Peroxiredoxin Ⅲ在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化

目的:探讨Peroxiredoxin Ⅲ(PrxⅢ)在大鼠超负荷心肌肥厚过程中的表达变化.方法:雄性SD大鼠随机分为假手术对照组和模型组,模型组大鼠实施腹主动脉缩窄术,制备压力超负荷心肌肥厚模型.分别于术后24h, 2、 4、 6周,测定血液动力学变化;称量心体质量;光镜和电子显微镜观察左心室的组织变化; 提取左心室RNA, RT-PCR分析PrxⅢ的表达变化.结果:术后24h两组大鼠的血液动力学和心肌形态无明显变化.术后2、 4、 6周时,模型组大鼠的SBP、 DBP、 LVSP、 LVED及左心室体质量指数逐渐增加,心肌纤维逐渐增粗,线粒体逐渐增多, 肌节增长.术后24h PrxⅢ的表达稍有降低,但无统计学意义,2周时则明显降低,4周有所上升但仍低于对照,6周时明显上升且高于对照组.结论:PrxⅢ mRNA表达呈现先降低后增高的趋势,即在心肌肥厚中早期表达降低,而在心肌肥厚形成后表达明显升高,表明PrxⅢ参与了超负荷心肌肥厚的发生.     

Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白基因多态性与高血压的相关性研究

目的探讨Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白(AT1 receptor-associated protein,ARAP1)基因的常见多态rs2787594,rs11795066,rs13298677和rs4837129与高血压之间的关联关系。方法选择503例高血压病例和490例年龄、性别相匹配的健康对照。所有个体均为中国北方汉族人。采用多聚酶链式反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法进行基因型鉴定。结果校正协变量前后,所有SNPs均与高血压无关联。单体型分析也没有发现与高血压关联的单体型。应用线性回归模型校正年龄和性别的作用,比较不同基因型个体的体重指数(BMI)、血糖和血脂水平的差异。rs2787594多态CC纯合子与升高的血糖水平显著关联(CC/TT+TC,6.09+0.24vs.5.54+0.08mmol/L,P=0.0296)。在显性模型中,rs11795066 A等位基因显著升高了个体的BMI水平(GA+AA/GG,24.81±0.29vs.24.07±0.19kg/m2,P=0.0331)。rs13298677多态G等位基因与较低的BMI水平(GG/GA+AA,22.84±0.74vs.24.37±0.16kg/m2,P=0.0438)以及TG水平(GG+GA/AA,1.34±0.06vs.1.50±0.05mmol/L,P=0.0413)显著关联。结论 ARAP1基因4个SNPs与高血压无显著关联,但与对照个体的血脂、血糖和BMI关联,该基因变异可能影响了我国人群血脂、血糖的代谢。     

CAPN1O基因变异与中国北方汉族人群血脂水平的关联研究

目的 探讨CAPN10基因变异与中国北方汉族人群血脂水平的关系.方法 研究选择427例2型糖尿病合并高血压个体以及547例年龄、性别相匹配的正常对照.所有个体均为中国北方汉族人,均未服用调脂药物.应用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性的方法对CAPN10基因的SNP-44、43、19、63多态进行基因型鉴定.结果应用线性回归模型校正年龄、性别和体重指数的作用,比较不同基因型和双体型个体的血脂水平差异.在病例组中,甘油三酯(TG)水平在SNP-63CC纯合子个体和T等位基因携带者中有边缘性差异(P=0.05).在对照组中,SNP-19多态11纯合子个体的TG水平高于等位基因2的携带者,但未达到统计学显著性(P=0.06),而SNP-63 T等位基因亦有增高对照个体的TG水平的倾向,但在加性、显性和隐性模型中均未达到统计学显著性(P值分别为0.07,0.07和0.06).在病例组和对照组中6种常见双体型个体的血脂水平均无统计学差异.结论 CAPN10基因多态可能不是我国北方汉族人群血脂异常的主要危险因素.     

心肌特异表达基因p93在四种心血管疾病中血清水平的差异及其意义

目的研究心肌特异表达的新激酶基因p93在冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)、扩张性心肌病(DCM)、先天性心脏病(CHD)和风湿性心脏病(RHD)中的作用。方法以杂交瘤技术制备p93单克隆抗体;应用酶联免疫吸附测定(ELISA)直接法检测正常人与上述4种疾病患者血清中p93的表达状况及血清浓度的差异。结果成功制备了人p93单克隆抗体,效价达1:100 000;正常人及CAD、DCM、CHD、RHD患者血清中均有p93的表达;正常人血清水平对数值为2．32±0．19;4种疾病患者的p93血清水平(对数值分别为2．46±0．22,2．47±0．20,2．58±0．26,2．49±0．19)均高于正常人(P<0．05)。其中CHD组明显高于正常对照组及CAD组(P<0．05)。结论p93基因与这4种疾病均有密切关系,以CHD尤为突出。推测该基因可能在上述各疾病的发生、发展过程中起着重要作用,但其机制亟待进一步探讨。     

CAPN10基因变异与中国北方汉族人群血脂水平的关联研究

目的探讨CAPN10基因变异与中国北方汉族人群血脂水平的关系。方法研究选择427例2型糖尿病合并高血压个体以及547例年龄、性别相匹配的正常对照。所有个体均为中国北方汉族人,均未服用调脂药物。应用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性的方法对CAPN10基因的SNP-44、43、19、63多态进行基因型鉴定。结果应用线性回归模型校正年龄、性别和体重指数的作用,比较不同基因型和双体型个体的血脂水平差异。在病例组中,甘油三酯（TG）水平在SNP-63 CC纯合子个体和T等位基因携带者中有边缘性差异（P=0.05）。在对照组中,SNP-19多态11纯合子个体的TG水平高于等位基因2的携带者,但未达到统计学显著性（P=0.06）,而SNP-63 T等位基因亦有增高对照个体的TG水平的倾向,但在加性、显性和隐性模型中均未达到统计学显著性（P值分别为0.07,0.07和0.06）。在病例组和对照组中6种常见双体型个体的血脂水平均无统计学差异。结论CAPN10基因多态可能不是我国北方汉族人群血脂异常的主要危险因素。     

环状RNA circTCF25在冠心病患者中的表达及临床意义

目的探讨环状RNA在冠心病(CAD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达水平及临床意义。方法采用real-time PCR法检测CAD病例组和对照组PBMCs中circ TCF25、hsa_circ_005075和hsa_circ_1569的表达水平,利用Spearman相关分析探究circ TCF25与CAD危险因素及传统标志物的相关性,利用多元logistic回归分析及受试者操作特征分析(ROC)方法评估circ TCF25作为CAD生物标志物的可能性。应用低氧、TNF-α和IL-1β分别刺激人脐静脉内皮细胞24小时,检测circ TCF25的表达变化。结果与对照组相比,CAD患者中circ TCF25的表达水平显著降低(P0.001),两组间hsa_circ_005075和hsa_circ_001569的表达水平无显著差异。circ TCF25的表达水平与空腹血糖、肌酸激酶和Gensini评分呈负相关(P0.05)。circ TCF25的表达水平每增加一个单位,CAD发病风险降低45%(调整后OR值:0.55,95%CI:0.39-0.77,P0.001)。circ TCF25的ROC曲线下面积为0.62(95%CI:0.57-0.67,P0.001)。在低氧、TNF-α和IL-1β刺激内皮细胞24小时后,circ TCF25的表达水平均显著下降。结论 CAD患者PBMCs中circ TCF25表达水平显著下调,circ TCF25可能作为CAD潜在的生物标志物。     

血红素加氧酶1基因多态性与血压水平的关系分析

目的 探讨血红素加氧酶1基因多态性与血压水平的关系.方法 采用标签SNP策略,选择血红素加氧酶1基因的3个标签SNP位点进行研究.在503例原发性高血压患者中对这3个位点进行基因分型,采用方差分析比较各位点不同基因型个体血压水平的差异,采用haplo.stats软件计算单体型频率并检验其与血压水平的关系.结果 血红素加氧酶1基因rs2071749位点A等位基因携带者收缩压和舒张压水平分别为159.5 mm Hg和97.6 mm Hg,GG基因型携带者收缩压和舒张压水平分别为168.5mm Hg和101.3mm Hg,差异有统计学意义(P<0.05).多因素回归分析进一步证实了该结果 .单体型分析结果 显示在调整年龄、性别、体质指数、吸烟和饮酒等危险因素后,含有rs2071749 A等位基因的单体型T-T-A与收缩压水平和舒张压水平均显著相关.结论 血红素加氧酶1基因多态可能对血压水平有一定的影响.     

大鼠颈动脉球囊损伤模型的竞争性内源RNA调控网络研究

目的构建大鼠颈动脉球囊损伤模型的竞争性内源RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)调控网络,筛选血管新生内膜形成中的关键调控基因。方法首先建立大鼠颈动脉球囊损伤模型。将12只SD大鼠随机分为2组(每组6只):手术组,利用2F取栓球囊于左颈总动脉行球囊损伤术;假手术组:夹闭左颈总动脉,使血流阻断时间接近球囊损伤术操作时间。术后14 d取颈总动脉血管组织,提取总RNA,进行长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)和信使mRNA(messenger RNA,mRNA)测序。应用生物信息学方法进行差异表达lncRNA和mRNA共表达分析、基因功能(Gene Ontology,GO)和信号通路(Pathway)分析;通过数据库预测微小RNA(microRNA,miRNA)与lncRNA及mRNA的结合关系,并从中筛选已报道在大鼠血管内膜增生过程中有生物学功能的miRNA相关的结合关系,得到最终的ceRNA网络。结果与假手术组相比,手术组鉴定出1731个差异表达的mRNAs和99个差异表达的lncRNAs;GO和Pathway分析显示,差异表达的mRNA主要参与调节免疫反应、细胞迁移、细胞黏附等。ceRNA分析构建了由46个mRNAs、18个lncRNAs和16个miRNAs组成的ceRNA网络,其中AABR07073245.1、Col6a3、AABR07071659.2和AABR07067310.2所介导的ceRNA调控轴可能在大鼠血管新生内膜形成中具有重要调控作用。结论本研究系统分析大鼠颈动脉球囊损伤模型表达谱,构建的ceRNA调控网络可能在大鼠血管内膜增生过程中具有重要调控作用,有望为动脉粥样硬化的防治提供新的靶点与分子标志物。     

小鼠高脂血症模型的竞争性内源RNA调控网络研究

目的基于高通量测序数据,探讨小鼠高脂血症模型中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)的表达特征及竞争性内源RNA(competitive endogenous RNA,ceRNA)调控网络,筛选lncRNA介导的参与血脂异常发生发展的关键调控通路。方法应用正常饮食和高脂饮食分别诱导ApoE-/-小鼠12周,建立高脂血症模型;进行肝脏全转录组测序,筛选差异表达的lncRNAs、微小RNAs(microRNAs,miRNAs)和信使RNAs(messenger RNAs,mRNAs);对差异表达的mRNAs进行基因功能(Gene Ontology,GO)分析和信号通路(KEGG)注释;结合并分析lncRNA-mRNA共表达关系、miRNA-mRNA靶向关系、lncRNA-miRNA共表达和靶向关系,构建lncRNA介导的ceRNA网络并筛选关键ceRNA调控轴。结果高脂血症小鼠肝脏全转录组测序筛选出117个差异表达lncRNAs、53个差异表达miRNAs和1689个差异表达mRNAs;差异表达的mRNAs主要参与脂质代谢过程、脂肪酸代谢过程和类固醇代谢过程等生物学功能,涉及PPAR信号通路和不饱和脂肪酸合成等途径;构建的ceRNA调控网络包括16个lncRNAs节点、18个miRNAs节点和33个mRNAs节点,其中lnc-Dubr介导的ceRNA调控轴可能对血脂异常具有重要调控作用。结论成功绘制出高脂血症小鼠肝脏lncRNA介导的ceRNA调控网络,并筛选出具有潜在生物学作用的ceRNA调控轴,有望为高脂血症及其他心血管疾病的发生发展和治疗提供新的线索和思路。     

中国人端粒逆转录酶(TERT)基因多态与高血压的关联关系

目的高血压等心血管疾病可能与端粒长度和端粒酶活性相关。本研究在中国汉族人群中探索TERT基因启动子区域单核苷酸多态性与高血压的关联关系。方法在1317名高血压患者和1269名经地区、性别和年龄匹配的健康对照样本中对TERT基因启动子区2个多态位点rs2736109和rs2735940采用PCR-RFLP方法进行基因型鉴定。结果 rs2736109和rs2735940的基因型分布在高血压病例和对照中差异均无显著性(rs2736109:P=0.794;rs2735940:P=0.390)。单体型分析显示在调整其他环境因素后单体型AC携带者发生高血压的危险性比GC携带者显著降低(OR=0.79,95%CI0.78-0.80,P<0.0001)。结论本研究结果提示TERT基因启动子区rs2736109和rs2735940多态位点构成的AC单体型的携带者患高血压的风险相对较低,不易患高血压。该研究结果还需在前瞻性队列研究中证实。