高氟干预成釉细胞钙稳态差异表达基因的筛选及分析

背景：氟牙症是长期摄入大量氟所导致的牙釉质发育障碍，病因复杂，其发病机制有待深入研究。目的：通过转录组测序技术筛选高氟干预成釉细胞与钙稳态相关的差异表达基因，并进一步探索氟斑牙形成的分子机制。方法：分别用浓度为0,0.4,0.8,1.6,3.2,6.4 mmol/L的NaF处理成釉细胞LS8 24,48,72 h，检测细胞形态、细胞活性与细胞内钙离子浓度。分别用浓度为0,1.6,3.2 mmol/L的NaF处理成釉细胞LS8 24 h，通过转录组测序筛选差异表达基因，并对差异表达基因进行验证。结果与结论：(1)处理24 h后，NaF浓度0,0.4,0.8 mmol/L组细胞生长状态良好，细胞的数量增多，细胞轮廓清晰；当NaF浓度≥1.6 mmol/L，随着NaF浓度的增加，细胞体积逐渐皱缩变小、细胞数量减少。处理48,72 h后，NaF浓度0,0.4 mmol/L组细胞数量增加，0.8,1.6,3.2mmol/L组细胞数量逐渐减少，细胞形态变圆、变小，6.4mmol/L组细胞皱缩变圆悬浮于培养基中，几乎无细胞贴壁。当NaF浓度相同时，处理24 h后LS8细胞的生长状态最佳。CCK-8检...