地塞米松体外短期处理影响Ⅰ型调节性T 细胞与自然调节性T 细胞平衡

目的:本研究拟通过地塞米松体外短期处理外周血淋巴细胞探讨地塞米松对调节性T 细胞包括自然调节性T 细胞(Natural regulatory T cell,Treg)和Ⅰ型调节性T 细胞(Type I regulatory T cell,Tr1) 的影响。方法:取健康人外周血淋巴细胞,分为地塞米松处理组和阴性对照组,处理3 d 后按多色分析法进行染色,用流式细胞仪检测并分析CD25、CD127、淋巴细胞活化因子3(Lymphocyte-activation 3,LAG-3)和叉头样转录因子3(Forkhead box P3,Foxp3)的表达及Treg 和Tr1 的频率变化。结果:相对于对照组,地塞米松处理3 d 后CD4+ T 细胞频率增加且呈剂量依赖性;CD4+ T 细胞上CD25 和Foxp3 的表达显著降低(P =0.006,P<0.000 1),而CD127 和LAG-3 表达显著升高(P<0.000 1、P =0.011);Treg 频率显著降低(P<0.001),而Tr1频率显著升高(P =0.051),且增加Tr1/ Treg 细胞比率(P =0.044)。结论:地塞米松体外短期处理上调Tr1 比率,下调Treg 比率,改变Tr1 与Treg 细胞平衡。     

LXRα通过下调IRF3、GRIP1负性调控Kupffer细胞中LPS诱导的炎症反应机制

目的 通过观察肝X受体α(LXRα)激动剂对脂多糖(LPS)刺激后Kupffer细胞干扰素调节因子3(IRF3)、糖皮质激素受体反应蛋白1(GRIP1)、LXRα表达的影响,探讨LXR α负性调控炎症反应的相关机制.方法 采用胶原酶原位灌注法分离和培养雄性KM小鼠肝脏中的Kupffer细胞,所得细胞在含20%小牛血清和1%青霉素/链霉素的1640培养基中培养.将分离的Kupffer细胞随机分为4组:空白对照组、TLR4配体激活剂LPS(1 μg/ml)组、LXRα配体激活剂T0901317(5 μg/ml)组、LPS和T0901317共同处理组.收集培养细胞,采用Western boltting法检测Kupffer细胞的LXRα、GRIP1及IRF3蛋白表达水平.ELISA检测Kupffer细胞培养上清液中干扰素(IFN)β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量.结果 LXR α蛋白质表达水平在T0901317处理组最高,LPS处理组最低.联合处理组中,LXRα表达明显低于T0901317处理组(P<0.05),但又显著高于其他两组(P<0.05).IRF3及GRIP1蛋白表达量在LPS组最高,联合处理组表达明显降低,两组间均有显著差异(P<0.05);在LPS组及联合处理组中,IRF3及GRIP1蛋白表达量均高于对照组及T0901317处理组(P<0.05).IFNβ在LPS处理组的含量较对照组和T0901317处理组明显增高(P<0.05);联合处理组IFNβ含量比LPS处理组明显降低(P<0.05);IFNβ表达T0901317处理组表达最低.TNF-α在LPS处理组的含量较其他3组明显增高(P<0.05);对照组、T0901317处理组和联合处理组水平较低,且他们3组之间无明显差别(P>0.05).IL-1β的表达趋势与TNF-α相同.结论 在应用LPS处理之前预防性应用LXRα激动剂,能明显抑制Kupffer细胞的IRF3及GRIP1表达.通过抑制IRF3、GRIP1的表达而发挥抗炎效应,从而抑制LPS所诱导的Kupffer细胞活化.     

肝脏右后静脉的研究进展及临床应用价值

<正>肝脏的静脉回流除了由3大主静脉引流外,还有一些静脉,往往被称为短肝静脉、肝背静脉等。肝右后静脉(inferior hepatic vein,IRHV)是其中较粗大的一只,主要引流Ⅵ肝段血流,在右肝切除、活体供肝移植及预防肝血管损伤中都有重要的临床意义[1-3]。然而临床医生并没有重视,常常忽视IRHV的存在,在手术中误伤、误扎该血管,导致术中大出血、延长住     

Kupffer细胞通过Toll样受体4信号通路调控组织因子及组织因子相关微粒表达诱导急性胰腺炎的发生

目的探讨Kupffer细胞(KCs)在受到脂多糖刺激时是否释放出组织因子膜微粒(TF-MP),判断Toll样受体4(TLR4)通路能否调控KCs表达组织因子(TF)诱导急性胰腺炎的发生。方法采用野生型C57/BL6小鼠(WT小鼠)和TLR4-/-小鼠建立急性胰腺炎模型后向腹腔内注射脂多糖10 mg/kg,分别于6、12、24 h处死两种小鼠各5只,观察胰腺组织病理损伤情况及其中TF表达情况,同时提取各小鼠KCs,检测KCs中的TF和TLR4的蛋白及m RNA表达量。剩余10只WT小鼠和10只TLR4~-/-小鼠用于观察生存情况。另外,提取WT小鼠和TLR4~-/-小鼠肝脏KCs,加入脂多糖300μg/L刺激,检测0、15、30、60、120 min时各时间点KCs中TF和TLR4的蛋白及m RNA表达量,同时测定其上清液中TF和TF-MP水平。结果 TLR4~-/-小鼠胰腺病理损伤程度较WT小鼠明显减轻,胰腺组织和肝脏组织中TF蛋白表达明显低于WT小鼠(P0.05)。建立急性胰腺炎模型后,TLR4-/-小鼠的生存率明显高于WT小鼠(P0.05)。无论是动物实验还是细胞实验,TLR4~-/-小鼠KCs中TLR4和TF m RNA及蛋白表达量均明显低于WT小鼠(P0.05);另外,TLR4~-/-小鼠KCs上清液中TF和TF-MP水平在30、60及120 min时均较WT小鼠明显降低(P0.05)。结论 KCs可能通过TLR4信号通路调控TF及TF-MP的表达而诱导急性胰腺炎的发生。     

地塞米松体外下调Eomes表达抑制1型辅助性T细胞功能

本文使用地塞米松处理健康人外周血单个核细胞(PBMCs)72 h后,探究其对CD4⁺T细胞及其亚群的频数、增殖、凋亡比例;功能性细胞因子及关键转录因子表达的影响。结果显示,地塞米松组CD4⁺T、2型辅助性T细胞(Th2)、Th17细胞比例增加(P<0.01,P<0.05,P<0.01),Th1细胞比例降低(P<0.01)。Th1细胞上γ-干扰素(IFN-γ)、颗粒酶B(GzmB)、脱中胚蛋白(Eomes)比例、Eomes与T盒转录因子(T-bet)比值均降低(均P<0.01),晚期凋亡细胞比例增加(P<0.05)。提示地塞米松体外处理PBMCs促进Th1细胞凋亡,改变辅助性T细胞亚群的分布,并通过抑制Th1细胞转录因子Eomes的表达进而抑制其功能。     

牛磺酸对重症急性胰腺炎大鼠枯否细胞p38MAPK信号转导通路的影响

目的 探讨牛磺酸对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠枯否细胞(KCs)P38MAPK的影响以及对分泌促炎细胞因子TNF-α和IL-1β的作用.方法 48只SD大鼠采用完全随机法分为假手术对照(SO)组、SAP组、SAP+Taut(牛磺酸)组.SAP模型通过胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导,造模前SAP+Taur组分别于24、12 h从尾静脉内注入牛磺酸(3 mmol/L,0.1 ml/100 g).假手术或造模后分别于12、24 h处死动物,检测其血清中AST、ALT、AMS含量;分离KCs,采用Western blot法检测P38MAPK活化情况,凝胶电泳迁移率法(EMSA)检测KCs中NF-κB DNA的表达,并用ELISA法检测KCs培养上清液中TNF-α和IL-1β蛋白含量.结果 SAP组大鼠血清中AST、ALT、AMS含量均较SO组明显升高(P<0.01);而SAP+Taur组血清中AST、ALT、AMS含量与SAP组比较,明显降低(P<0.05).SAP组各时间点大鼠KCs中p38MAPK活性显著高于SO组(P<0.01),而且NF-κB的表达也明显高于SO组(P<0.01),KCs培养上清液中TNF-α和IL-1β蛋白含量明显高于SO组(P<0.01),但SAP+Taut组大鼠KCs上述指标均显著低于SAP组.结论 牛磺酸可以抑制急性胰腺炎时KCs中p38MAPK的活化,减少NF-κB的表达,从而对促炎细胞因子TNF-α和IL-1β的分泌起抑制作用,可能具有临床应用前景.     

腹腔镜胆囊切除术的出血性并发症

目前腹腔镜手术已被广泛应用于多个临床学科,防治并发症成为衡量手术成功的重要标志之一。腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)的出血性并发症较常见,可能导致中转开腹、再次手术等,甚至死亡。本文现就LC出血性并发症的发病机理、分类及防治措施作一综述,以探讨避免出血性并发症的方法。     

肝尾状叶胆管结石治疗经验总结(附18例报告)

肝胆管结石是我国南方常见的肝胆疾病,但肝脏尾叶结石在临床发病率较低,且其位置特殊,术前常不易诊断,容易误诊,手术处理较为困难。我院自2006年1月至2009年11月共对225例肝内外胆管结石病人施行手术治疗。其中伴尾状叶胆管结石者18例,占8％。     

腹腔镜胆囊切除术胆管损伤的原因、处理及预防

本文针对2018年1月至2023年6月郴州市第一人民医院肝胆外科开展的4 800余例LC中26例的7种胆管损伤类型：迷走胆管胆漏、胆囊管残端漏、肝胆管侧壁伤、变异的右肝后叶胆管横断伤、左右肝管超低位汇合同时损伤、左肝管横断伤和肝总管及胆总管横断伤提出相应的术前准备，术中及术后处理流程，以及预防措施。我们认为通过反复的手术复盘、认真的学习、术中多角度观察，仔细辨认关键手术部位，结合术前及术中认真阅片，能够很好地处理LC术中及术后发生的胆管损伤及胆漏，并能够预防再次胆管损伤的发生。     

十二指肠乳头憩室275例的诊断与治疗

目的分析275例十二指肠乳头憩室病例,总结诊治经验。方法选取1981年1月到2011年1月行经内镜逆行性胰胆管造影（ERCP）检查诊断为十二指肠乳头憩室（JAD）并接受了治疗的患者275例。根据憩室与十二指肠乳头的位置,将所有JAD患者进行分类,并对其中114例（41．5％）患者进行了手术治疗。结果275例JAD患者被分为A型和B型,分别为174例（63.3％）和101例（36．7％）。在A型患者中44例（25.3％）因出现憩宣炎、出血、穿孔及胆道结石等并发症而最终接受手术治疗;B型患者中70例（69．3％）因出现上述严重并发症而接受手术治疗。结论ERCP是JAD的主要诊断方式。JAD可以根据憩室与十二指肠乳头的位置关系分为两种类型;有严重并发症的患者需要进行手术治疗,