联合应用血管内皮生长因子及血小板衍生生长因子BB干预骨髓间充质干细胞的血管化及增殖能力

背景：组织工程骨为修复极限骨缺损提供了新的选择,但只有先形成完善的功能性血管网,保证稳定的成骨和骨整合,才能取得良好的治疗效果。因此,血管化可以说是组织工程骨面临的最大挑战与难题。 目的：探讨体外联合应用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和血小板衍生生长因子BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)对骨髓间充质干细胞增殖和成血管能力的影响。 方法：体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,分别用不同质量浓度VEGF(20,40,60,80,100,120 μg/L)、PDGF-BB(20,40,60,80,100,120 μg/L)联合干预以及100 μg/L VEGF单独干预、100 μg/L PDGF-BB单独干预,CCK-8实验检测2种细胞因子促进细胞增殖的最佳质量浓度,然后在第7天和第14天通过RT-PCR方法检测血管生成素1、缺氧诱导因子1α、肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子等相关成血管基因的表达量。 结果与结论：①加入生长因子后,细胞增殖能力明显提高,联合作用效果更优,最佳组合为80 μg/L VEGF+   80 μg/L PDGF-BB;②VEGF、PDGF-BB都可以促进血管生成素1、缺氧诱导因子1α、肝细胞生长因子和胰岛素样生长因子的mRNA表达,联合应用时效果最佳;③缺氧诱导因子1α、肝细胞生长因子 mRNA表达随时间延长有所升高,差异有显著性意义(P < 0.05);而血管生成素1、胰岛素样生长因子 mRNA表达量随时间延长有所降低,差异有显著性意义(P < 0.05);④体外实验结果证明,当VEGF和PDGF-BB质量浓度均为80 μg/L时,能够持续稳定促进整个血管形成过程,且促进作用优于单独一种生长因子。ORCID: 0000-0003-1918-579X(何惠宇) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

联合VEGF-165和PDGF-BB促进骨髓间充质干细胞血管化的体内研究

目的研究在血管生成早期联合应用血管内皮生长因子-165(VEGF-165)与血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)对血管新生的影响。方法选取40只雄性成年SD大鼠,随机分为4组,每组10只。实验组将生长因子加入骨髓干细胞膜片,培养24 h后回植入动物体内,包括VEGF-165组(V组)、PDGF-BB组(P组)、VEGF-165+PDGF-BB组(V+P组)。对照组不加生长因子仅回植细胞膜片。分别于植入后2周和4周回收标本,利用RT-PCR法检测成血管相关基因的表达水平及利用Image pro软件对HE染色后的组织切片进行血管的管腔面积及血管数量的计算,以此来评估VEGF-165和PDGF-BB对新血管形成的影响。结果术后2周和4周V组血管的管腔面积明显大于其他3组。P组、V+P组和对照组血管的管腔面积相似。V+P组血管数量明显多于对照组,而V组和P组血管数量仅稍高于对照组。术后2周及4周V+P组基因表达量较V组及P组更加明显地上调,对照组未见明显的表达上调。结论 VEGF-165与PDGF-BB联合作用于骨髓间充质干细胞存在协同作用,有效促进新血管的生成,有助于组织工程骨的血管化。