小鼠膜型抗衰老蛋白Klotho基因特异片段的克隆、原核表达及多克隆抗体制备

目的 克隆小鼠膜型抗衰老蛋白Klotho基因特异片段,制备小鼠Klotho多克隆抗体.方法 以小鼠基因组为模板进行PCR,克隆了小鼠膜型抗衰老蛋白Klotho基因外显子Ⅳ部分序列,经BamHⅠ和NheⅠ双酶切后定向克隆到质粒pET-GST中,构建原核表达质粒pET-GST-Klotho,转化大肠埃希菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达.以重组GST-Klotho融合蛋白免疫家兔, 制备Klotho多克隆抗体.结果 表达产物经SDS-PAGE检测表明,在大肠埃希菌中成功表达了GST-Klotho融合蛋白,GST-Klotho融合蛋白表达量占菌体总蛋白的15 %左右;另外通过ELISA法测得抗血清抗体效价约为1∶ 10 000,Western印迹分析验证了抗体特异性.结论 GST-Klotho融合蛋白的表达和Klotho多克隆抗体的制备为进一步研究Klotho蛋白在小鼠体内的表达模式以及相关抗衰老药物的研制奠定了基础.     

小儿化痰止咳颗粒辅治儿童急性支气管炎疗效观察

目的探讨小儿化痰止咳颗粒辅治儿童急性支气管炎疗效观察。方法选择我院儿科门诊确诊为儿童急性支气管炎240例,按就诊时间随机分为治疗组和对照组,对照组给予阿莫西林颗粒、氨溴索口服液等治疗;治疗组采用阿莫西林颗粒、小儿化痰止咳颗粒口服,≤1岁,1次1/2袋;2～5岁,1次1袋;6～10岁,1次1～2袋;1日3次。两组均治疗1周后评价疗效。结果治疗组与对照组治疗效果比较,差异有显著性(P<0.01),两组临床症状比较,除发热时间无显著差异外,咳止时间、及肺部啰音消失时间均较对照组明显缩短(P<0.01)。结论小儿化痰止咳颗粒辅治儿童急性支气管炎疗效确切,值得推广应用。     

小儿热速清糖浆治疗婴幼儿上呼吸道感染疗效观察

目的探讨小儿热速清糖浆治疗婴幼儿上呼吸道感染疗效。方法选择我院儿科门诊确诊为儿童上呼吸道感染160例,按就诊时间随机分为治疗组和对照组,对照组小儿伪麻美芬滴剂0～3个月0.4mL,4～11个月0.8mL,12～23个月1.2mL,24～36个月1.6mL。每4～6h可重复用药;治疗组小儿热速清糖浆口服,<1岁,1次2.5～5mL;1～3岁,1次5～10mL;1日3～4次。以3～5d为1疗程,治疗1疗程后较两组疗效。结果治疗组与对照组治疗效果比较,差异有显著性(P<0.01)。结论小儿热速清糖浆治疗婴幼儿上呼吸道感染疗效确切,值得推广应用。     

辅酶Q10-聚山梨酯80增溶胶束的制备与稳定性评价

目的:探索构建稳定的辅酶Q10(Co Q10)增溶胶束体系,解决Co Q10注射剂易沉淀的技术难题。方法:利用稳态荧光探针技术测定辅酶Q10-聚山梨酯80(Co Q10-Tween 80)增溶胶束的临界胶束浓度(CMC);通过对Co Q10/Tween 80比例、p H值、灭菌稳定性等因素进行处方和工艺优化,确定最优Co Q10-Tween 80增溶胶束体系;并以粒径、Zeta电位、PDI、CMC、Co Q10含量和有关物质为指标,对该体系在因素、加速和长期试验中的稳定性进行评价。结果:Co Q10-Tween 80增溶胶束稳定性与Tween 80浓度紧密相关;所得体系粒径为(21.92±4.15)nm、PDI值为(0.194±0.010)、包封率为99.29%、载药量为12.05%、CMC为2.18×10-4g·m L-1、有关物质为0.29%;该体系对高温和光照敏感,在加速和长期试验条件下稳定性良好,货架寿命期为24月。结论:基于胶束理论研究,建立了稳定的Co Q10增溶胶束体系,为改善难溶性药物制剂稳定性提供了有益思路。