小儿手足口病应用甲泼尼龙联合人血免疫球蛋白治疗对炎性水平、心肌功能的影响

目的探讨小儿手足口病应用甲泼尼龙联合人血免疫球蛋白治疗对炎性水平、心肌功能的影响。方法 100例小儿手足口病患儿,随机分对照组和联合组各50例。对照组采用常规基础治疗,联合组在对照组基础上应用甲泼尼龙联合人血免疫球蛋白治疗。比较两组缓解率;退热、神经受累、疱疹消失、口腔炎愈合时间及干预前后炎性水平、心肌功能。结果联合组缓解率高于对照组(P0.05);联合组退热、神经受累、疱疹消失、口腔炎愈合时间短于对照组(P0.05);干预前两组炎性水平、心肌功能相近(P0.05);干预后联合组炎性水平、心肌功能优于对照组(P0.05)。结论小儿手足口病应用甲泼尼龙联合人血免疫球蛋白治疗可显著改善症状,减轻炎性水平,改善心肌功能,值得推广。     

CIK/NK细胞对荷骨肉瘤NOD/SCID小鼠肺转移瘤的杀伤作用

目的制备骨肉瘤U-2OS细胞NOD/SCID小鼠肺转移模型,探讨CIK/NK细胞对肺转移瘤的杀伤作用。方法 60只NOD/SCID小鼠随机分为3组(每组20只),A组:每只鼠经尾静脉接种U-2OS细胞2×106(0.2 ml)后24 h,输注CIK/NK细胞(2×107/0.2 ml);B组:每只鼠经尾静脉接种U-2OS细胞2×106(0.2 ml)后24 h,注射生理盐水0.2 ml;C组:每只鼠经尾静脉注射生理盐水0.2 ml后24 h,注射生理盐水0.2 ml。比较各组小鼠生存时间及肺部肿瘤负荷情况。结果 B组接种U-2OS细胞后29 d内小鼠全部死亡,其中16只肺部出现肉眼可见瘤块;A组接种U-2OS细胞后60 d内小鼠死亡8只,肺部均发现肉眼可见瘤块,余12只肺部均无瘤块。A组平均生存时间显著高于B组,差异有统计学意义(P<0.05),而与C组比较差异无统计学意义(P>0.05)。B组小鼠死亡时体重明显低于A组,而肿瘤细胞比例明显高于A组(P<0.05)。结论 CIK/NK细胞在NOD/SCID小鼠体内有肯定的抗骨肉瘤肺转移瘤效果。     

强直性脊柱炎骨髓间充质干细胞诱导Th17/Treg失衡

目的观察强直性脊柱炎(AS)患者外周血白介素(IL)-17A、IL-23水平及Th17/Treg比例,探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)与Th17/Treg体外相互作用,为研究AS发生机制提供理论依据。方法研究对象为48例活动期AS患者[实验组,男43例、女5例,年龄(26.2±5.2)岁,均为HLA-B27~+]和49例健康志愿者[对照组,男44例、女5例,年龄(25.9±4.8)岁,HLA-B27~+43例、HLA-B27~-6例]。ELISA检测外周血清中IL-17A及IL-23水平,流式细胞术检测外周血单个核细胞(PBMCs)中的CCR4~+CCR6~+Th细胞(Th17)及Treg细胞数量。分离健康志愿者的PBMCs,将PBMCs分别与AS患者及健康志愿者的BMSCs体外共培养72 h,收集PBMCs行流式细胞术检测,评价BMSCs与Th17/Treg体外的相互作用。结果实验组与对照组血清IL-17A及IL-23的表达水平相近(P0.05);实验组Th17细胞明显高于对照组(P0.05),而Treg细胞明显低于对照组(P0.05)。与健康志愿者BMSCs共培养72 h后的PBMCs中Th17较培养前轻度下降,Treg轻度上升,差异无统计学意义(P0.05);而与AS患者BMSCs共培养72 h的PBMCs中Th17较培养前及对照组均明显上升,Treg均明显下降,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 AS患者PBMCs中Th17/Treg细胞亚群失衡。免疫抑制能力明显下降的BMSCs极可能通过诱导Th17/Treg失衡而在AS免疫发生机制中发挥重要作用。     

呼吸窘迫综合征晚期早产儿呼吸机相关性肺炎发生情况及影响因素分析

目的探讨呼吸窘迫综合征(respiratory distress syndrome, RDS)晚期早产儿呼吸机相关性肺炎(venti lator associated pneumonia, VAP)发生情况及影响因素。方法选取2014年2月—2018年2月我院行机械通气治疗的86例RDS晚期早产儿,观察VAP发生情况;并根据是否发生VAP将86例分为VAP组和未发生VAP组,比较两组患儿及母体相关资料,分析RDS晚期早产儿VAP发生的影响因素。结果 86例RDS晚期早产儿中30例(34.88%)发生VAP,56例(65.12%)未发生VAP。新生儿危重病例评分(neonatal critical illness score, NCIS)≤90分、有创通气时间≥90 h、重复插管上机次数3次是RDS晚期早产儿VAP发生的独立危险因素。结论 RDS晚期早产儿VAP发生率较高,NCIS评分≤90分、有创通气时间≥90 h、重复插管上机次数3次是导致RDS晚期早产儿VAP发生的独立危险因素。     

环氧乙烷灭菌物品对生物治疗细胞致畸性研究

目的 观察经环氧乙烷灭菌处理的物品感染生物治疗细胞后对其的致畸性.方法 将分离诱导的3种细胞分别接种至环氧乙烷灭菌处理保存的不同时间及高温高压灭菌的玻璃培养瓶中进行培养,分别将脐血诱导的NK/CIK细胞、人骨髓间充质下细胞和脐血CD34~+细胞,接种至环氧乙烷灭菌保存至培养瓶中,分别为1d(A组)、3个月(B组)、>6个月(C组);接种至高温高压蒸汽灭菌的玻璃培养瓶中D组为对照组;培养10 d,观察细胞的生长状况、形态、染色体断裂、断片、裂隙及核内染色体复制情况,计算染色体畸变率.结果 A、B组的NK/CIK细胞的诱导率明显低于C、D两组,差异有统计学意义(P<0.05),染色体断裂、断片及裂隙数量均明显高于C、D两组,差异有统计学意义(P<0.05),而C组与D组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 经环氧乙烷灭菌处理保存至1 d和3个月的物品对细胞产生明显的损伤作用,>6个月的物品对细胞未造成明显损伤作用;环氧乙烷对细胞会产生致畸致突变作用,建议采用保存至>6个月的灭菌物品,从而保证生物治疗的安全有效实施.     

利妥昔单抗联合自体外周血造血干细胞移植治疗儿童Burkitt淋巴瘤2例报告

本文应用利妥昔单抗(rituximab,商品名美罗华)联合自体外周血造血干细胞移植(Auto-PBSCT)治疗儿童Burkitt淋巴瘤2例.现报告如下.     

间充质干细胞对脐血CIK／NK细胞CD69表达及培养体系中T调节细胞量比的影响

本研究通过Transwell细胞隔离培养体系探讨骨髓源间充质干细胞（MSC）对脐血（CB）来源细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）／自然杀伤细胞（NK）CD69的表达以及对培养体系中CD4^＋CD25^＋T调节（Treg）细胞量比的影响。利用聚碳酯膜孔径0．4μm的Transwell隔离细胞培养系统将实验组分为隔离培养（Transwell）组和直接混合（mixture）培养组;将MSC和CIK／NK细胞按1：20、1：50和1：100的比例分别在Transwell组和mixture组中进行隔离和直接混合培养,每组6个重复孔;培养48小时后通过流式细胞术检测各纽CIK／NK细胞上CD69的表达以及培养体系中CD4^＋CD25^＋细胞量比的变化。结果显示：加入MSC的实验各组CB-CIK细胞和NK细胞上表达的CD69比例均显著低于对照组（P值均〈0．001）．Transwell组中的CIK和NK细胞上表达的CD69,在MSC的高浓度组（1：20组）均显著低于低浓度组（1：50组和1：100组）,其中CIK细胞组间的P值分别为0．046、0．020;NK细胞组间的P值均为0．000。mixture组中不同比例组问CIK细胞上表达的CD69无显著性差异,而NK细胞上CD69的表达在MSC的高浓度组（1：20组）均显著低于低浓度组（1：50组和1：100组）。加入MSC的CB—CIK／NK细胞体系中的CD4^＋CD25^＋细胞的量比不论在Transwell还是mixture组中均显著高于对照组（P值均〈0．01）;在Transwell组中．CIK／NK细胞体系中的CD4^＋CD25^＋细胞的量比在1：20组、1：50组均显著高于1：100组;在mixture各组中,CIK／NK细胞体系中的CD4^＋CD25^＋T调节细胞的量比均有显著性差异。MSC的高浓度组（1：20组）,CIK／NK细胞体系中的CD4^＋CD25^＋细胞量比在mixture组显著高于Transwell组;而在MSC的低浓度组（1：50纽和1：100组）,2纽体系中的C04^＋CD25^＋细胞量比无显著性差异。结论：MSC能以直接接触或间接作用的方式抑制异基因CIK／NK细胞的活化,这可能与MSC能上调培养体系中的CD4^＋CD25^＋Treg细胞量比有关,且这种作用与MSC的数量呈浓度依赖关系。     

环氧乙烷灭菌对临床生物治疗细胞体外培养的影响

目的观察环氧乙烷灭菌处理的物品对临床生物治疗细胞体外培养过程中的影响。方法采用细胞培养法,观察了环氧乙烷灭菌处理的物品对几种细胞生长的影响。结果经环氧乙烷灭菌处理保存至1 d内和3个月的物品对细胞产生明显的损伤作用,6个月以上的物品对细胞生长的影响基本消失。结论环氧乙烷灭菌处理的物品在灭菌后3个月之内其残留物对体外细胞培养会产生有害影响,建议将灭菌后物品保存至6个月以上再用于生物治疗。     

盐酸氨溴索辅佐阿奇霉素治疗儿童肺炎支原体肺炎的疗效分析

目的:探讨盐酸氨溴索辅佐阿奇霉素治疗儿童肺炎支原体肺炎的疗效.方法:收集2015年4月至2017年4月200例肺炎支原体肺炎患儿随机分为两组,对照组患儿给予阿奇霉素,实验组患儿则加用盐酸氨溴索,比较两组患儿相关临床指标、总体治疗效果、实验室指标、肺功能、凝血指标与免疫功能.结果:实验组患儿退热时间、咳嗽消失时间、啰音消失时间、X线浸润影消失时间与住院时间均显著性低于对照组;治疗后CRP、D-二聚体、IL-4、FIB与IgE水平组间比较均显著性低于对照组,FVC、FEV1、PEF、FEF75、IgA与IgG水平均显著性高于对照组,存在显著性差异(P<0.01);痊愈率明显高于对照组,存在明显差异(P<0.05).结论:盐酸氨溴索辅佐阿奇霉素治疗儿童肺炎支原体肺炎的疗效显著,具有借鉴意义.     

骨髓间充质干细胞和自然杀伤细胞的归巢及相互作用

骨髓间充质干细胞是来源于发育早期中胚层的一类多能干细胞.具有自我更新、高度增殖和多分化潜能的特点,在促进造血干细胞有效植入、移植后造血重建以及组织修复等方面发挥着重要作用.自然杀伤细胞是不同于T、B淋巴细胞而具有直接杀伤靶细胞效应的一类淋巴细胞.具有抗肿瘤、抗感染和免疫调节等功能.这两种细胞的合理有效应用均需其准确到达体内的特定部位后才能充分发挥作用.研究表明趋化因子及其受体与这两种细胞的迁移和定向募集有很大关系.而且两种细胞在体内亦相互影响.本文将对此进行综述,为细胞治疗和组织工程应用提供理论依据.