE的发生显著相关。     

全人源鼻咽癌抗独特型抗体I50的原核表达及活性鉴定

目的:用基因工程手段获得有活性的抗独特型抗体I50,并在体外鉴定其活性.方法:以fuse5-I50为模板,用PCR方法扩增出抗独特型抗体I50基因,并将其插入到pET25b(+)中构建原核表达载体pET25b-I50.含有重组质粒pET25b-I50的菌株E.coli BL21(DE3)经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖...     

人源鼻咽癌双价抗独特型抗体疫苗的制备及活性鉴定

目的:构建全人源鼻咽癌双价抗独特型抗体原核表达载体,并对其产物作初步鉴定。方法:利用分子克隆技术依次将G22,I50插入到原核表达载体pET25b(+)中,经菌落PCR,双酶切验证并测序。阳性重组子转化入表达菌株E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达后,表达的重组蛋白经His-tag纯化试剂盒纯化后复性。用Westernblot方法鉴定G22-I50双价蛋白的表达,ELISA方法分析其蛋白活性,并进一步观察其对外周血单个核细胞的刺激增殖情况。结果:构建的原核表达载体pET25b-G22-I50经测序验证,序列正确。双价蛋白G22-I50以包涵体形式高效表达,经纯化后纯度达90%以上。Westernblot鉴定表达的蛋白相对分子质量(Mr)约42000,与预期相符。ELISA鉴定复性后的蛋白已恢复活性,并能在体外刺激外周血单个核细胞的增殖。结论:成功获得了有活性的双价抗独特型抗体,为临床对鼻咽癌进行主动免疫治疗提供了理论基础。     

抗中性粒细胞胞浆抗体与系统性红斑狼疮患者疾病活动度的相关性

目的 探讨中性粒细胞胞浆抗体（anti-neutrophil cytoplasmic antibody, ANCA）在系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus, SLE）患者疾病活动中的作用,为临床诊疗提供实验室依据。方法 将1 025例SLE患者纳入本研究,并依据系统性红斑狼疮疾病活动指数（systemic lupus erythematosus disease activity index, SLEDAI）将其分为非活动组（n=750）和活动组（n=275）。记录并比较两组患者的人口学特征、临床症状、自身抗体、常规实验室检查、细胞因子和肾脏病理学等指标。结果 活动组患者具有肾、肺、皮肤、关节炎表现的发生率明显高于非活动组（均P <0.05）。所有患者均进行了ANCA检测,核周型ANCA(perinuclear ANCA, p-ANCA)是最主要的核型,且与疾病的活动状态显著相关（P <0.05）。对两组患者的自身抗体进行分析,结果显示,对髓过氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）有反应的患者有25例,所有患者对蛋白酶3(pr...     

CTLA-4基因多态性与肝细胞癌易感性的相关分析

目的：分析细胞毒T淋巴细胞抗原4（CTLA-4）基因多态性-318T/C、CT60G/A与肝细胞癌（HCC）易感性之间的相关性。方法选取于2012年9月至2014年8月就诊于四川省人民医院的277例 HCC患者及306例健康体检者作为研究对象,所有研究对象均为汉族人。抽取各研究对象外周血5 mL ,离心分离血清,采用化学发光法检测血清中甲胎蛋白（AFP）的水平;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清中白细胞介素（IL）-2、IL-4、转化生长因子-β（TGF-β）的水平。抽提全血基因组DNA ,PCR扩增后直接测序法检测CTLA-4-318 T/C、CT60 G/A基因多态性的分布。结果 CTLA-4-318 T/C ,CT60 G/A的3种基因型均符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）。CTLA-4-318 CC和CT60 AA与降低HCC的风险有关,CTLA-4 CT60 G/A不同基因型与血清AFP水平有明显相关性（χ2＝12.779,P＝0.012）。携带CTLA-4-318 T、CT60 G等位基因的 HCC患者血清中IL-2、IL-4水平明显降低,TGF-β水平显著升高,且CTLA-4-318 T与HCC的分级有明显的相关性。结论 CTLA-4-318 TT能够促进HCC的发生、发展,这可能与下调T h1/T h2型细胞因子,上调T h3型细胞因子有关。     

基因工程双价抗体在肿瘤中的研究进展

基因工程抗体技术的发展加速了单链抗体的应用,但其稳定性差，亲和力低，功能单一，体内清除过快等特点影响了它的广泛应用。双价抗体作为一种新型小分子抗体，具有双价的结合位点,能够使抗原分子上的两个表位交联或使两个分子连接，可以模拟完整的单克隆抗体的抗原抗体反应，其构建方法有亮氨酸拉链法、利用部分抗体恒定区法、连接肽法、利用双聚化结构法、knobs into holes技术等，在乳腺癌、 直肠癌、淋巴瘤等的诊治方面均有很好的应用价值。     

病理切片制作全程质量控制的实践

病理切片质量事关病理诊断的准确性,其制作环节多,影响质量的因素也多。多年来我们注重做好病理切片制作的全程质量控制,优片率保持在92%以上。现将做法介绍如下。1标本接收认真核对申请单与送检标本及其标志(联号、姓名、性别、科室、日期等)是否一致,符合要求者方可接收[1],并让送标本人签字;病理技师对标本及时编号和登记。     

六西格玛质量规则在特殊蛋白性能评价中的应用研究

目的应用六西格玛(6σ)质量规则评价特殊蛋白检测性能,指导实验室检验质量持续改进。方法分析本实验室特殊蛋白2017年第一次室间质评(EQA)及室内质控数据,分别计算各项目σ值和质量目标指数(quality goal index,QGI)。绘制标准化6σ性能评价图,评价检验性能,指导质控方案的设计;分析所有未达标项目性能不佳的主要原因,指导持续质量改进。结果根据2017年第一次EQA给出的偏倚,C3、ASO、CRPσ值为4~5,质量水平良好;Ig G、Ig A、Ig M、Ig Eσ值为3~4,检测质量一般;C4σ值为2~3,质量水平欠佳;RHFσ值为2,检测质量为不可接受。QGI指数显示,Ig G、Ig A、Ig M、Ig E、C3、ASO、CRP的QGI指数均小于0.8,提示应该首先提高上述指标的精密度;C4、RHF的QGI值在0.8~1.2,需要同时提高检测的准确度和精密度。结论 6σ质量管理规则可以有效评价特殊蛋白检验项目的质量指标,设计合理的质控方案,从而达到控制检测质量的目的。