原钙黏蛋白7对小鼠皮层神经元细胞凋亡的影响

目的探讨原钙黏蛋白7(protocadherin 7, Pcdh7)基因在促进小鼠皮层神经元细胞凋亡中的作用及可能机制。方法原代培养的C57BL/6小鼠皮层神经元细胞,随机分为空载组(转染空白质粒)、Pcdh7过表达组(转染Pcdh7过表达质粒)、Ca~(2+)通道阻滞组(转染Pcdh7过表达质粒及Ca~(2+)通道抑制剂西尼地平)。转染48 h,采用流式细胞仪检测3组神经元细胞内Ca~(2+)荧光强度,CCK-8法检测3组神经元细胞存活率,荧光探针法检测3组神经元细胞凋亡率。结果 Pcdh7过表达组神经元细胞内Ca~(2+)荧光强度[(30.57±4.34)MFI]高于空载组[(18.60±0.57)MFI]和Ca~(2+)通道阻滞组[(18.63±1.97)MFI](P0.05),空载组与Ca~(2+)通道阻滞组比较差异无统计学意义(P0.05);Pcdh7过表达组神经元细胞存活率吸光度值(0.64±0.04)低于空载组(1.01±0.03)和Ca~(2+)通道阻滞组(0.84±0.02)(P0.05),且Ca~(2+)通道阻滞组低于空载组(P0.05);Pcdh7过表达组神经元细胞凋亡率[(34.10±4.00)%]高于空载组[(13.56±2.48)%]和Ca~(2+)通道阻滞组[(13.98±3.00)%](P0.05),空载组与Ca~(2+)通道阻滞组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论过表达Pcdh7基因可诱导小鼠皮层神经元细胞凋亡,其机制可能与促进细胞内Ca~(2+)内流有关。     

新型材料3M Ketac Molar超硬玻璃离子与银汞合金充填后牙窝洞的对比

背景:近年来,传统的银汞合金充填修复的缺点已日益显现.寻找其替代产品是目前研究的热点,而新型材料3M Ketac Molar 超硬玻璃离子充填修复的报道尚不多见.目的:比较3M Ketac Molar超硬玻璃离子与银汞合金充填后牙窝洞的临床效果.设计、时间及地点:回顾性分析,对照观察,于2002-02/2006-04在南昌市第九医院口腔科完成.对象:选择南昌市第九医院口腔科门诊就诊的后牙龋病患者187例307颗牙,平均年龄45岁.方法:用3M Ketac Molar后牙超硬玻璃离子填162颗后牙窝洞,银汞合金充填145颗后牙窝洞,连续观察1,2年,评价其临床效果,以充填材料完好,边缘密合,无继发龋、无磨损者为治疗成功.主要观察指标:两种材料修复后牙窝洞1,2年临床疗效.结果:3M Ketac Molar后牙超硬玻璃离子和银汞合金充填1年复查,成功率分别为96.30%,91.03%;2年复查,成功率分别为91.36%,90.34%.两组疗效差异无显著性意义(P＞0.05).结论:3M Ketac Molar后牙超硬玻璃离子既能修复缺损牙面,而且改善美观,防龋,是替代银汞合金的较好材料.     

131例根管治疗术失败原因分析

目的：分析根管治疗失败的原因，以进一步提高根管治疗成功率。方法：回顾131例根管治疗失败病例，根据症状、体征和辅助检查分析治疗失败与充填程度的关系。结果；131例失败病例发生原因为：欠充87例，超充16例，遗漏根管18例，冠折、冠部充填物松动或脱落等10例。结论：根管治疗失败的主要原因是技术操作原因造成根管内的再次感染。认真仔细地进行操作，可以避免根管治疗失败。     

体外诱导Balb/C小鼠ES细胞定向分化为胰岛样细胞团的形态观察

目的 体外诱导Balb/C小鼠胚胎干细胞定向分化为胰岛样细胞团,观察细胞表面形态学的变化。方法 选用Balb/C小鼠ES细胞,经过拟胚体(EB)发育分化4d后开始定向诱导培养,不同时间段分别向细胞培养基中添加碱性成纤维细胞生长因子、胰岛素样生长因子-1和尼克酰胺和N等细胞生长因子,使ES细胞定向分化为胰岛样细胞团。免疫细胞化学检测表达胰岛素和胰高血糖素的阳性细胞。原子力显微镜(AFM)原位扫描阳性细胞团。结果 EB细胞生长为大小不一、境界清楚的细胞团,细胞团内细胞排列紧密。胰岛B细胞数量多,主要分布在细胞团的中央,边缘少,染色较淡。而表达胰高血糖素的A细胞主要分布在细胞团的边缘,数量相对较少。AFM扫描可见表达胰岛素的阳性细胞团,其表面有很多类似神经纤维的纤维束,连接成网络状。在细胞质中,还有很多类圆形的颗粒物质,其大小几乎一致,粒径都处于0.5~1.0 μm间。结论 诱导分化得到的细胞团不仅有形态和功能上的成熟,而且还具备良好的组织结构,为细胞的移植疗法提供了可靠的凭据。     

人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体的表达和生物学活性检测

目的探讨人神经营养素-3受体TrkC基因重组腺病毒载体（Adeno—TrkC）在神经干细胞内的表达及其对神经干细胞的生物活性作用。方法用RT-PCR检测Adeno—TrkC感染的293细胞的TrkCmRNA含量。用免疫细胞化学和Western blotting检测Adeno—TrkC感染的神经干细胞表达TrkC受体蛋白。在体外培养条件下,观察人神经营养素-3（NT-3）对感染了Adeno—TrkC的神经干细胞分化为神经元样细胞和星形胶质样细胞的影响。结果在Adeno—TrkC感染的293细胞和神经干细胞中检测到TrkCmRNA和TrkC受体蛋白,且表达产物和其配体NT-3结合后能使体外培养的神经干细胞更多地分化为神经元样细胞,分化率达到55．2％,均高于其他对照组。结论Adeno-TrkC能在神经干细胞内表达TrkC受体蛋白．这种TrkC受体蛋白具有促进神经干细胞分化为神经元样细胞活性的作用,这为进一步应用NT-3和TrkC联合进行基因治疗中枢神经损伤研究奠定了基础。     

灵芝孢子在预防维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对Cdk4表达的影响

目的探讨预先服用灵芝孢子在降低维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对依赖细胞周期蛋白激酶4(cyclindependentproteinkinase4,Cdk4)表达的影响。方法于孕期小鼠E0d时给予灵芝孢子组的孕鼠胃饲灵芝孢子溶液,8g·kg-1·d-1。实验对照组的孕鼠胃饲等量溶剂。于E7.75d时,两组孕鼠一次性胃饲维甲酸,剂量为50mg/kg体重。正常对照组孕鼠胃饲等量灵芝孢子溶剂,但是在E7.75d时,仅给予维甲酸溶剂。空白对照组孕鼠常规饲养不作任何处理。在孕期E10.5d时取出4组孕鼠的胚胎,应用免疫荧光组织化学染色和Westernblot检测胚胎神经管神经上皮Cdk4表达情况。结果实验对照组孕鼠胚胎神经管神经上皮细胞Cdk4的表达明显降低,而灵芝孢子组胚胎表达Cdk4的强度明显高于实验对照组。正常对照组与空白对照组相比Cdk4的表达无统计学意义(P>0.05)。结论灵芝孢子可能是通过增强神经管神经上皮细胞表达Cdk4降低维甲酸诱导胚胎小鼠神经管畸形的发生。     

Vitapex糊剂根充根管的疗效观察

目的 比较Vitapex糊剂加牙胶尖、氧化锌丁香油糊剂加牙胶尖充填根管后反应和疗效.方法 将289个患牙随机分为Vitapex糊剂组和氧化锌糊剂组.两组在行常规根管治疗术基础上,分别采用Vitapex糊剂加牙胶尖和氧化锌丁香油糊剂加牙胶尖充填根管.观察术后1周内疼痛发生情况以及术后1年的疗效.结果 Vitapex糊剂组术后疼痛发生率较氧化锌糊剂组低,有显著性差异(P＜0.05);术后1年Vitapex糊剂组疗效高于氧化锌糊剂组,但无显著性差异(P＞0.05).结论 Vitapex糊剂加牙胶尖充填根管可以有效减少术后疼痛反应,与氧化锌糊剂加牙胶尖比较,远期疗效无明显差异.     

慢性乙型肝炎患者牙周病综合治疗疗效评价研究

目的研究伴慢性乙型肝炎、肝硬化患者牙周病综合治疗的疗效。方法对伴慢性活动性乙型肝炎、失代偿期肝硬化，肝功能损伤严重者，给予全身用药，辅以患牙局部对症处理；而对伴慢性迁延性乙型肝炎、代偿期肝硬化，肝功能损伤轻微者，给予患牙超声洁治，并局部用药。结果疗效均满意。尤其是患牙局部经超声洁治后，疗效明显优于未洁治者。两组有显著差异（P〈0．05）。结论规范的治疗及严格的实施感染控制措施，就能最大限度的降低传染的危险性，达到满意的疗效。     

过表达原钙黏蛋白7对小鼠皮层神经元突起的影响

目的探讨过表达原钙黏蛋白7(Pcdh7)基因对小鼠原代皮层神经元突起发育的影响。方法体外原代培养C57/B6小鼠胚胎18.5 d的大脑皮层神经元,随机分为空白对照组、实验对照组(空载组)和过表达原钙黏蛋白7基因组(过表达组)。运用免疫细胞化学术检测神经元突起的标记物β-Tubulin Ⅲ的表达来反映各组培养的神经元轴突的长度和初级树突分支数,同时,采用Western blot检测各组神经元Pcdh7及磷酸化丝切蛋白的表达水平。结果过表达Pcdh7基因后,其皮层神经元轴突长度[(247.4±99.38)μm]显著高于对照组和实验对照组[分别为(179.4±97.91)μm和(172.1±65.20)μm],差异有统计学意义(P0.01),但其初级树突分支数(2.74±1.302)却明显低于对照组和空载组(分别为3.726±0.890和3.793±1.196)(P0.01);而Western blot结果显示,当原代培养的神经元过表达Pcdh7基因时,与对照组相比,其磷酸化丝切蛋白的表达水平明显降低(P0.01)。结论在原代培养的小鼠皮层神经元中过表达Pcdh7基因,在致其神经元轴突过度生长的同时,并抑制其树突产生分支。其机制可能与下调磷酸化丝切蛋白的表达水平相关。     

灵芝孢子在降低维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对Cdk4表达的影响

目的 探讨灵芝孢子在降低维甲酸诱导胚胎小鼠发生神经管畸形过程中对依赖细胞周期蛋白激酶4(CDk4)表达的影响.方法 给予实验对照组和灵芝孢子组妊娠E7.75d的小鼠一次性胃饲维甲酸,造成这2组孕鼠的胚胎出现神经管畸形.然后,给予灵芝孢子组孕鼠胃饲灵芝孢子溶液.在孕期E10.5d时取出2组孕鼠的胚胎,应用免疫荧光组织化学染色和Western blotting检测胚胎神经管神经上皮依赖细胞周期蛋白激酶4(Cdk4)的表达情况.结果 在灵芝孢子组可以观察到形态正常的胚胎中,神经管的神经上皮细胞有Cdk4的表达,其表达水平与空白对照组及正常对照组相比较没有明显差异.在灵芝孢子组形态异常的胚胎中,其神经管的神经上皮细胞也有cdk4的表达,但其表达水平与空白对照组及正常对照组相比较是低的.结论 灵芝孢子可能是通过促进神经管神经上皮细胞上调Cdk4的表达来减轻维甲酸诱导的胚胎小鼠神经管畸形.