7个非综合征型耳聋家系患者的mtDNA A1555G突变分析

目的探讨非综合征型耳聋家系患者mtDNA A1555G突变及其临床特征。方法应用聚合酶链反应、限制性核酸内切酶酶切和DNA测序技术对7个非综合征型耳聋家系112个成员的mtDNA A1555G突变进行检测，并分析听力临床资料。结果7个家系中所有受检的母系成员mtDNA A1555G突变均为阳性，突变性质含同质性和异质性二种；非母系成员及配偶该突变为阴性。突变的性质与临床表型的有关。结论mtDNA A1555G突变可导致非综合征型耳聋和氨基糖苷类抗生素致聋，其突变性质含均质性和异质性两种，且与临床表型相关。     

建立RT-ARMS-qPCR系统定量测定含A1555G突变的线粒体DNA拷贝数

目的建立RT-ARMS-qPCR（real time-amplification refractory mutation system-quantitative PCR）系统定量测定含线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）A1555G位点突变的片段的拷贝数,为阐明线粒体耳聋临床表型多样性的分子生物学基础奠定基础。方法根据ARMS的基本原理设计引物,在引物3’端插入错配碱基AC建立RT-ARMS-qPCR系统,优化定量PCR体系,并进行方法学评价。经PCR分别扩增相应突变型和野生型的片段,将其克隆到pGEM-T Easy载体上,构建质粒标准品;同时对含突变型和/或野生型mtDNA 1555位点的片段的拷贝数进行定量检测。结果RT-ARMS-qPCR系统用于检测含mtDNA 1555位点的片段,线性检测范围为102-108拷贝数/μl,检测灵敏度为1×102拷贝数/μl,其批内变异系数（CV）为1.34%,批间CV为1.96%,重复性好;突变型和野生型引物分别只扩增相应片段,特异性好。结论RT-ARMS-qPCR系统适合于定量检测含mtDNA A1555G点突变的线粒体DNA片段,结果稳定、准确,有助于阐明线粒体耳聋严重程度的分子基础。     

大肠癌细胞p53基因突变与细胞凋亡及细胞倍性的关系

目的　了解ｐ５３ 基因突变、细胞倍性、细胞凋亡三者的关系,探讨突变型ｐ５３ 基因在肿瘤发生中的作用机制。方法　采用 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ（ 单链构象多态性） 检测ｐ５３ 基因突变,用流式细胞仪 Ｆａｃｓｃａｎ 检测大肠癌细胞染色体倍性、凋亡率及其在细胞周期各相中的分布情况。结果　大肠癌标本ｐ５３基因突变率为５０ ％ ;其中突变组肿瘤细胞凋亡率（２２ ．１１ ％ ） 明显低于未突变组细胞凋亡率（４０ ．５７ ％ ） ,（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;突变组异倍体细胞百分率（ 占７６ ．９ ％ ） 明显高于未突变组（ 占４６ ．２ ％ ） ,（ Ｐ＜ ０ ．０５） ;异倍体肿瘤细胞凋亡率为３４ ．０ ％ ,二倍体肿瘤细胞凋亡率为４０ ．７ ％ ,二者差异无显著性（ Ｐ＞ ０ ．０５） 。结论　ｐ５３ 基因突变使肿瘤细胞凋亡率下降,进而促进肿瘤发生、发展。ｐ５３ 基因突变多见于异倍体细胞,细胞凋亡率与细胞倍性无关。     

Sysmex XS 800i 血细胞分析仪血小板计数性能评价

目的 评价Sysmex XS-800i 血细胞分析仪血小板(PLT)计数性能。 方法 遵照行业指南验证Sysmex XS-800i血细胞分析仪PLT计数的精密度、线性、携带污染率和正确度; 以显微镜计数法为参考方法对仪器低值PLT检测一致性、小红细胞(RBC)和大PLT的干扰性和仪器报警有效性进行评价。 结果 精密度、线性、携带污染率、正确度均符合行业标准。对于11×10⁹～55×10⁹ L^-1范围内的低值PLT,Sysmex XS-800i检测相关性(r=0.923 9)优于ADVIA 2120i(r=0.908 0); 平均红细胞体积(MCV)<70 fL或MCV<75 fL且PLT直方图异常时、平均血小板体积(MPV)>x^-+2s即MPV>12 fL时,仪器检测PLT结果均有显著性差别(P<0.05)。特异性较高的报警为“RBC大小不一”和“小RBC”,分别为89.47%和83.87%; 阳性预测值较高的报警为“RBC大小不一”(92.00%)。 结论 Sysmex XS-800i血细胞分析仪的PLT计数性能符合行业标准要求; 对低值PLT计数准确性良好,但抗小RBC、大PLT干扰能力较差。日常使用应结合仪器各相关报警的有效性,建立合适的人工镜检复检规则。     

含1555位点的线粒体DNA拷贝数与非综合征型耳聋临床表型的关系

目的 定量检测非综合征型耳聋患者mtDNA A1555G突变型/野生型的拷贝数,探讨mtDNA A1555G突变型的拷贝数与临床表型之间的关系.方法 建立RT-ARMS-qPCR系统对含突变型和野生型mtDNA 1555位点的拷贝数进行定量检测并计算其突变的比例.结合散发组和家系组耳聋患者的临床资料,分析mtDNA A1555G突变型的拷贝数与耳聋严重程度的关系.结果 散发组mtDNA A1555G同质性突变的患者中,突变拷贝数与耳聋轻重程度无关(R=0.001,P=0.997);散发组mtDNA A1555G异质性突变的患者中,突变型与野生型的拷贝数比例与耳聋轻重程度相关(R=0.771,P=0.003);家系组mtDNA A1555G同质性突变的拷贝数与耳聋轻重程度相关(R=0.341,P=0.022);家系组mtDNA A1555G异质性突变的拷贝数与耳聋轻重程度相关(R=0.85,P=0.015).结论 含mtDNA A1555G点突变的拷贝数与非综合征性耳聋的严重程度密切相关,为揭示非综合征耳聋临床表型多样性奠定了基础.     

新生隐球菌毒力因子研究进展

新生隐球菌是条件致病性深部真菌,细胞免疫功能受损的人群易感,是隐球菌属的主要致病菌。近年来,由新生隐球菌感染引起的隐球菌病日益增多,因其症状重、治疗困难、病死率高而引起重视。有关新生隐球菌的毒力因子致病性方面的研究十分活跃,本文就这方面的研究进展作一综述。     

慢性乙型肝炎患者HBsAg和抗HBs共存的发生机制及其临床意义

慢性乙型肝炎患者血清学标志物检测结果可出现HBs Ag和抗HBs双阳性,即HBs Ag和抗HBs共存。国内、外报道此现象的发生率分别为2.43%~4.87%和2.90%~8.90%。造成HBs Ag和抗HBs共存的原因主要有HBV S基因突变、不同血清型HBV的感染、HBV再活动等,其给临床HBs Ag检测、宿主疾病转归和临床诊治带来了诸多影响。该文就HBs Ag/抗HBs双阳性的发生机制及其对临床诊治的影响作一综述。     

血清胱抑素C在动态监测移植肾功能中的价值

目的探讨血清胱抑素C（ScysC）在监测肾脏移植患者肾小球滤过率中的应用价值。方法收集26例肾移植病例，分别于术前、术后1、3、5、7d，2周，4周采集血标本，分别测定ScysC、血清肌酐（Scr）、血清尿素（Urea）、内生肌酐清除率（CCr），比较ScysC、Scr与CCr的相关性。结果患者术后随着移植肾功能的恢复，ScysC值持续下降，与术前相比，差异有显著统计学意义（P〈0．01）。与术前相比，术后第1天，ScysC下降达51％，明显早于Scr（下降达40％），移植术前与术后不同时期，患者的ScysC与Scr呈正相关，r=0．945；与CCr呈负相关，r=-0．878。当50ml·min-1．73m。〈CCr≤80ml·min-1．73m-时，ScysC与CCr的相关性明显优于Scr，二者的相关系数分别为-0．856、-0．645（P〈0．05）。其ROC曲线下的面积分别为0．972±0．032、0．926±0．055（P〈0．05）。结论ScysC检测能比较准确评价移植肾的肾小球滤过率，优于Scr，具有临床应用价值。     

福建汉族人群胰蛋白酶原基因多态性与胰腺炎风险的关联

目的 探讨胰蛋白酶原基因(protease serine 1,PRSS1)的多态性与福建汉族人群胰腺炎风险的关系.方法 收集正常对照120例,胰腺炎患者56例,对所有受试者的PRSS1基因5个外显子进行PCR扩增,产物纯化后测序,比较不同基因型与胰腺炎风险的关系,用HWE软件和SPSS13.0软件分别进行遗传平衡检验和统计学分析.结果 5例胰腺炎患者和1例健康体检者的PRSS1基因4号外显子区32位碱基存在C＞T多态,C＞T多态频率在正常人和胰腺炎患者中分别为0.84%、8.92%,C＞T多态等位基因频率符合Hardy-Weinberg平衡.携带T/T基因与携带C/C基因者比较,罹患胰腺炎的风险增加10.67倍(11.67,CI=1.45～94.21).结论 PRSS1基因4号外显子32位碱基C/T多态与福建地区汉族人群胰腺炎可能具有相关性.