CaMKIIδ在破骨细胞分化不同阶段表达规律的研究

目的:研究钙离子/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(Ca MKII)δ在破骨细胞分化不同阶段的表达规律,以揭示其在破骨细胞分化中的作用。方法:应用50μg/L核因子κB受体激活因子配体(RANKL)诱导小鼠RAW264.7细胞向破骨细胞分化;通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色及骨磨片吸收陷窝检测评价破骨细胞生成情况;同时于诱导第0、1、3、5天末通过免疫荧光细胞化学、RT-q PCR和Western blot法检测Ca MKIIδ的mRNA及蛋白表达水平。结果:TRAP染色及骨吸收陷窝检测显示于诱导第5天有多核破骨细胞生成。第0、1、3、5天Ca MKIIδ的mRNA表达水平分别为1.028±0.041、2.478±0.087、10.524±1.284和42.914±2.667,蛋白相对水平分别为0.762、0.963、1.802和3.136,免疫荧光细胞化学检测显示Ca MKIIδ的荧光6强度呈时间依赖性递增。结论:Ca MKIIδ的表达随破骨细胞分化逐步增高,提示Ca MKIIδ在破骨细胞分化中可能起着关键调控作用。     

唑来膦酸对破骨细胞分化中钙调蛋白､钙调磷酸酶表达的影响

目的:探讨唑来膦酸(zoledronate,ZOL)对破骨细胞分化中钙调蛋白(calmodulin)和钙调磷酸酶(calcineurin)基因表达的影响?方法:小鼠RAW264.7细胞分为A?B两组,均用100 ng/mL核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)诱导4 d;B组细胞在RANKL 诱导第2天加入1×10-6 mol/L ZOL处理48 h?RANKL 诱导4 d后收获细胞,检测破骨细胞生成及calmodulin?calcineurin基因表达情况?结果:B组多核破骨细胞数?吸收陷窝数目及面积分别为(8.8 ± 2.3)个?(6.7 ± 1.2)个和(997.1 ± 14.8)μm2,均显著低于A组的(19.7 ± 2.9)个?(13.3 ± 1.5)个和(1 676.9 ± 24.9) μm2(P < 0.01)?B组calmodulin mRNA及蛋白水平较A组分别降低了51.0%和78.7%(P < 0.05),calcineurin则分别下降了37.0%和69.5%(P < 0.01)?免疫荧光细胞化学显示,B组calmodulin?calcineurin的荧光强度较A组也明显下降?结论:ZOL可显著抑制破骨细胞生成,并下调破骨细胞分化中calmodulin和calcineurin的mRNA和蛋白水平,而calmodulin?calcineurin可能参与了ZOL对破骨细胞形成和功能的抑制?     

改良TPA矫治上颌第二磨牙正锁(牙合)的疗效观察

①目的 探讨改良TPA矫治第二磨牙正锁(牙合)的治疗效果及临床推广的可行性.②方法 选取伴上颌第二磨牙正锁(牙合)的各类错(牙合)畸形患者25例作为研究对象,制作改良TPA,每3~4周更换一次橡皮链加力,直至上下颌第二磨牙建立正常的覆(牙合)覆盖关系时停止使用.③结果 25例患者在固定矫治的同时利用改良TPA均在2.5~4.5个月内完成第二磨牙正锁(牙合)的矫治,后牙覆(牙合)覆盖关系达到正常.④结论 改良TPA是一种简单、有效的矫治上颌第二磨牙正锁(牙合)的口内装置,制作方法 简便,不要求患者自己配合.     

双膦酸盐对破骨细胞分化及抗酒石酸酸性磷酸酶的影响

背景：抗酒石酸酸性磷酸酶是破骨细胞分化及骨吸收功能的特异性标志酶,是破骨细胞分化成熟的标志。目的：观察双膦酸盐对破骨细胞分化及骨吸收功能相关因子抗酒石酸酸性磷酸酶的影响。方法：小鼠单核巨噬细胞RAW264.7诱导培养破骨细胞。实验分2组：对照组开始时加入质量浓度100μg/L核因子kB受体活化因子配体进行诱导至收获细胞,双膦酸盐组在对照组的基础上加入10-7 mol/L阿仑膦酸盐处理至收获细胞。培养第7天检测各组破骨细胞生成和骨吸收功能,免疫荧光检测两组抗酒石酸酸性磷酸酶表达的差异,Western blot检测抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白表达情况。结果与结论：各组细胞均有抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核破骨细胞生成,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝;但对照组抗酒石酸酸性磷酸酶阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及陷窝面积均大于双膦酸盐组（P〈0.01）。免疫荧光检测显示,对照组抗酒石酸酸性磷酸酶表达均强于双膦酸盐组（P〈0.01）。Western blot检测显示,双膦酸盐组抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白的表达低于对照组（P〈0.01）。说明双膦酸盐通过抑制抗酒石酸酸性磷酸酶蛋白的表达,阻碍破骨细胞分化生成及骨吸收功能。     

正畸联合不备牙贴面修复上颌过小侧切牙的临床观察

目的 通过分析正畸结束后不备牙贴面修复上颌过小侧切牙的美学效果及成功率,初步评价该修复形式的应用价值。方法 对20例错牙合畸形且伴有上颌双侧侧切牙过小患者先正畸治疗,再采用不进行牙体预备的玻璃陶瓷材料制作瓷贴面修复40颗过小侧切牙,应用3M树脂水门汀粘接。修复后患者采用视觉模拟评分法(visual analogue scales,VAS)评价美学效果满意度;同时,参照美国公共健康协会(USPHS)的修正标准,对修复后的效果进行评价。修复后6,12,24个月复查评价成功率。结果 修复后患者对修复体美学效果的满意度为9.3±0.3;40颗过小牙修复2年后除2颗出现修复体破损外均表现良好,修复后6,12,24个月成功率分别为100%(40/40),95%(38/40)和95%(38/40)。结论 正畸联合不备牙贴面修复上颌过小侧切牙能够取得良好的美学效果和满意的成功率,在严格掌握适应证的前提下,牙科美学治疗中可采用这种治疗方式。     

激光焊接新型钴铬合金的力学性能

背景：新型钴铬合金为一种不含镍和铍等有害成分的齿科合金材料,但关于其激光焊接的研究尚未见报道。目的：分析新型钴铬合金的激光焊接参数,优选激光焊接电压条件。方法：铸造0.5mm×6mm×30mm的新型钴铬合金试件60个,将试件分成6组。1组作为对照组;5组试件从中间断开,进行激光焊接,光斑直径设定为0.6mm,脉冲持续时间10ms,电压分别为220,250,280,310,340V,焊后进行拉伸强度测试,记录拉伸强度和延伸率。结果与结论：激光焊接新型钴铬合金拉伸强度随电压升高而增加。延伸率在电压低于280V时,随电压增大而增加;高于280V时,随电压增大而降低。电压为280V时,激光焊接新型钴铬合金的拉伸强度为（679.94±46.87）MPa,延伸率为（5.91±0.38）%。提示电压280V,脉冲持续时间10ms,光斑直径0.6mm条件下激光焊接新型钴铬合金的拉伸强度和延伸率均能满足临床要求。     

激光焊接新型钴铬合金的力学性能

背景:新型钴铬合金为一种不含镍和铍等有害成分的齿科合金材料,但关于其激光焊接的研究尚未见报道。目的:分析新型钴铬合金的激光焊接参数,优选激光焊接电压条件。方法:铸造0.5mm×6mm×30mm的新型钴铬合金试件60个,将试件分成6组。1组作为对照组;5组试件从中间断开,进行激光焊接,光斑直径设定为0.6mm,脉冲持续时间10ms,电压分别为220,250,280,310,340V,焊后进行拉伸强度测试,记录拉伸强度和延伸率。结果与结论:激光焊接新型钴铬合金拉伸强度随电压升高而增加。延伸率在电压低于280V时,随电压增大而增加;高于280V时,随电压增大而降低。电压为280V时,激光焊接新型钴铬合金的拉伸强度为(679.94±46.87)MPa,延伸率为(5.91±0.38)%。提示电压280V,脉冲持续时间10ms,光斑直径0.6mm条件下激光焊接新型钴铬合金的拉伸强度和延伸率均能满足临床要求。     

唑来膦酸对破骨细胞分化中钙调蛋白依赖性激酶Ⅱ和Ⅳ基因表达的影响

目的: 研究唑来膦酸(ZOL)对破骨细胞(OC)分化及信号分子钙调蛋白依赖性激酶 (CaMK)Ⅱ、Ⅳ基因表达的影响,阐明其作用机制。 方法: 应用小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7向破骨细胞分化。细胞分为对照组和ZOL组,用核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)诱导5 d,ZOL组同时加用ZOL处理2 d,第5天收集细胞后检测OC生成及CaMKⅡ、CaMKⅣ基因表达情况。 结果: ZOL组中多核OC数、骨吸收陷窝数和面积分别为33.0±1.0、46.0±3.5和(4 125.9±674.8)μm²,明显低于对照组的66.6±3.2、86.0±9.2和(9 418.3±1 260.8)μm²(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较,ZOL组细胞中CaMKⅡ和CaMKⅣ基因表达水平明显降低(P<0.05),CaMKⅡ mRNA和蛋白表达水平分别下降了39.3%和58.9％,CAMKⅣ mRNA和蛋白表达水平分别下降了51.7%和46.8％(P<0.01)。免疫荧光化学,与对照组比较,ZOL组细胞中CaMKⅡ、Ⅳ蛋白荧光强度明显下降(P<0.05或P<0.01)。 结论: ZOL在OC多核化阶段可以明显抑制OC的生成和骨吸收功能,并下调CaMKⅡ和CaMKⅣ基因表达。信号分子CaMKⅡ和CaMKⅣ可能参与了唑来膦酸对OC形成和功能的抑制作用,并在该过程中发挥重要的作用。     

人工牛黄中胆酸的测定

本文利用糠醛-硫酸比色法测定速效伤风胶囊中人工牛黄(Ⅰ)的胆酸含量。取10粒胶囊研细,将样粉(约含Ⅰ2mg)用氯仿提取。过滤,在80℃水浴上蒸去溶剂,冷却,加60%醋酸溶液溶解Ⅰ并稀释至25ml。将此溶液2.0ml及1%糠醛溶液(Ⅱ)1.0ml混合,冰浴上冷却5min,加入硫酸溶液并混匀。用分光光度法于605nm以空白对照测量吸收值。每粒中约含Ⅰ为5,10,15mg时回收率分别为93.56,94.39及97.62%;变异系数分别为0.13(n=3),1.2(n=6)及0.26%(n=3)。