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目的观察人IL-15cDNA在腺癌细胞内的表达。方法将人IL-15cDNA于EcoRI、BamHI位点正向克隆到逆转录病毒载体pLXSN,构建pL-IL-15-SN的重组质粒。以Lipofectin介导将该重组质粒转染到人肺鳞癌细胞(PG细胞系)和小鼠肺腺癌细胞(LA795细胞系)。经G418条件培养筛选,获得阳性细胞克隆。再经CTLL-2细胞增殖法测阳性细胞IL-15的表达活性。结果获得3个PG细胞和4个LA795细胞阳性克隆,IL-15活性测定显示其表达水平在24h内分别在142~201或138~178U/(ml·106细胞)。结论IL-15cDNA转导的人和小鼠肺癌细胞可表达有生物学活性的IL-15。 相似文献
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转化生长因子β:参与结核病致病的免疫分子 总被引:1,自引:0,他引:1
转化生长因子 β(TGF β)不仅在结核病发展过程中产生过量而且在结核分支杆菌感染的活动性病灶部位表达。TGF β能够抑制T细胞的激活及其功能 ,其中包括一些重要的细胞因子如白细胞介素 2 (IL 2 )、γ干扰素 (IFN γ)等的产生。TGF β和其他细胞因子如肿瘤坏死因子α(TNF α)具有协同作用 ,可以形成具有结核病特征的组织破坏。TGF β过量产生引起结核病的免疫病理改变提示 ,TGF β的抑制剂可以作为活动性结核病感染过程抗结核化疗的辅助治疗。一、TGF β的免疫功能1.TGF β抑制T细胞的免疫应答 :TGF β抑… 相似文献
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人白细胞介素—15cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达 总被引:2,自引:0,他引:2
从正常人外周血中分离粘附的单核细胞,加入LPS刺激4h后提取细胞mRNA反转录获得cDNA第一链,用两对特异引物进行巢式PCR扩增出含BamHI酶切位点的编码人1L-15成熟蛋白的cDNA,其大小约360bp。用PEG法回收其片段并将其连接到pBSSK载体的SmaⅠ位点上进行序列分析,结果表明其序列与文献报道一致。然后再将其片段亚克隆插入到pGEX-2T的BamHI位点。筛选插入方向正确的克隆,转化大肠杆菌JM109,以1mmol/LIPTG诱导5h收集菌体直接进行SDS-PAGE,与阴性对照相比,MW44KD处多出一条带,紫外扫描显示此带占菌体蛋白总量的8.8%。WesternBlot证实此带能够特异地与兔抗人IL-15的抗体发生反应。证明RT-PCR所得的人IL-15cDNA在大肠杆菌中获得了表达,为进一步探讨人IL-15的生物学作用打下基础。 相似文献
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本研究构建了重组质粒pL-IL-15-SN,以Lipofectin脂质体介导将其分别转染到人肺鳞癌细胞(PC细胞系)、小鼠肺腺癌细胞(LA795细胞系),经G418筛选后获得阳性表达克隆,我们选用了两株高表达IL-15的细胞克隆——人PG1细胞(201 U/ml/10~6 cells/24小时)和小鼠LA795A(178 U/ml/l0~6cells/24小时)细胞作为研究对象进行体内外实验. 相似文献
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采用T_(739)近交系小鼠进行实验,发现小鼠LA_(795)肺腺癌实体瘤中的瘤浸润淋巴细胞(TIL)体外经白细胞介素2(IL_2)激活,具有明显的抗肿瘤作用。体外杀瘤活性用氚-胸腺嘧啶核苷( ̄3H-TdR)释放法测定表明:TIL的杀瘤活性明显高于自然杀伤细胞(LAK)。体内的抗肿瘤作用主要观察TIL抑制自发性肺转移作用。实验1静脉注射或瘤周注射TIL的自发性肺转移抑制率分别为73.5%,79.9%;实验2的结果与实验1相似,且TIL治疗组的自发性肺转移抑制作用强于LAK细胞治疗组3倍。 相似文献
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沈永泉 《中国医学科学院学报》1996,(3)
白细胞介素-15的研究进展(综述)沈永泉综述何维巴德年审阅(中国医学科学院,中国协和医科大学基础医学研究所,北京100005)在免疫细胞的发育成熟及免疫应答过程中,众多的细胞因子以协同或拮抗的方式相互影响和制约,形成一个网络,以网络作用方式进行调控。... 相似文献
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白细胞介素-15(IL-15)是一种新发现的细胞因子,其生物学性质与IL-2相似。IL-15的受体由IL-15Rα、IL-2Rβ、IL-2Rγ组成,其中IL-2Rγ是参与IL-15信号传递过程的必要成分。IL-15和IL-2的体内表达及受体分布存在差异预示着IL-15在体内具有独特的生物学作用。 相似文献
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