15-F2t-isoprostane在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价异构前列腺素15-F2t-isoprostane在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康雄性SD大鼠32只,体重230 ～ 255 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=8):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、血栓烷A2(TXA2)受体拮抗剂SQ-29548组(SQ组)和二甲基亚砜组(DMSO组).采用阻断肠系膜上动脉60 min,再灌注120 min的方法制备肠缺血再灌注损伤模型.SQ组及DMSO组分别于夹闭肠系膜上动脉前30 min腹部皮下注射SQ-29548或二甲基亚砜2μmol/kg.于再灌注120 min时取肠段,观察肠粘膜形态学,并行Chiu评分,取肠粘膜组织,检测髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、乳酸(LD)含量;采集动脉血样,检测血清二胺氧化酶( DAO)活性及15-F2t-isoprostane、内皮素-1(ET-1)和血栓烷B2(TXB2)浓度.结果 与S组比较,其余各组Chiu评分、DAO活性、15-F2t-isoprostane及TXB2浓度均升高(P＜0.05),SQ组LD和MDA含量、MPO和SOD活性及ET-1浓度差异无统计学意义(P＞0.05);与I/R组比较,SQ组Chiu评分、LD含量、DAO和MPO活性及ET-1浓度降低,SOD活性升高(P＜0.05).结论 15-F2t-isoprostane可通过激活TXA2受体,增加ET-1生成及促进中性粒细胞在肠粘膜聚集参与大鼠肠缺血再灌注损伤过程.     

肠缺血再灌注对大鼠脑的影响

目的 评价肠缺血再灌注对大鼠脑的影响.方法 健康雄性成年SD大鼠64只,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=32):假手术组(S组)和肠缺血再灌注组(II/R组),采用Morris水迷宫实验测定认知功能,随后II/R组采用夹闭肠系膜上动脉90min后再灌注的方法制备肠缺血再灌注模型,S组仅分离肠系膜上动脉,不夹闭.于再灌注2、6、12、24 h时各组随机取8只大鼠,经心脏取血2ml后,取肠及脑组织,光镜下观察病理学结果,采用改良Chiu评分法评价肠粘膜损伤程度,采用ELISA法测定血浆TNF-α和IL-6浓度,采用TUNEL法检测皮层脑组织细胞凋亡情况;于再灌注24 h时采用Morris水迷宫实验测试认知功能.结果 S组大鼠肠及脑组织镜下结构未见异常,II/R组再灌注6 h后可见明显肠道和脑损伤.与S组比较,II/R组再灌注2、6、12和24 h时Chiu评分、血浆TNF-α及IL-6浓度升高,再灌注6、12和24 h时细胞凋亡数增加,再灌注24 h时大鼠潜伏期、游泳距离增加,穿越平台次数减少(P＜0.05或0.01),游泳速度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 肠缺血再灌注损伤可诱发大鼠脑损伤,引起认知功能减退,可能与炎性介质的释放及神经细胞凋亡有关.

Abstract：

Objective To investigate the effects of intestinal ischemia-reperfusion (I/R) on the brain in rats. Methods Sixty-four healthy male SD rats weighing 250-300 g were randomly allocated to one of 2 groups (n = 32 each): sham operation group (S) and intestinal I/R group (I/R). Intestinal I/R was produced by occlusion of superior mesenteric artery (SMA) for 90 min followed by reperfusion. Eight animals were sacrificed at each of the following time points: 2, 6, 12 and 24 h of reperfusion (T1-4) in each group. After a median sternotomyblood samples were taken from left ventricle for measurement of plasma TNF-α and IL-6 (by ELISA). Intestine and brain tissue was harvested for microscopic examination and detection of apoptosis ( by TUNEL). The cognitive function was tested using Morris water maze at 24 h. Results No abnormality was found in intestine and brain tissue in group S. Intestinal damage and neurodegeneration were detected in group I/R. Intestinal I/R significantly increased cerebral apoptosis in group I/R compared with group S. Plasma TNF-a and IL-6 concentrations were significantly higher at T1-4 in group I/R than in group S. The escape latency and swimming distance were significantly increased, while the number of crossing the platform was decreased in group I/R compared with group S. There was no significant difference in the swimming speed between the 2 groups. Conclusion Intestinal I/R can induce brain injury and lead to cognitive dysfunction. I/R-induced release of inflammatory mediators and neuronal apoptosis are involved in the underlying mechanism.     

人类代谢综合征的啮齿类动物模型中异氟烷和七氟烷的最低肺泡有效浓度测定

背景病态肥胖会影响麻醉药物的药动学和药效学，从而导致药物用量不当。我们推测，肥胖会显著改变异氟烷和七氟烷的最低肺泡有效浓度（minimumalveolarconcentration，MAC）。为验证该假设，我们通过人工筛选出的先天性低氧代谢能力大鼠（10waerobiccapacityruBners，LCR）和先天性高氧代谢能力大鼠（highaerobiccapacityrunners，HCR）来建立人类代谢综合征啮齿类动物模型。LCR大鼠肥胖，与人类代谢综合征具有相同的特征，且表现为运动耐力低下。相反，HCR大鼠有较高的运动耐力和良好的心血管功能及总体健康。方法雄性及雌性LCR（胛=10）和HCR大鼠（胛=10）行气管内插管，用异氟烷或七氟烷维持麻醉并机械通气。用定标法测定MAC值，用夹尾试验产生感觉刺激。在连续夹尾试验之前和之间有30分钟的麻醉平衡。LCR和HCR大鼠之间MAC值的比较使用两个参数检验（非配对样本t检验，unpariedttest）和非参数检验（Mann．Whineytest）的统计学方法。数据用均数±标准差（sD）和95％可信区间表示。P〈0．05为差异有统计学意义。结果LCR大鼠的异氟烷MAC值（1．52％±0．13％）与已报道的正常大鼠的异氟烷MAC值（1．51％±0．12％）相近。HCR大鼠的异氟烷MAC值（1．90％±0．19％）明显比LCR大鼠（1．52％±0．13％）的高（P=0．0001）。LCR组与HCR组之间的七氟烷MAC值差异没有统计学意义，且与之前报道的正常大鼠的七氟烷MAC值（2．4％±0．30％）相近。性别对异氟烷和七氟烷的MAC值均无影响。结论通过代谢综合征啮齿类动物模型测定的MAC值，发现肥胖及其并存疾病并不影响麻醉药物的需求量。相反，高有氧代谢能力需要更高的异氟烷MAC，这可能是导致低治疗剂量的一个危险因素。     

肠远程缺血预处理在心肌缺血/再灌注损伤中的研究进展

<正>近年来,利用机体自身抗损伤机制和耐受性从而提高机体自身保护能力的观点日益受到人们关注。自1986年Murry等[1]提出心肌缺血预     

JAK/STAT通路在大鼠肠缺血再灌注所致肠损伤中的作用

目的: 探讨Janus激酶/信号转导和转录激活子(JAK/STAT)通路在大鼠肠缺血再灌注(I/R)所致肠损伤中的作用。方法: 雄性健康SD大鼠40只,体重230~255 g,随机分为5组(n=8):假手术组(sham组),仅分离肠系膜上动脉(SMA)但不夹闭;肠缺血再灌注组(I/R组),采用阻断SMA 60 min后开放120 min的方法制备肠I/R损伤模型;AG490(JAK特异性抑制剂)组,于夹闭SMA前30 min在大鼠侧腹部皮下注射8 mg·kg^-1 AG490,余同I/R组;雷帕霉素(STAT特异性抑制剂)组(RPM组),于夹闭SMA前30 min在大鼠侧腹部皮下注射0.4 mg·kg^-1 RPM,余同I/R组;二甲基亚砜组(DMSO组),于夹闭SMA前30 min侧腹部皮下注射2 μmol·kg^-1 DMSO,余同I/R组,DMSO系AG490和RPM的溶剂。所有大鼠均于再灌注120 min后取小肠观察肠黏膜形态学变化并行Chiu's评分,同时取肠黏膜组织检测髓过氧化物酶(MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及丙二醛(MDA)和乳酸(LD)含量,采集动脉血检测血清二胺氧化酶(DAO)活性及15-F_2t-isoprostane、内皮素-1(ET-1)和血栓烷素B₂(TXB₂)浓度。TUNEL法检测肠上皮细胞凋亡情况并计算凋亡指数;采用Western blotting检测磷酸化的JAK2(p-JAK2)及STAT3(p-STAT3)的表达水平。结果: 与sham组比较,其余各组的Chiu's评分和肠黏膜细胞凋 亡指数均显著升高(P＜0.05);而I/R组和DMSO组的LD和MDA含量、DAO活性、MPO活性、15-F_2t-isoprostane浓度、ET-1浓度及TXB₂浓度均显著升高,p-JAK2及p-STAT3蛋白表达量也显著升高,SOD活性显著降低(P＜0.05)。与I/R组和DMSO组比较,AG490组和RPM组的DAO活性、MPO活性、肠黏膜上皮细胞凋亡指数、ET-1浓度、p-JAK2及p-STAT3蛋白表达均显著降低,SOD活性则显著升高(P＜0.05)。 结论: JAK/STAT信号通路的激活参与了肠I/R所致的肠损伤的发生,其作用与促进氧化应激损伤、中性粒细胞的聚集和肠黏膜细胞凋亡有关。     

远隔肢体缺血预处理对腹主动脉瘤手术病人肺损伤的影响

目的 评价远隔肢体缺血预处理对腹主动脉瘤手术病人肺损伤的影响.方法 择期行肾下型腹主动脉瘤切除人工血管置换术病人62例,性别不限,年龄54～72岁,体重指数21 ～ 36kg/m2,ASA分级Ⅱ或Ⅲ级.采用随机数字表法,将病人随机分为2组(n=31):对照组(C组)和远隔肢体缺血预处理组(RLIP组).RLIP组在麻醉诱导后手术前将左上肢用袖带加压至200 mm Hg 5 min后袖带放气5 min,重复2次.分别于气管插管后10 min(T0)、主动脉开放后30 min(T1)、术后4 b(T2)、8h(T3)、12 h(T4)、24 h(T5)时采集动脉和静脉的血样,进行动脉血气分析,计算肺泡-动脉血氧分压差(PA-aaO2)和呼吸指数(RI),并测定静脉血血清白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度、血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)浓度.分别于上述时点记录气道峰压(Ppeak)、气道平台压(Pplat)和呼气末正压(PEEP),以计算肺动态顺应性(Cs)和肺静态顺应性(Cd).记录术后低氧血症发生情况、拔除气管导管时间和ICU停留时间.结果 与C组比较,RLIP组PA-aO2、RI和血IL-6、TNF-α和MDA的浓度降低,Cs、Cd和血SOD活性升高,术后低氧血症发生率降低,ICU停留时间和拔除气管导管时间缩短(P＜0.05).结论 远隔肢体缺血预处理可减轻腹主动脉瘤手术病人肺损伤,其机制与抑制炎性反应及脂质过氧化反应有关.     

HMGB1在肠缺血再灌注小鼠肺损伤中的作用：与NETs的关系

目的评价高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在肠缺血再灌注小鼠肺损伤中的作用及其与中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的关系。方法 SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠24只,体重20～25 g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、IgY对照抗体组(IgY组)和Anti-HMGB1中和抗体组(Anti-HMGB1组)。采用夹闭肠系膜上动脉1 h后恢复灌注的方法制备小鼠肠缺血再灌注损伤模型。Anti-HMGB1组于缺血1 h后肠道血流恢复即刻腹腔注射Anti-HMGB1中和抗体1.0 mg/kg;IgY组于缺血1 h后肠道血流恢复即刻腹腔注射IgY同型对照抗体1.0 mg/kg。于再灌注4 h时处死小鼠,收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),测定总蛋白、游离双链DNA(dsDNA)及HMGB1的浓度;取肺组织HE染色后光镜下观察病理学结果,采用Western blot法测定瓜氨酸化组蛋白H3(Cit-H3)表达。结果与Sham组比较,I/R组和IgY组肺组织病理学损伤评分、BALF总蛋白、HMGB1和dsDNA浓度升高,Cit-H3表达上调(...