小儿外感发热汗之无汗的证治

小儿外感发热无汗之证.有属太阳表实,亦有阳明病兼太阳表实者,均宜用汗法驱邪外出以解表退热,此乃常法。然临床上时有使用汗法而不见汗出的情况。遇此,必细加斟酌,切忌蛮加汗药之力强行发汗。因为这在小儿使用西药退热剂汗出过之后最为常见,且以营养不良,虚胖、缺钙等平素体虚的易感儿居多。《内经》云:“阴加于阳为之汗。”《温病条辨》云:“盖汗之为物,以阳气为运用,以阴精为材料,阴精有余,阳气不足则汗不能自出……”。阳     

小儿厌食证治

小儿厌食症,又名恶食。是指小儿食欲不振,或食欲减退而言。     

早期药物治疗慢性呼吸衰竭合并肺性脑病临床观察

目的 探讨早期使用药物治疗慢性呼吸衰竭合并肺性脑病患者的临床效果.方法 选取慢性呼吸衰竭合并肺性脑病患者86例,随机分为对照组和观察组各43例.对照组采用常规治疗模式,观察组在对照组的基础上早期使用盐酸纳洛酮;观察两组患者治疗效果及不良反应,并于治疗前、治疗后48 h,进行动脉血气分析和意识状态的观察.结果 对照组总有效率为69.77％,观察组为90.70％,两组差异显著(P＜0.05);观察组治疗后动脉氧分压显著升高,二氧化碳分压显著降低,与对照组和治疗前比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);两组患者治疗期间不良反应差异无统计学意义(P＞0.05).结论 早期使用盐酸纳洛酮治疗慢性呼吸衰竭合并肺性脑病,可以有效缓解患者呼吸衰竭症状.     

人PSCA真核表达载体的构建及表达

目的构建含有信号肽及FLAG标签的人前列腺干细胞抗原（PSCA）真核表达载体,并在人胚肾293T细胞中进行表达。方法通过PCR方法获得SIG-FLAG基因片段及人PSCA基因片段,插入到真核表达载体pIRES-neo中。构建的重组质粒pIRES-neo-sig-FLAG-PSCA转染293T细胞,利用流式细胞仪、免疫荧光及RT-PCR方法检测其表达情况。结果PCR扩增出的SIG-FLAG及PSCA基因测序正确,酶切鉴定证明重组质粒pIRES-neo-sig-FLAG-PSCA构建成功;检测结果显示重组质粒pIRES-neo-sig-FLAG-PSCA在293T细胞中得到表达。结论成功构建了重组质粒pIRES-neo-sig-FLAG-PSCA,且在293T细胞中能有效表达,为后续转人PSCA基因细胞系的构建工作奠定了基础。     

人白细胞介素12双亚基共表达pVAX1-IRES-hIL12载体的构建与表达

目的构建下游可以共表达人白细胞介素12（hIL12）双亚基的双顺反子真核表达载体pVAX1-IRES-hIL12。方法通过搭桥PCR获得人白细胞介素12P35及P40双亚基的融合基因P35-F2A-P40,插入DNA疫苗载体pVAX1-IRES的下游,瞬时转染293-T细胞,ELISA检测融合基因的表达。结果酶切鉴定和序列分析表明融合基因与设计完全一致,融合基因在体外细胞培养液检测中获得分泌表达。结论该载体的成功构建可以为肿瘤基因疫苗研制提供免疫增效载体。     

“治未病”新探

“治未病”新探江乐江苏省南通市中医院（２２６００１）《内经》提出＂治未病＂原则并将其奉为医工之最高境界，迄今已二千余年，虽备受中医同仁推崇，但对＂治未病＂的研究却无大的进展。纵观中医发展史，尽管医学论著汗牛充栋，竟无一本有关＂治未病＂的专著问世。探讨...     

人PSCA真核表达质粒的构建及稳定转染B16细胞系的建立

目的:构建真核表达质粒pcDNA3.1-PSCA,通过稳定转染建立高效表达人前列腺干细胞抗原(PSCA)的小鼠黑色素瘤B16细胞系。方法:利用PCR扩增出人PSCA全长基因的cDNA编码区序列,使用基因重组技术将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,得到重组表达质粒pcDNA3.1-PSCA。双酶切及测序鉴定后,利用脂质体法将其转染入小鼠黑色素瘤B16细胞,G418加压筛选后得到阳性克隆。通过流式细胞术、免疫荧光及Western blot检测PSCA在细胞系中的表达情况。结果:经测序及双酶切鉴定,pcDNA3.1-PSCA重组质粒构建正确;稳定转染人PSCA的B16细胞系表达率接近100%。结论:建立的稳定转染人PSCA的B16细胞系能够高效表达PSCA基因,为抗前列腺癌疫苗的功能研究奠定了基础。     

人源抗HBsAg dsFv抗体靶向干扰素重组质粒的构建与表达

目的构建抗体靶向干扰素的重组表达质粒pEE14.1-dsFvαpr+,并在真核细胞中验证重组质粒的表达情况。方法通过重叠延伸PCR将dsFv抗体重链基因与带正电荷的DNA负载区基因融合,并在抗体轻链α干扰素融合基因3′端连入6×His标签。先在过渡载体pCI-GPI中实现轻、重链复合基因的连接,然后连入pEE14.1中,最终构建重组表达质粒pEE14.1-dsFvαpr+。将重组质粒LipofectamineTM2000瞬时转染到CHO-K1细胞,采用RT-PCR、ELISA和Western blotting方法验证目的基因的表达。结果重组质粒经酶切鉴定和测序验证与设计完全一致。RT-PCR结果显示只有重组质粒转染后的细胞能够扩增出1700bp的目的条带,ELISA检测瞬时转染细胞上清α干扰素的浓度约为1.1ng/ml,Western blotting检测显示重组质粒在转染细胞上清中获得表达。结论实现了抗体靶向干扰素在单一质粒中的高效表达,通过对表达蛋白的电性改造有利于后期治疗慢性乙肝的抗体靶向纳米粒药物的研制。