大鼠骨髓间充质干细胞生长特性和表面标志与培养基中胎牛血清浓度的关系

目的:讨两种浓度胎牛血清培养的不同传代次数的骨髓间充质干细胞探在生长特性及表面标志方面的差异性。方法:实验于2004年在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心进行。取健康Wistar大鼠5只,采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓间充质干细胞,然后分别以体积分数为0.1和0.15的胎牛血清的L-DMEM培养基进行贴壁培养,观察原代和传代细胞的形态特征、生长曲线及表面标志CD45,CD11b,CD29和CD44的表达(骨髓间充质干细胞表达CD29和CD44,造血前体细胞表达CD45和CD11b)。结果:①两种浓度胎牛血清培养细胞均能获得贴壁梭形骨髓间充质干细胞,但体积分数为0.15的胎牛血清原代培养的细胞分裂增殖较快,集落融合较早,传代时间较短(平均10d)。②体积分数为0.1的胎牛血清传代培养第1,2代细胞均质性相对较差,CD45阳性率分别为23.4%,15.4%,CD11b阳性率分别为16.6%,10.3%,高于体积分数为0.15的胎牛血清培养组(P<0.05),至第3代后两组已无差异,CD45和CD11b阳性率均小于5%,而CD29和CD44阳性率均大于95%。③两组的骨髓间充质干细胞生长曲线相似,但体积分数为0.15的胎牛血清培养的骨髓间充质干细胞对数生长期峰值出现较早,为第6天,而体积分数为0.1的胎牛血清培养组为第7天。结论:体积分数为0.1和0.15的胎牛血清培养的骨髓间充质干细胞在生长特性和表面标志方面存在差异。使用体积分数为0.1的胎牛血清已可满足骨髓间充质干细胞的分离纯化和培养扩增,但要在短期内获得较纯的骨髓间充质干细胞,使用体积分数为0.15胎牛血清优于体积分数为0.1胎牛血清。     

系统性红斑狼疮患者B淋巴细胞EBV-LMP1和ZEBRA的表达研究

目的：探讨ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ在系统性红斑狼疮患者（ＳＬＥ）的表达情况。方法：间接荧光免疫标记，流式细胞仪检测。结果：ＳＬＥ患者Ｂ淋巴细胞中ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）。活动期患者ＣＤ２３＋细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达率均高于ＣＤ１９＋细胞（Ｐ＜０．０１）。非活动期患者ＣＤ２３＋细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１表达也高于ＣＤ１９＋细胞（Ｐ＜０．０１）。但ＥＢＶ－ＺＥＢＲＡ表达在两亚群间差异没有统计学意义（Ｐ＞０．０５）。结论：朋病毒参与了ＳＬＥ的发病机制，病毒主要以潜伏期状态存在于患者中，病毒复制促进病情发展，检测Ｂ淋巴细胞ＥＢＶ－ＬＭＰ１和ＺＥＢＲＡ的表达率，有助于病情活动指标的判断。     

大鼠骨髓间充质干细胞生长特性和表面标志与培养基中胎牛血清浓度的关系

目的：探讨两种浓度胎牛血清培养的不同传代次数的骨髓间充质干细胞在生长特性及表面标志方面的差异性。方法：实验于2004年在中山大学附属第二医院林百欣医学研究中心进行。取健康Wistar大鼠5只，采用密度梯度离心法分离大鼠骨髓间充质干细胞，然后分别以体积分数为0．1和0．15的胎牛血清的L-DMEM培养基进行贴壁培养，观察原代和传代细胞的形态特征、生长曲线及表面标志CD45，CD11b，CD29和CD44的表达（骨髓间充质干细胞表达CD29和CD44，造血前体细胞表达CD45和CD11b）。结果：④两种浓度胎牛血清培养细胞均能获得贴壁梭形骨髓间充质干细胞，但体积分数为0．15的胎牛血清原代培养的细胞分裂增殖较快，集落融合较早，传代时间较短（平均10d）。（爹体积分数为0．1的胎牛血清传代培养第1，2代细胞均质性相对较差，CD45阳性率分别为23．4％，15,4％，CD11b阳性率分别为16．6％，10.3％，高于体积分数为0．15的胎牛血清培养组（P〈0．05），至第3代后两组已无差异，CD45和CD11b阳性率均小于5％，而CD29和CD44阳性率均大于95％。③两组的骨髓间充质干细胞生长曲线相似，但体积分数为0．15的胎牛血清培养的骨髓间充质干细胞对数生长期峰值出现较早，为第6天，而体积分数为0．1的胎牛血清培养组为第7天。结论：体积分数为0．1和0．15的胎牛血清培养的骨髓间充质干细胞在生长特性和表面标志方面存在差异。使用体积分数为0．1的胎牛血清已可满足骨髓间充质干细胞的分离纯化和培养扩增，但要在短期内获得较纯的骨髓间充质干细胞，使用体积分数为0．15胎牛血清优于体积分数为0．1胎牛血清。