HPV_(16)E7-HSP_(70)融合表达质粒的构建及鉴定

采用分子克隆技术 ,首先将 HSP70 基因片段克隆到真核表达载体 pc DNA3 .1ˉ上 ,获得 pc DNA-HSP重组质粒 ,然后采用 PCR扩增技术 ,定点突变编码 HPV1 6 E7蛋白 C末端锌指结构的基因序列 ,将该突变的 E7基因插入 pc DNA-HSP重组质粒 ,通过粘端连接的方式构建 pcd-HPV1 6 E7-HSP70 融合表达质粒 ,最后通过限制性内切酶酶切、PCR和 DNA测序等技术鉴定。结果显示 ,重组融合表达质粒经酶切、PCR和 DNA测序证明其突变位点、碱基及阅读框架均准确无误。     

不同类型冠心病患者凝血纤溶指标的变化及意义

冠状动脉内血栓形成是导致急性冠状动脉事件发生的主要原因。冠心病（CHD）患者常有凝血、纤溶反应异常，而不同类型的CHD凝血和纤溶指标的变化并不相同。本文采用纤维蛋白原（Fib）、D-二聚体（DD）、凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血酶原时间（APTT）等检测指标，对107例不同类型CHD患者上述指标的变化进行比较并分析其临床意义。     

肝炎患者血清中瘦素测定的临床价值探讨

探讨不同病毒性肝炎患者血清中瘦素水平的改变及临床价值.采用竞争ELISA法分析检测162例不同类型的病毒性肝炎患者及78例正常健康人血清中瘦素,动态观察并进行分析、比较.162例各类型肝炎患者的血清中瘦素均值为（15.66±3.16）ng/L,正常对照值为（6.46±3.18）ng/L,两者相比差异有统计学意义（P＜0.01）,而各型病毒肝炎患者中的血清瘦素浓度随着病情程度的逐步恶化而升高.选择42例病毒性肝炎患者进行血清瘦素动态观察,发现治疗前后有统计学意义（P＜0.01）.血清中瘦素的测定,有可能作为病毒性肝炎患者转归程度判断的一个指标.     

fMRI盲信号分离中的时间和空随独立成分分析法的时空特性比较

目的采用空间独立成分分析法（sICA）和时间独立成分分析法（tICA）对功能磁共振成像（fMRI）信号进行分离,比较信号间的时空特性对2种独立成分分析方法性能的影响。方法模拟fMRI数据,并将2组独立的信号以及它们的线性混合信号叠加到空间独立的区域,分别利用Infomax、Combi、FBSS和ICA—EMB4种算法实现sICA和tICA,并对模拟数据中的3组信号进行提取和分离。结果sICA只能分离空间独立且时间高度独立的信号,无法分离空间相关、时间独立的信号;tICA不仅能够准确分离空间和时间高度独立信号,而且能够准确分离空间高度相关、时间独立的信号,并将时间相关信号整体提取;FBSS和ICA—EMB2种算法较Infomax和Combi性能稳定。结论空间或时间独立性假设违背到一定程度时,sICA和tICA对信号分离的结果存在差异。应根据需要选择适合的sICA或者tICA方法对fMRI数据进行处理。     

人BLCAP基因单核苷酸多态性与宫颈癌的相关性

人膀胱癌相关蛋白 (BLCAP)基因是本研究室从细胞原癌、抑癌基因分类芯片中筛选并克隆的宫颈癌候选抑癌基因。为检测该基因调控区的单核苷酸多态性 (SNP)及其不同基因型与宫颈癌的相关性 ,采用病例 对照研究方法及动态等位基因杂交 (DASH)技术 ,对 30例原发性宫颈癌患者和 6 0例正常人BLCAP基因调控区的 2个SNP位点进行了检测。结果显示 :位于BLCAP基因下游调控区的SNPrs3795 14 7位点存在AA、AC和CC 3种基因型 ,且与宫颈癌发病存在显著相关性 (P <0 0 1)。SNPrs3795 14 7处在BLCAP基因下游调控区域 ,其多态类型可能在某种程度上影响BLCAP基因的表达调控 ,从而进一步支持了 :BLCAP基因与宫颈癌的发生、发展可能存在密切关系。     

卵巢癌患者血清VEGF、CA125水平的变化及意义

目的:观察卵巢癌患者血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)与肿瘤标志物CA125水平变化及临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)与微粒子酶免分析技术(MEI A),检测31例卵巢良性肿瘤和64例卵巢癌患者及44例健康女性血清VEGF与CA125的含量,并对26例卵巢癌患者术后VEGF和CA125进行随访监测。结果:卵巢癌患者血清VEGF与CA125水平明显高于良性卵巢肿瘤及正常对照组(P<0.01),晚期(Ⅲ~Ⅳ期)卵巢癌患者显著高于早期(Ⅰ~Ⅱ期)(P<0.01)。26例卵巢癌患者术后血清中VEGF、CA125水平明显降低(P<0.01)。结论:VEGF、CA125与卵巢癌的发生及发展有密切关系,检测其水平变化对判断卵巢癌的恶性程度及预后,提高临床诊断水平有重要价值。     

HPV16嵌合型疫苗的构建及其免疫效应初探

目的 构建以碳末端锌指结构突变的E7基因为基础，融合HSP70的嵌合型DNA疫苗，检测其诱导的特异性T淋巴细胞增殖活性，初步评价此疫苗对HPV相关肿瘤的治疗作用。方法 利用PCR法定点突变E7基因碳末端的锌指结构，以其为基础融合热休克蛋白70，克隆入pcDNA．3．1-质粒构建嵌合型DNA疫苗。DNA测序，确认E7基因突变位点及DNA疫苗阅读框架。用脂质体法将pcd—E7-HSP转染A549细胞，经G418筛选后，提取RNA，RT—PCR检测E7基因表达。DNA疫苗免疫C57BL6小鼠。取其脾细胞与E7蛋白在体外共同培育，MTT法检测T淋巴细胞增殖活性。结果 E7基因突变位点及阅读框架均正确，E7基因可检测到表达。疫苗免疫后C57BL/6小鼠脾细胞增殖活跃。结论：E7基因锌指结构的突变及融合HSP70能够诱导特异性的细胞免疫应答。     

冠心病患者血浆脑钠肽与C反应蛋白水平变化

冠心病（CHD）是一种常见的心血管疾病，随着人们生活水平的不断提高，其发病率呈明显的上升趋势，由于其发病率、死亡率高，严重危害着人类的身体健康。急性心肌梗塞（AMI）和不稳定性心绞痛（UAP）是冠心病的主要类型，其病理基础为冠状动脉粥样硬化。动脉硬化斑块破裂及血栓形成是AMI和UAP发生的直接原因。在血栓形成研究中，炎症反应受到广泛重视。近年来的研究表明脑钠肽（BNP）和高敏C反应蛋白（CRP）在AMI、UAP的发病过程中可能是导致局部炎症反应和血栓形成的重要因素。为探讨其在CHD发病机制中的作用，我们对46例CHD患者血浆中的BNP和高敏CRP水平变化进行了检测分析。     

原发性高血压患者血浆脑钠肽水平变化及意义

目的:观察原发性高血压伴左室肥厚和舒张功能不全患者血浆B型脑钠肽(BNP)水平变化以及BNP浓度与高血压分级的相关性。方法:使用微粒子酶免疫分析方法检测94例不同级别原发性高血压患者血浆BNP浓度,分析有无左室肥厚及左室舒张功能不全各组之间的差异及其关系。结果:原发性高血压患者BNP浓度显著高于正常对照组(P<0.01);高血压伴左室肥厚、舒张功能不全患者的BNP浓度也显著高于单纯高血压患者(P<0.01);血浆BNP浓度与原发性高血压分级呈正相关。结论:原发性高血压,尤其是伴有左室肥厚和舒张功能不全患者BNP浓度升高。检测血浆BNP水平的变化及其与原发性高血压的相关性有重要临床意义。