体静脉回流和门静脉回流对自体胰腺移植术后移植物内分泌功能的影响

目的:探讨体静脉回流和门静脉回流对自体胰腺移植术后移植物内分泌功能的影响.方法:组1采用15只猪门静脉回流(PVD),组2为15只猪下腔静脉回流(SVD).移植物包括胰体和胰尾.猪的胰腺被全部切除.通过注射氯丁橡胶将胰管堵塞.在移植前1 wk及术后1 mo进行静脉糖耐量试验(IVGTT).监测血糖、胰岛素、C肽、胰高血糖素及胰腺多肽(PP)的变化.结果:术后1 mo的空腹血糖水平皆正常.PVD组术后检测空腹胰岛素水平较术前变化不明显,SVD组胰岛素水平出现显著的升高 (P＜0.05).PVD组C肽水平显著高于SVD组(P＜0.05).两组动物术后PP水平保持稳定并显著低于术前,且术后1 mo显示SVD组胰高血糖素水平在IVGTT中显著高于PVD组(P＜0.05).结论:胰腺的内分泌回流由门静脉改为体循环将导致胰腺内分泌功能的紊乱,不利于发挥维持血糖稳定的作用.     

活化T细胞核因子对组成性启动子SV40的调控作用

目的:利用双荧光素酶报告系统探讨活化T细胞核因子(NFAT)能否调控常见组成性启动子CMV,SV40和TK,为不同条件下选择合适双荧光报告系统内参提供依据。方法:用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ分别从质粒pCDNA3.1和pRL-TK中切下CMV和TK启动子,克隆至pGL3-basic载体中,构建成pCMV-Luc和pTK-Luc载体。将构建pCMV-Luc和pTK-Luc以及商品化的pGL3-control(SV40启动子驱动),分别与SV40(pBIND)和TK(pRL-TK)两种启动子驱动的两种内参质粒共转染入HEK293细胞;观察过表达组成性活化NFAT后相对荧光素酶活性读数的改变。结果:成功构建了pCMV-Luc和pTK-Luc质粒,荧光素酶活性检测发现,常见组成性启动子SV40启动子对过表达组成性活化的NFAT存在一定的反应。结论:T细胞活化过程中重要的转录因子NFAT能够调控SV40启动子活性;表明常见组成性启动子SV40并非真正、绝对的组成性不变。因此,在荧光素酶报告系统内参选择时需要充分考虑该问题,本研究为合理选择内参质粒提供了一个可行策略。