BL21(DE3)/PET-28作为人IL-6表达系统的研究

ＢＬ２１（ＤＥ３）／ＰＥＴ┐２８作为人ＩＬ┐６表达系统的研究（中国协和医科大学基础医学院细胞生物研究室，北京１００００５；＊第三军医大学西南医院皮肤科，重庆６３００３８狄凯军＊向明明刘世广章静波）白细胞介素－６（ＩＬ－６）是一种多功能的细胞因子，具有...     

紫杉醇对HeLa细胞生长影响的研究

紫杉醇（ｔａｘｏｌ）是一种从太平洋属短叶紫杉茎皮中提取而得的抗癌新药。近年来经临床前化学和药理研究，已通过临床试用并上市。紫杉醇对多种癌症治疗有效，特别是对卵巢癌和乳腺癌有明显的疗效。一些报道显示，紫杉醇对乳腺癌，卵巢癌细胞有生长抑制和杀伤作用，并可...     

粉防己碱诱导人红白血病细胞凋亡的研究

目的　探讨粉防己碱诱导人红白血病细胞 (K56 2 )凋亡的作用。　方法　采用光镜、电镜、免疫荧光观察K56 2 细胞形态的改变 ,以流式细胞仪分析细胞周期 ,以ABC法检测细胞中Bcl 2和p5 3蛋白的改变 ,以TUNEL法检测细胞凋亡。　结果　K56 2 细胞经粉防己碱诱导 4 8h后 ,出现细胞凋亡早期形态学改变 ;流式细胞仪显示细胞DNA合成受到抑制 ;ABC法检测出细胞中Bcl 2水平降低和p5 3水平升高 ;TUNEL法原位检测揭示有DNA断裂。结论　粉防己碱可抑制K56 2 细胞的生长 ,其作用与浓度相关 ,最终可导致细胞凋亡     

大肠杆菌菌株(λ衍生噬菌体)/PBR322衍生质粒作为人IL-6表达系统的研究

为探索人白细胞介素－６（ＩＬ－６）在原核细胞中高效表达的途径，选用ＢＬ２１（ＤＥ３）／ＰＥＴ－２８作为表达系统，以聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术扩增了ｈＩＬ－６的互补ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）的编码区，引入了ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ位点。用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切后，克隆于ＰＥＴ－２８载体的相应位点，转化ＤＨ５α。选出阳性克隆，经ＤＮＡ序列分析，表明其编码区内无非特异突变。将重组质粒转入ＤＨ５α，筛选阳性克隆，用异丙基硫代－β－Ｄ－半乳糖苷（ＩＰＴＧ）进行诱导表达。全细菌裂解液进行十二烷基黄酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），结合固化蛋白质的免疫学测定（Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ）杂交进行分析。结果表明：Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ杂交发现有与抗ＩＬ－６特异结合的蛋白带，以４ｈ的产量最多，激光扫描显示ＩＬ－６的吸收峰占总吸收面积的３７％（４ｈ诱导）。分子量约为２７ｋＤ。实验显示，人ＩＬ－６在原核细胞中实现了高效表达，表达产物具有ＩＬ－６的免疫活性     

大肠杆菌菌株（λ衍生噬菌体）／PBR322衍生质粒作为人IL—6表 …

为探索人白细胞介素－６在原核细胞中高效表达的途径，选用ＢＬ２１／ＰＥＴ－２８作为表达系统，以聚质反应技术扩增了ｈＩＬ－６的经补ＤＮＡ的编码区，引入了ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ位点。用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ酶切后，克隆于ＰＥＴ－２８载体的相应位点，转化ＤＨ５α。选出必克隆，经ＤＮＡ序列分析，表明其编码区内无非特异突变。将重组质粒转子ＤＨ５α，筛选阳性克隆，用异基硫代β－Ｄ－半乳糖苷进行诱导表     

被动吸烟受害不浅

1997年12月26日,美国联邦疾病控制与预防中心在《发病率和死亡率周报》报道,截止1995年统     

淫羊藿苷与HMBA衍生物单独及联合作用对K562细胞生长的影响及机制研究

目的 探讨淫羊藿苷与HMBA衍生物单独及联合作用对K562细胞生长的影响及机制。方法 采用光镜、电镜观察K562细胞形态的改变,免疫荧光检测细胞凋亡的情况。结果 淫羊藿苷与HMBA衍生物单独作用,均可明显抑制K562细胞的生长,且具有协同作用。淫羊藿苷诱导48h后,细胞开始出现显著的形态学改变并表现出某些凋亡的特征,72h后更为明显。HMBA衍生物亦可改变细胞的形态,但主要表现在形状更加不规则、线粒体肿胀,而没有明显的分化或凋亡迹象。结论 淫羊藿苷与HMBA衍生物单独及联合作用均可抑制K562细胞的生长,但联合应用时作用更强,其作用与浓度相关。淫羊藿苷有部分地诱导细胞凋亡的作用。     

新型HMBA衍生物对红白血病细胞诱导分化作用研究

目的：寻找新的、更有效、低毒的六亚甲基双乙酰胺（HMBA）衍生物,方法：以人红白血病细胞（K562）、小鼠红白血病细胞）MEL）及其亚株MEL DS19为靶细胞,筛选并比较新合成的HMBA衍生物－HMBPA[N,N‘六亚甲基双（3吡啶）酰胺]与1,6－乙二胺四乙酸钴（Co-HDTA)的诱导分化活性。结果：MEL DS19细胞株对HMBA最敏感,联苯胺染色阳性率（B^ 可达76％。Co-HDTA有一定的抑制细胞增殖作用及微弱的诱导分化活性（B^ 2%-4.5%),有效浓度为0．5mmol/L,HMBPA在0．02－5μmmol/L的浓度范围内也有较低的诱导活性（B^ 3%-8%),低浓度HMBPA与HMBA（2mmol/L）联合应用,则可明显提高诱导分化活性（B^ 72%）其诱导活性与5mmol/LHMBA及1．6％DMSO接近。结论HMBAP与Co-hdta对MEL细胞具有诱导分化活性,HMBPA与HMBA有协同诱导分化作用。