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Construction of Shuttle Expression Plasmid and Stable Expression of Foreign Gene in Mycobacteria and E.Coli 总被引:1,自引:0,他引:1
ConstructionofShuttleExpressionPlasmidandStableExpressionof ForeignGeneinMycobacteriaandE.ColiHUANGFUYong-mu(皇甫永修);ZHANGDa-ju... 相似文献
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目的 对5个δβ地中海贫血家系进行分析及产前诊断. 方法 采集家系成员外周血进行血细胞分析,应用毛细管电泳技术对血红蛋白进行分析,采用裂隙聚合酶链反应(Gap-PCR)以及PCR结合反向点杂交(PCR-RDB)方法对来自外周血及羊水、绒毛的αβ珠蛋白进行基因突变鉴定.结果 检测到中国型Gγ+(Aγδβ)0地中海贫血携带者5例,中国型Gγ+(Aγδβ)0地贫复合β地贫导致的重型地中海贫血1例,3个胎儿为中国型Gγ+(Aγδβ)0地贫复合β地贫. 结论 对高风险家庭进行产前诊断避免重型地贫患儿的出生,对于优生优育具有重要意义. 相似文献
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目的:探讨双胎妊娠和三胎妊娠地中海贫血的产前基因诊断情况。方法:对27例双胎妊娠和三胎妊娠患者进行绒毛膜穿刺或羊膜囊穿刺胎儿取样,采取裂隙聚合酶链反应以及聚合酶链反应结合反向点杂交方法进行产前基因诊断。结果:在进行α地中海贫血产前基因诊断的20例双胎妊娠及1例三胎妊娠中,共对43个胎儿进行取材,共检测出6例Bart's水肿胎,3例血红蛋白H病。在进行β地中海贫血产前基因诊断的6例双胎妊娠中,共对9个胎儿进行取材,共检测到3例中重型β地中海贫血。结论:地中海贫血的多胎妊娠孕妇产前基因诊断能较有效检出Bart's水肿胎和中重型β地中海贫血患儿,可预防重型地中海贫血患儿的出生。 相似文献
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弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定 总被引:13,自引:4,他引:13
目的克隆弓形虫表面抗原P22编码基因片段并进行序列测定。方法设计合成1对引物,采用PCR法扩增出P22目的基因片段,以低熔点琼脂糖回收纯化,并以限制性内切酶BamHI和KpnI双酶切后,插入质粒载体p5.6的多克隆位点,构建重组体p5.6/P22,并转化大肠杆菌DH5α,快速酸法初筛阳性重组子,并以PCR法与限制性酶切分析对阳性克隆进一步鉴定。被鉴定的重组子以双脱氧链终止法进行序列测定。结果从弓形虫核酸提取物中扩增出约593bpDNA条带,与预期扩增片段大小相符,空白对照无特异性扩增条带;所构建p5.6/P22重组体阳性克隆经双酶切与PCR鉴定与预期结果一致;序列测定的结果确证了插入片段的正确性。结论体外成功扩增、克隆了弓形虫表面抗原P22编码基因片段,并经序列分析所验证,为弓形虫P22表面抗原的表达以及弓形虫疫苗的制备作好铺垫。 相似文献
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卡介苗(BCG)是全球应用最广泛的疫苗,也是一种能携带多种致病菌保护性抗原表达的疫苗载体。本研究以pUC19为骨架,分别克隆入BCG分泌抗原85-B的调节和信号肽序列、Neo基因序列(编码卡那霉素抗性)以及分枝杆菌质粒复制基因,构建成分枝杆菌-大肠杆菌穿梭质粒pBCG-8000。该重组质粒在分枝杆菌(含BCG)、大肠杆菌两个系统中均能稳定复制,并能稳定表达卡那霉素抗性。本研究为把BCG和其它分枝杆菌发展成为多价疫苗载体打下了基础。 相似文献
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日本血吸虫成虫26kD谷胱甘肽S-转移酶是成虫代谢过程中一个关键酶。为研究制备日本血吸虫重组疫苗,根据日本血吸虫菲律宾株成虫Sj26kDGST完整编码区序列设计引物,以日本血吸虫中国大陆株成虫26kDGSTmRNA模板,采用逆转 聚合酶链反应技术,扩增了其26kDGST完整编码区cDNA将cDNA重组于pBluescriptSK质粒上,转化大肠杆菌,重组体经限制酶解图谱鉴定,用双脱氧链末端终止法对 相似文献
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本实验制作内毒素所致家兔 DIC 模型,观察到肝细胞溶酶体和线粒体在超微结构与功能方面均受到明显损害。而应用热毒清(原名"抗炎6号")注射液之模型的动物肝细胞超微结构基本正常,溶酶体标志酶酸性磷酸酶(ACP)明显减低;线粒体呼吸功能、ATP 酶、过氧化脂质接近正常,与模型组比较差异非常显著。体外实验结果一致。提示热毒清有拮抗内毒素所致溶酶体和线粒体损伤的功能。 相似文献
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目的建立单细胞MGB探针荧光PCR检测β地贫的方法以及在β地贫PGD中的应用研究。方法获取β地贫基因携带者单个淋巴细胞,建立稳定的单细胞MGB探针荧光PCR检测技术,并对2例双方均为β地贫基因携带者的夫妇应用MGB探针荧光PCR进行了β地贫的PGD。结果利用单细胞MGB探针荧光PCR检测了β地贫基因携带者的200个单个淋巴细胞的基因型,平均扩增效率为94%,平均等位基因脱扣(ADO)率为2.5%。对两对夫妇进行4个周期PGD,共活检16个胚胎,获得16个卵裂球,其中15个卵裂球扩增成功,扩增效率为93.8%,ADO率为6.2%。14个胚胎经PCR分析后获得明确诊断,移植了4个胚胎,获得1例临床妊娠。孕11周时经腹吸取绒毛,证实为完全正常胚胎,最终分娩了一正常女婴。结论应用单细胞MGB探针荧光PCR技术可对β地贫以及其它单基因遗传病进行植入前遗传学诊断,达到优生目的。 相似文献
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本实验制作内毒素所致家兔DIC模型。观察到肝细胞线粒体在超微结构和功能方面均受到明显损害。而应用热毒清注射液之模型动物肝细胞超微结构基本正常;线粒体呼吸功能、ATP酶,肝匀浆和血清过氧化脂质(LPO)接近正常,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01)或<0.05)。体外实验与体内实验结果一致,从而提示热毒清有拮抗内毒素损伤线粒体的功能。 相似文献