用尼龙毛法组分淋巴细胞

本文报道用尼龙毛法分离T和B淋巴细胞。讨论了血小板的去除以及用涤纶纤维代替尼龙毛,用 Hanks液代替 199培基的使用。结果表明,用本法分离 T、B淋巴细胞是一种简易、快速、纯度较好、得率高、基本上不损害细胞的方法。     

应用FITC-SPA菌体检测人外周血中SmIgG的B淋巴细胞

SPA具有与人IgG的Fc段结合的特性,将荧光素标记在含有SPA的金黄色葡萄球菌菌体上,直接和人的B淋巴细胞混和,FITC-SPA菌体能粘附在SmIgG+的细胞表面,便于计数。我们用该方法共检测正常人、SLE病人、PSS病人等67例的B淋巴细胞标本,同时用FITC-抗IgG作为对照组,两组在统计学上无显著差别(P>0.05)。     

人体脾脏组织中因子Ⅷ相关抗原定位的探讨——Ⅰ.间接免疫荧光测定法

本文介绍了石蜡与冰冻荧光切片的制备,石蜡切片的消化,间接免疫荧光染色的步骤,因子 Ⅷ R:Ag 在人脾组织中的定位,着重进行了胰蛋白酶消化石蜡切片的方法学探讨,并与常规石蜡、冰冻切片进行了比较。     

睾丸局部感染时Leydig细胞IL-1、IL-6、TGF-β和Fas、FasL转录水平的变化

目的：研究Leydig细胞在抗感染中的免疫调节作用。方法：以溶脲脲原体（UU）直接注入大鼠膀胱拟上行性感染的途径，制备大鼠睾丸感染的动物模型，分别在UU感染的1周、2周、3周处死大鼠，分离取得睾丸组织，观察组织的病理变化，并分离获得高纯度的Leydig细胞，抽提总RNA，用RT-PCR方法比较UU感染组与正常对照组之间IL-1、IL-6、TGF-β和Fas、FasL mRNA表达的差异。结果：与正常对照组相比，UU感染的大鼠睾丸组织发生明显的病理改变，IL-1、IL-6、TGF-β均升高，Fas表达下降、FasL表达升高。结论：大鼠Leydig细胞在抗感染免疫中，可通过改变IL-1、IL-6、TGF-β和Fas、FasL转录表达格局来发挥抗UU的免疫调节作用。     

三个中国汉族人纯合细胞DQA1基因启动子多态性的分子生物学研究

近年来国外发现参与Ⅱ类基因转录调控的启动子区也存在多态性，运用聚合酶链反应（ＰＣＲ）和末端终止法，对三个中国汉族人ＨＬＡ纯合细胞的ＤＱＡ１基因启动子区（ＱＡＰ）３１８ｂｐ的核苷酸（包括顺式作用元件Ｘ、Ｙ、Ｘ２和Ｗｂｏｘ）进行了扩增和测序，发现等位基因ＤＱＡ１＊０３０１１（纯合细胞ＳＭＹ２３Ａ）的ＱＡＰ结合和白种人的同一等位基因ＤＱＡ１＊０３０１１的ＱＡＰ不同，而与ＤＱＡ１＊０３０１２的ＱＡＰ结构相同，表明在ＤＱＡ１与ＱＡＰ之间可能发生了重组     

复方猪苓多糖对小鼠免疫功能的调节

目的 比较猪苓多糖单、方剂对机体的免疫调节作用,验证中药制剂增强机体免疫功能和拮抗肿瘤的正向调节作用。方法 本实验旨在观察猪苓多糖单、方剂对环磷酰胺免疫抑制效应的调节作用。通过检测小鼠淋巴细胞转化功能、ＮＫ细胞杀伤活性、Ｔ细胞亚群和ＩｇＧ水平等指标来比较。结果 复方猪苓多糖具有：（１）提高免疫功能低下小鼠Ｔ,Ｂ淋巴细胞转化能力;（２）增强免疫功能低下小鼠ＮＫ细胞杀伤肿瘤细胞的能力;（３）上调免疫功     

CD44基因拼接体、p53基因突变和染色体倍性与大肠癌转移之间关系的机理研究

目的:探讨大肠癌CD44v6表达、p53基因突变和染色体倍性与大肠癌转移之间的关系和作用机理.方法:流式细胞仪测定大肠癌细胞倍性及其在细胞周期各相中的分布;RT-PCR方法及特异探针D3对大肠癌细胞进行Southern Blot,并对杂交条带进行辉度扫描;银染PCR单链构象多态性(SSCP)技术检测大肠癌细胞p53基因突变.结果:正常对照、良性腺瘤、肿瘤未转移和肿瘤转移组其CD44v6阳性率和p53基因突变率呈逐渐上升趋势,CD44v6辉度扫描表明肿瘤未转移组(2 317.26±198.73)和转移组(10024.16±855.40)相比较,表达量有显著差异(P＜0.02);CD44v6阳性和阴性两组中G2M期细胞均值分别占6.24%和5.48%(P＞0.05),异倍体细胞分别为62.16%和60.00%(P＞0.5);而p53基因突变和未突变两组中G2M细胞占10.33%和4.01%(P＜0.05),异倍体细胞分别为85.20%和30.00%(P＜0.005);肿瘤异倍体细胞转移率显著高于二倍体细胞.结论:CD44v6的表达与转移高度相关,CD44v6和p53基因突变与肿瘤转移关系可能涉及不同的作用机理.CD44v6与p53基因突变相比较而言,CD44v6不失为一个更好的肿瘤转移标记.     

血管活性肠肽对leydig细胞分泌的IL-1、IL-6和TGF-β的影响

目的研究血管活性肠肽（VIP）对感染时的leydig细胞分泌的细胞因子IL-1、IL-6和TGF-β的影响。方法SD大鼠的睾丸经Ⅱ型胶原酶消化、过滤及Pereoll分离获得高纯度、高活率的leydig细胞,经不同剂量的VIP作用后,再感染溶脲脲原体（UU）,观察在UU感染时,不同剂量VIP对leydig细胞分泌的IL-1（MTT法）、IL-6、TGF-β（ELISA法）的影响。结果UU感染时,VIP对leydig细胞分泌的细胞因子有明显的影响：能促进leydig细胞分泌IL-1（活性）、抑制IL-6（含量）分泌;同时既能促进（高剂量VIP）又能抑制（低剂量VIP）TGF-β分泌。结论在UU感染时,VIP能改变大鼠leydig细胞细胞因子的分泌格局,表明VIP在抗感染免疫中具有一定的免疫调节作用。     

用猴的类DPB基因诱导的PCR指纹图对HLA-DP基因快速相容性测定

目的 将PCR指纹图用于个体间HLA－DP的基因水平交叉配型，确定供－受体间DPB基因的相容性。方法 引入猴的类DPB等位基因的扩增产物作通用性异源双链生成物（UHG），使原不有产生POCR指纹图的DPB基因扩增产物在非变性PAGE中显示特定的“卫星条带”，从而可用于供受体间HLA－DP基因的相容性测定。结果 11株和HLA纯合的B淋巴细胞系和随机个体进行PCR－DPB指纹图及交叉配型分析，能敏感地反映了个体间DP基因的差异，特别是在纯合子DPB＊0201和杂合子DPB＊0402／0501中初步发现了可能存在着未能被PCR－RFLP区分的新的亚型或新的等位基因，但是尚不能区分DPB＊0201和DPB＊0402两个等位基因，有待今后进一步探索。结论 初步表明该技术可有效判别供－受体DBP基因匹配性，并有简单、快速等优点。