腹腔镜阑尾切除术临床观察

目的:探讨腹腔镜阑尾切除术(LA)治疗阑尾炎的效果以及总结经验。方法:回顾分析620例急慢性阑尾炎患者均行LA的临床资料,并进行总结分析。结果:620例阑尾炎患者中,613例行LA,3例行腹腔镜阑尾周围脓肿引流手术,其中有7例患者因异位阑尾根部穿孔伴盲肠水肿,LA不满意而转为开腹,所有患者均顺利完成手术。平均手术时间为(44.6±11.8)min,平均术中出血量(26.7±6.8)ml,平均术后使用抗生素时间(3.6±1.2)d;平均术后住院时间(3.2±0.9)d。术后6例患者出现伤口感染,发生率0.97%,均经换药后治愈。结论:腹腔镜阑尾切除术是一种安全、有效的阑尾切除手术,可以在临床上广泛推广和应用。     

靶向血管内皮生长因子基因的微小RNA真核表达载体的构建***

背景：有研究表明微小RNA及潜在靶基因在肝癌中起重要作用,但具体机制仍不清楚。 目的：构建靶向血管内皮生长因子基因微小RNA真核表达载体,评估其转染人肝癌细胞株HepG2后血管内皮生长因子基因的干扰效果。 方法：根据血管内皮生长因子序列设计合成4对微小RNA不同干扰片段,克隆到pcDNA6.2-GW/EmGFP-微小RNA真核表达载体上,测序分析鉴定插入序列的完整性;并将其转染至HepG-2细胞株中。采用实时荧光定量聚合酶链式反应分析血管内皮生长因子微小RNA干扰效果,蛋白印迹技术测定重组体对血管内皮生长因子基因蛋白表达情况。 结果与结论：构建的4组重组体插入片段的碱基序列完全正确,重组体能干扰肝癌细胞HepG2细胞血管内皮因子基因的表达,4组重组体基因的mRNA的表达水平和蛋白表达水平与阴性对照组相比明显降低(P < 0.05),其中血管内皮生长因子微小RNA-3表达水平最低,抑制率87%。结果证实,实验成功构建血管内皮生长因子微小RNA表达载体,在体外能有效抑制HepG2细胞血管内皮生长因子基因表达。关键词：血管内皮生长因子;微小RNA;肝癌;肝细胞;抑制;基因表达;组织工程 缩略语注释：VEGF: vascular endothelialcell growth factor,血管内皮生长因子 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.15.017     

microRNA-10b及靶基因HOXD10在肝癌细胞中的表达及侵袭能力的影响

目的  探讨microRNA-10b（miR-10b）及其靶基因同源异性盒基因HOXD10在肝癌细胞中的表达及转染miR-10b对肝癌细胞侵袭性能力的影响。方法  分析HOXD10基因在3种肝癌细胞株Huh7、HepG2、SMMC-7721中的基础表达量,筛选出HOXD10基础表达量高的HepG2作为后续研究对象。设计合成外源性miR-10b序列,用脂质体瞬时转染肝癌细胞株,设置miR-10b转染组、无关序列转染组（阴性对照组）和未处理组（对照组）。用RT-PCR及Western blot检测肝癌细胞转染miR-10b后HOXD10基因及蛋白表达量的变化,细胞侵袭实验研究转染miR-10b对肝癌细胞侵袭能力。结果  在基因水平和Western blot分析蛋白水平HOXD10基因表达量2-ΔΔCT分别是（1.24±0.23）、（1.00±0.02）,P >0.05差异无统计学意义。在蛋白分析HepG2细胞灰度计算值是值分别是653.492和1 968.742,蛋白水平表达降低。HOXD10基因在肝癌细胞株HepG2的表达量显著高于Huh7和SMMC-7721;miR-10b成功转染HepG2后,HOXD10基因表达水平与对照组比较无明显变化,但HOXD10蛋白表达量与对照组比较下降及侵袭性也增强。结论  miR-10b可能通过抑制靶基因HOXD10表达发挥作用,促进肝癌细胞的侵袭。

     

腹腔镜阑尾切除术临床观察

目的:探讨腹腔镜阑尾切除术(LA)治疗阑尾炎的效果以及总结经验。方法:回顾分析620例急慢性阑尾炎患者均行LA的临床资料,并进行总结分析。结果:620例阑尾炎患者中,613例行LA,3例行腹腔镜阑尾周围脓肿引流手术,其中有7例患者因异位阑尾根部穿孔伴盲肠水肿,LA不满意而转为开腹,所有患者均顺利完成手术。平均手术时间为(44.6±11.8)min,平均术中出血量(26.7±6.8)ml,平均术后使用抗生素时间(3.6±1.2)d;平均术后住院时间(3.2±0.9)d。术后6例患者出现伤口感染,发生率0.97%,均经换药后治愈。结论:腹腔镜阑尾切除术是一种安全、有效的阑尾切除手术,可以在临床上广泛推广和应用。     

靶向血管内皮生长因子基因的微小RNA真核表达载体的构建

背景:有研究表明微小RNA及潜在靶基因在肝癌中起重要作用,但具体机制仍不清楚。目的:构建靶向血管内皮生长因子基因微小RNA真核表达载体,评估其转染人肝癌细胞株HepG2后血管内皮生长因子基因的干扰效果。方法:根据血管内皮生长因子序列设计合成4对微小RNA不同干扰片段,克隆到pcDNA6.2-GW/EmGFP-微小RNA真核表达载体上,测序分析鉴定插入序列的完整性;并将其转染至HepG-2细胞株中。采用实时荧光定量聚合酶链式反应分析血管内皮生长因子微小RNA干扰效果,蛋白印迹技术测定重组体对血管内皮生长因子基因蛋白表达情况。结果与结论:构建的4组重组体插入片段的碱基序列完全正确,重组体能干扰肝癌细胞HepG2细胞血管内皮因子基因的表达,4组重组体基因的mRNA的表达水平和蛋白表达水平与阴性对照组相比明显降低(P<0.05),其中血管内皮生长因子微小RNA-3表达水平最低,抑制率87%。结果证实,实验成功构建血管内皮生长因子微小RNA表达载体,在体外能有效抑制HepG2细胞血管内皮生长因子基因表达。