嗜水气单胞菌灭活疫苗对银鲫的免疫效果研究

目的:利用本实验室制备的嗜水气单胞菌灭活疫苗免疫银鲫,研究疫苗的免疫保护效果。方法:将银鲫随机分为3组:注射组、浸泡组和对照组进行试验,二次免疫后,分别对银鲫组织和血液样品进行组织病理学、血液免疫学研究以及免疫保护率的测定。结果:血液指标检测显示,注射组、浸泡组各项血液指标发生显著改变,银鲫各项免疫指标显著提高;组织病理学显示,攻毒后,对照组的肝、肾、脾等重要组织已发生病变,而注射组和浸泡组无明显的变化;注射组、浸泡组和对照组的免疫保护率分别为90%、60%、0%。结论:嗜水气单胞菌灭活疫苗对银鲫的细菌性出血病具有显著的保护作用。     

左旋精氨酸对兔右冠状动脉缺血再灌注心律失常的影响

目的研究左旋精氨酸（L-Arg）对兔右冠脉缺血再灌注（IR）致心律失常的影响。方法建立兔右冠脉IR模型，将48只兔随机分为IRa组（缺血30min再灌120min）、IRb组（缺血90min再灌120min）、IRa＋L-Arg组、IRb＋L-Arg组，记录心电图，计算心律失常评分与时间依赖关系，分析L-Arg干预的效果。结果①缺血期：随缺血时间延长，各组心律失常分数逐渐增加，出现不同程度的房室传导阻滞（AVB）、窦性及房性心律失常。②再灌注期：AVB发生次数减少，窦性及房性心律失常逐渐恢复窦性心律；不同时段心律失常评分IRa组显著低于IRb组、IRa＋L-Arg组和IRb＋L-Arg组明显低于IRa和IRb组、IRa＋L-Arg组显著低于IRb十L-Arg组。结论补充L-Arg具有抗右冠脉缺血所致的心律失常作用，缺血时间越长，L-Arg抗再灌注心律失常作用越差。     

鸡胚培养及活体电转基因方法的建立

Objective To establish the methods of EM>in ovo/EM> and EM>ex ovo/EM> culture of chicken embryo as well as EM>in vivo/EM> electroporation. Methods Fertile eggs were incubated for two to three days（E2-E3）, and in ovo electroporation in spinal cord at E2-E3, and ex ovo electroporation in the tectum of brain at E5-E6 for spatial and temporal gene transformation with the parameter such as volt 18V, current 60mA, pause 90ms, and pulse 60ms for six times were carried out. Results The number of samples were 20 eggs for EM>in ovo/EM> culture and 10 eggs for EM>ex ovo/EM> culture. The survival rate of the embryos at E2-E3 was 85% for EM>in ovo/EM> culture and 80% for EM>ex ovo/EM> culture. The number of samples were 11 in spinal cord at E2-E3 ( in ovo electroporation) and 10 in brain tectum at E5-E6 ( ex ovo electroporation). The positive electroporation rate was 54.5% in spinal cord at E2-E3 (EM>in ovo/EM> ) and 60% in brain tectum at E5-E6 (EM>ex ovo/EM>). Conclusion The methods of in ovo and ex ovo culture of chicken embryos and in     

先天性肌性斜颈患儿胸锁乳突肌组织病理改变和整合素β1表达

目的 研究先天性肌性斜颈(CMT)患儿胸锁乳突肌的组织病理学改变及整合素β1的表达,探讨CMT的病变过程及整合素β1的作用机制及意义.方法 采用HE染色、Gomori银染观察45例CMT患儿胸锁乳突肌标本组织病理学改变,采用免疫组织化学方法检测其整合素β1表达,利用图像分析系统定量分析整合素β1表达量和分布特点.结果 1.光镜观察 HE染色标本显示胸锁乳突肌纤维化改变可以归纳为2类:A类改变表现为肌细胞萎缩变小,周围有大量结缔组织纤维增生,纤维排列紊乱,且伴许多血管和神经增生,最后肌细胞萎缩消失;B类肌细胞首先表现为肌原纤维结构消失(横纹或正常肌节结构消失),在纤维化改变前保持细胞轮廓,细胞膜完整,然后肌细胞原位发生纤维性病理改变,在纤维束之间有成纤维样细胞,细胞有较多突起.Gomori银染标本显示胸锁乳突肌主要改变以大量胶原纤维增生为主,A类胶原纤维排列紊乱,B类胶原纤维排列较整齐.2.免疫组织化学染色显示整合素β1在健康对照组表达为弱阳性(125.7±5.167).病变标本表达程度分3种,A类肌细胞质中表达呈强阳性(30.15±6.543),与正常组比较有显著性差异(P＜0.01);B类肌细胞表达呈阴性(177.15±13.45),与正常组比较有显著性差异(P＜0.01),另外一些肌细胞肌原纤维结构基本正常,表达呈弱阳性(114.6±17.23),与正常组比较无显著性差异(P＞0.05)).结论 胸锁乳突肌纤维化是一个复杂渐变过程,纤维化病理过程可能有不同方式发生,整合素β1可能参与疾病的发生过程.     

鸡胚活体原位电转基因技术报告基因绿色荧光蛋白质量评估

P>Objective The method of in vivo electroporation has been set up successfully and we further analyzed the effect of report gene green fluorescence protein(GFP) on the morphology of developing chicken embryos after in vivo electroporation, and also analyzed the expression of α-smooth muscle actin (α-SMA) and neurofilament during chicken embryonic development. Methods pCAGGS-GFP was transformed into chicken embryos with in ovo culture at 3days and ex ovo culture at 3-5days. In 24hours after in vivo electroporation, GFP-positive embryos were selected under stereo fluorescence microscope, and the GFP-negative embryos served as controls. Five embryos were analayzed for each group. Fluorescence immunohistochemistry was applied to analyze the expression ofα-SMA and neurofilament in chicken spinal cord and tectum. Results At different stages of chicken embryos and different time after in vivo electroporation, the expression of α-smooth muscle actin and neurofilament did not show difference in experimental group and wild type, as well as in GFP-positive area and GFP-negative area. The morphology of embryos was not changed after electroporation with pCAGGS-GFP either. BR>Conclusion GFP as a report gene to in vivo electroporation for chicken embryos does not affect the expression of α-smooth muscle actin and neurofilament, as well as no effect on the morphology of chicken embryos, so GFP     

ADAM23在小鼠脑组织的表达

目的:观察整合素-金属蛋白水解酶23(ADAM23)在成年小鼠脑组织的表达及分布。方法:RT-PCR克隆ADAM23全长序列,体外逆转录合成地高辛标记的RNA探针;原位杂交法检测ADAM23在脑各组织的表达。结果:ADAM23 mRNA在小鼠大脑皮层区、海马CA3区、小脑的浦肯野细胞层(Purkinje cell)区、舌下神经核区高表达;而小脑、下丘的中央核、小脑核侧部区等弱表达。结论:ADAM23在成年小鼠脑组织的广泛表达尤其中枢神经系统的高表达,预示着ADAM23在中枢神经系统内有重要作用。     

发育和成熟大鼠心室肌细胞中整合素β1的表达差异及其意义

目的:观察发育和成熟大鼠心室肌细胞中整合素β1表达部位和强度的增龄变化,探讨其生物学意义.方法:选择胎鼠(孕约19 d)、新生(9 d)、青年(8月)和老年(14月)SD大鼠各7只,用免疫组织化学显色观察心室肌细胞中整合素β1表达,并用计算机图像分析系统定量分析表达强度.结果:各组近心外膜肌细胞中,整合素β1主要表达于胞质内,胎鼠组表达强度与其他组比较具有统计学意义.深层心肌细胞中,胎鼠组主要表达于胞质内,其他组主要表达于胞核和胞膜上,表达强度与青年和老年组相比具有统计学意义.结论:大鼠心肌细胞发育和成熟过程中,近心外膜心室肌细胞整合素β1分布一致,而深层心室肌细胞整合素β1分布由细胞质转变为细胞核和细胞膜.     

大鼠心肌组织中网状纤维组织学构筑及增龄变化

目的 观察大鼠心肌组织发育过程中网状纤维的组织学构筑特点和增龄变化,为探讨心肌组织重构特点奠定基础. 方法 利用石蜡切片、Gomori银染,光镜下观察胎鼠(孕约19d)、新生(9d)、青年(8个月)、老年(14个月)SD大鼠心肌组织网状纤维的组织学构筑特点,Western blotting检测Ⅲ型胶原蛋白随年龄变化的表达差异.利用图像分析系统对心室肌组织内网状纤维进行定量分析. 结果 网状纤维分为粗、细纤维,围绕在心肌细胞周围.胎鼠心肌细胞周围网状纤维呈细小线状或缺如,新生鼠的心肌细胞周围网状纤维逐渐增多,形成连续的网状纤维膜,相邻肌细胞之间出现间隙,随年龄而增宽,网状纤维近平行分支填充于间隙内.网状纤维所占面积百分比随年龄增加发生改变.Ⅲ型胶原(网状纤维)表达量随年龄增加发生改变,新生鼠到青年鼠是急剧增加阶段.结论大鼠心肌组织中网状纤维构成肌细胞周围的粗、细纤维鞘成分,并发出分支充填于心肌细胞之间和心肌细胞与间质之问的间隙内,Ⅲ型胶原蛋白量随年龄的变化发生改变.     

水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对异硫氰酸-α-萘酯致小鼠肝损伤的保护作用

目的研究水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物(SPC)对异硫氰酸-α-萘酯(ANIT)致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法小鼠40只随机均分成4组:正常对照组、ANIT模型组、ANIT SPC低剂量(150 mg/kg)、ANIT SPC高剂量(300 mg/kg)组。前两组予0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)悬液灌胃,后两组分别予SPC(150、300 mg/kg)CMC-Na悬液灌胃,连续1周。末次予SPC 12 h后,正常对照组灌胃予花生油,余3组予ANIT 60 mg/kg(花生油配制),制成小鼠急性肝损伤模型,16 h(禁食不禁水12h)后摘眼球采血,分离血清,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、血清总胆红素(TB)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果予ANIT后,模型组小鼠血清ALT、AST、TB、MDA明显升高,SOD活性明显降低;SPC能明显对抗这种改变,SPC组(1503、00 mg/kg)与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论SPC对ANIT造成的急性肝损伤有明显的保护作用。