无张力疝修补术42例体会

我院于2002年1月-2004年1月，引进应用美国强生公司产品聚丙烯网片行无张力疝修补术42例，效果满意，现报告如下。     

人F1F0-ATP合成酶β亚基的原核表达、纯化及抗体制备

目的: 原核表达、纯化人F1F0-ATP合成酶β亚基(hATP5B)并制备其多克隆抗体.方法: 以人脐带静脉内皮细胞 (HUVEC) 总RNA为模板, 通过RT-PCR扩增hATP5B 成熟肽编码序列, 克隆入原核表达载体pET28a( ), 转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)并诱导表达, 表达产物用Ni2 螯合层析纯化, 纯化产物用透析复性, 产物用SDS-PAGE和 Western blot进行鉴定.复性产物免疫家兔, 制备多克隆抗体; 多抗的效价用间接ELISA法检测, 并用Western blot和细胞免疫荧光分析多抗的特异性和抗原结合性.结果: 测序证实获得hATP5B成熟肽编码序列.SDS-PAGE鉴定表明, 表达、纯化、复性产物的相对分子质量(Mr)均约55 000, 与理论值相符.灰度扫描分析重组hATP5B(recombinant hATP5B, rhATP5B)的表达量占菌体蛋白总量的36.8%, 纯化产物纯度达98.3%, 复性产物纯度达99.2%.Western blot反应阳性.多抗的平均抗体效价为1∶640 000, 可特异识别HUVEC中的天然抗原.结论: 原核表达的hATP5B具有良好的免疫原性, 其免疫家兔后获得的多抗具有高效价和特异性.hATP5B的原核高效表达和其抗体制备为进一步研究hATP5B的功能奠定了实验基础.     

抗人F1-F0 ATP合成酶beta亚基单抗的制备及其抗肿瘤活性研究

目的：制备鼠抗人F1-F0ATP合成酶beta亚基（hATP5B）单抗,并对其特异性和抗肿瘤活性进行研究。方法：以原核表达人hATP5B免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,筛选分泌抗hATP5B单抗的杂交瘤细胞株。采用Protein A亲和层析法纯化抗体腹水,SDS-PAGE检测纯化产物纯度。利用Western blot、细胞免疫荧光对其特异性进行鉴定,并通过抑制乳腺癌细胞MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr表面ATP生成,细胞毒性实验进行抗肿瘤活性研究。结果：获得一株稳定表达抗hATP5B单抗的杂交瘤细胞株Mab3B8,Western blot和细胞免疫荧光结果表明,该抗体与乳腺癌MCF-7及其耐药细胞MCF-7/Adr细胞天然抗原结合；可明显抑制MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞膜表面ATP合成；与化疗药物多柔比星（曾用名：阿霉素）联合作用,可降低化疗药物多柔比星对肿瘤细胞的IC50。结论：成功建立了一株可特异性识别天然hATP5B的单抗,有阻断肿瘤细胞膜表面ATP合成活性并可明显增强MCF-7及其耐药株MCF-7/Adr细胞对多柔比星敏感性的作用。此项研究对膜表达F1-F0ATP合成酶功能探讨及肿瘤治疗研究都具有重要意义。     

聚丙烯网片无张力疝修补术的体会(附100例报告)

腹股沟疝修补手术经历了100多年的漫长的历史，但手术复发率仍居高不下，特别是老年疝修补术，一直是困惑外科医师的技术难题。自20世纪90年代我国引进无张力疝修补术以来，疝修补则发生了里程碑性变化，无张力疝修补术已成为现代疝外科的金标准。我们在2001-01～2005-02行无张力疝修补手术100例，现报告如下。     

腹腔镜阑尾切除术与传统术式临床比较

目的 探讨腹腔镜阑尾切除术的优缺点及临床应用价值。方法 2002-03-2003-05随机对腹腔镜阑尾切除术和开腹阑尾切除术各50例阑尾炎进行比较。结果 在各种类型阑尾炎中,腹腔镜阑尾切除术在胃肠功能恢复时间、住院时间方面均较开腹阑尾切除术短(P<0.001),而手术时间均比开腹阑尾切除术长(P<0.001);在切口感染及术后应用止痛药方面,腹腔镜阑尾切除术较开腹手术具有明显优越性。结论腹腔镜阑尾切除术具有创伤小、恢复快、住院时间短及切口感染率低等优点,逐渐成为阑尾切除的首选手术方法。     

六个以上器官功能障碍的临床救治

目的：探讨多器官功能障碍综合征(MODS)临床综合治疗的重要性。方法：3例患中，1例为腹腔大血管损伤后MODS，2例为重症急性胰腺炎后MODS：2例有七个器官功能障碍，1例有六个器官功能障碍。3例机械通气时间分别为：16d、62d、12d。1例血液透析19天。结果：3例均顺利脱离呼吸机，分别于64d、129d、92d痊愈出院。随访时间为1-7．8年，患各受损器官功能正常。结论：笔认为机械通气是挽救生命的重要环节；血液透析是治疗肾衰的主要手段；营养支持是挽救生命的根本措施；联合应用抗生素是控制感染的法宝；个体化治疗是解决矛盾的有效方法。     

机械通气在抢救外科危重病患者中的应用策略

目的探讨机械通气在抢救外科危重病患者中的应用策略。方法对10例外科危重病患者在出现呼吸危象的情况下,建立人工气道,应用呼吸机辅助呼吸。结果10例患者中,脱离呼吸机9例;痊愈6例,死亡3例,植物人1例,最长通气时间152d。结论对外科危重病患者及早行机械通气是治疗呼吸衰竭最有效和迅速的方法。小潮气量通气、把握呼吸机撤离的时机、维持水电酸碱平衡、加强营养支持、控制感染是减少并发症、提高抢救成功率的关键。     

选择性肝动脉栓塞治疗肝破裂并发胆道出血1例

患者，男，35岁。因车祸致胸腹伤18d，问歇性呕血、便血7d。于2003—02—10入院。患者伤后曾在当地县医院诊断为外伤性肝破裂(闭合性)，给予保守治疗。7d前出现胆绞痛，黄染，呕血600ml，便血1200ml，头晕，心慌，因病情加重转入我院。入院体温37．6℃．脉搏110次／min．血压90／60mmHg(1mmHg=0．133kPa)。贫血貌，右上腹压痛，反跳痛，肌紧张，肠鸣音弱。血红蛋白53g／L，谷丙转氨酶129U／L，白蛋白27．4g／L，胆红素34．6μmol／L。CT和B超示肝破裂，胆道积血。     

腹腔镜食管裂孔修补和胃底折术治疗食管裂孔疝

目的探讨用腹腔镜食管裂孔疝修补术和胃底折术治疗食管裂孔疝的临床效果。方法回顾1999-08～2005-06治疗23例的临床资料。结果本组患者全部获得手术成功,仅一例发生纵隔气肿。术后随访0.5～5年,临床症状完全消失,无一例疝复发。结论腹腔镜食管裂孔疝修补和胃底折术具有创伤小、痛苦少、住院时间短等优点,是当今治疗食管裂孔疝手术的金标准。     

脾大部切除后胸腔残脾形态和功能的远期疗效评价

目的评价门静脉高压症巨脾大部切除后胸腔残脾的形态与功能。方法门静脉高压症巨脾行脾大部切除40例,采用外周血细胞计数,免疫指标检测,99mTc同位素扫描,DSA造影及CT扫描进行评价。结果外周血细胞计数术后明显改善,血清Tuftsin和IgM水平无变化,残脾形态和吞噬功能正常,残脾显像良好,脾肺间形成侧支循环。结论胸腔残脾可长期存活,脾吞噬功能和免疫功能正常。门静脉高压症巨脾保脾术比脾外伤更有临床意义。