促发低氧性肺动脉高压的新机制--肺微动脉的血管胰岛素敏感性降低及其信号障碍

目的观察低氧诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）,是否同样存在肺血管的胰岛素敏感性变化？并探讨潜在的分子机制。方法：采用低压低氧法建立低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠模型,14只雄性SD大鼠随机分为：正常对照组和HPH组（低氧4周）,每组7只大鼠（n=7）测定两组平均肺动脉压（mPAP）及胰岛素诱导的血管舒张效应。原代培养大鼠PMVEC,分为常氧（21％O2,37℃）和低氧（10％O2,37℃）处理,分别培养6 h、24 h、48 h和96 h收集细胞以Western blot检测Tribbles同源蛋白3（TRB3）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR^y）及胰岛素的磷脂肌醇3激酶／蛋白激酶B／内皮一氧化氮合酶（P13K／Akt／eNOS）信号通路蛋白水平,培养基上清检测一氧化氮（NO）生成量。结果：与正常对照组比较,低氧组mPAP明显升高,胰岛素诱导的肺动脉血管舒张作用明显减弱（P〈0．05,P〈0．01）。PMVEC在含胰岛素的内皮培养基培养不同时间,低氧组与常氧组相比,培养6 h NO量明显升高,培养24 h后有所下降,随低氧时间的延长下降幅度增大（P〈0．01）;随低氧时间延长,P13K-p85、p-Akt、p-eNOS表达逐渐下降,低氧时间越长下降幅度越明显,与NO生成相一致,p-ERKl／2随低氧时间延长表达明显升高;随低氧时间延长TRB3表达增加显著,而PPARY表达减少（P〈0．05,P〈0．01）。而不同培养时间常氧组间NO量及上述蛋白表达无显著性差异。结论：低氧可诱导大鼠PMVEC内TRB3的过表达从而负性调控PPARl,引起下游胰岛素信号通路受损,造成肺血管内皮功能异常,进而促进HPH发生。     

游离脂肪酸受体4(FFAR4/GPR120)调控巨噬细胞功能的研究进展

游离脂肪酸受体4(FFAR4/GPR120)表达于巨噬细胞,调控白细胞介素1(IL-1)、IL-6和肿瘤坏死因子α(TNF-α)等细胞因子的表达与分泌,介导ω-3多不饱和脂肪酸的抑炎效应。FFAR4可通过Gq/11蛋白激活磷脂酶C和胞质磷脂酶A2介导的信号分子途径,或者通过β抑制蛋白2(β-arrestin 2)调控炎症相关分子,改变核因子κB(NF-κB)等转录因子活性。巨噬细胞在机体分布广泛,FFAR4调节巨噬细胞状态,进而影响脂肪组织、肌肉组织、肝脏等组织器官的功能,参与肥胖、胰岛素抵抗、骨质疏松、脂肪肝等疾病发生。目前对FFAR4激活在巨噬细胞的效应和对疾病的治疗作用还处于认识的初期,许多问题仍待更深入研究。     

开设基础医学概论自修课程的实践与思考

为了培养学生自主获取知识的能力,第四军医大学在开设基础医学概论自修课程时,实施了教学改革并取得了较好的效果.教学改革包括转变师生的“教”与“学”观念,树立以学生为主体的教学理念;加强教师辅导,教会学生学习的方法,为学生自学创造良好的条件;改革考试方式,全程考评学生的学习成绩,提高自修课程的教学效果.     

成纤维细胞生长因子21抑制脂肪细胞中网膜素表达

正成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)调节机体能量代谢,可降低血糖、改善脂代谢和减轻体质量。注射FGF21还可导致小鼠骨密度降低[1]。网膜素(omentin)是近来发现的一种脂肪因子,参与调节糖代谢,并影响心血管和骨组织的功能。网膜素水平与骨密度呈正相关,可减轻雌激素缺乏所致的骨密度减小,表明网膜素参与     

脂联素改善间歇性低氧性肺动脉高压大鼠离体肺动脉舒张功能及其机制

目的 研究重组人球状脂联素（gAd）对低氧性肺动脉高压（HPH）大鼠离体肺动脉舒张功能的影响并研究其作用机制。方法 将24只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、HPH 2周组（HPH2W）、HPH 4周组（HPH4W）,每组8只。正常对照组动物在正常环境中饲养,低氧组大鼠以间歇性低压低氧法建立HPH模型。低氧组模型建立后,以右心导管法测定平均肺动脉压（mPAP)、平均右心室压(mRVP),称重测量右心室/左心室+室间隔（RV/LV+S）、右心室/体质量（RV/BW）;ELISA检测试剂盒检测血清gAd及NO浓度。右肺下叶肺组织经HE染色后观察肺小动脉血管显微结构的改变。取大鼠左、右肺动脉干制备血管环,行离体灌流实验,观察不同浓度的乙酰胆碱及硝普钠诱导的血管舒张作用。取HPH4W组动物肺外肺动脉干,分组进行孵育（HPH4W组:Krebs液孵育;HPH4W+gAd组:gAd 2 μg/ml孵育;HPH4W+gAd+L-NAME组:gAd 2 μg/ml+L-NAME 0.5 mmol/L孵育）,孵育后观察不同浓度的乙酰胆碱及硝普钠诱导的血管舒张作用,然后收集作用于血管环的灌流液,检测NO产物。取HPH4W组大鼠肺动脉血管按上述分组进行孵育,然后行Western blot检测AMPK、Akt、eNOS等信号蛋白分子的表达及磷酸化水平。结果 与正常对照组相比,HPH组大鼠的mPAP、mRVP、RV/LV+S、RV/BW均显著增高（P<0.05）;血清gAd、NO水平下降（P<0.05）;光镜下肺动脉平滑肌及弹力纤维层增生,管壁增厚,管腔狭窄。与正常对照组比较,HPH组大鼠肺动脉对乙酰胆碱诱导的血管舒张作用明显减弱(P<0.05),正常对照组最大舒张率69.94%,HPH2W组最大舒张率48.79%,HPH4W组最大舒张率仅42.09%。经gAd体外孵育后,血管环内皮依赖的舒张作用明显增强,HPH4W组最大舒张率可达到46.35%,加入L-NAME组的血管环舒张作用被显著阻断。各组大鼠对硝普钠诱导的血管舒张均有良好反应,无统计学意义。经gAd孵育后的血管环组织AMPK、Akt、eNOS磷酸化水平、灌流液NO产物均增加（P<0.05）,L-NAME可阻断gAd增强eNOS磷酸化和NO水平的作用。结论 gAd对间歇性低氧性肺动脉高压大鼠的肺动脉内皮依赖性的血管舒张功能具有确切的直接保护作用。AMPK/Akt/eNOS/NO信号通路可能是gAd发挥肺动脉保护作用的分子机制。     

开展综合型医学实验课程的初步实践

介绍了打破学科课程的壁垒 ,建立新的实验教学体系的实践体会 ,采用开展综合实验课程 ,改进教学方法 ,培养学生自学、创新能力。考试由重知识学习向重思维 ,重能力 ,重素质转变。同时教学相长、对教师的能力提出了新的要求     

高脂饮食诱导肥胖和游泳运动对小鼠心脏脂质沉积的影响

目的 明确高脂饮食诱导肥胖和游泳运动对小鼠心脏脂质沉积的影响。 方法 C57BL/6J小鼠分为普通饲料组（NC）、高脂饲料诱导肥胖组（DIO）、肥胖低运动组（DIO+LE）、肥胖高运动组（DIO+HE）,DIO+LE小鼠每天自由游泳30分钟;DIO+HE小鼠游泳3×30分钟,间隔15分钟。连续游泳运动4周后,油红O染色检测心脏脂质沉积,RT-qPCR分析基因表达变化,免疫组织染色观察线粒体标记物MTCO2水平变化。 结果 NC小鼠心脏可见少量脂滴,DIO小鼠心肌细胞内脂滴的数量显著减少(P<0.05)。DIO+HE小鼠心肌细胞内脂滴的数量较DIO显著增加(P<0.05)。DIO小鼠心脏中乙酰辅酶A羧化酶1（ACC1）、脂肪酸合酶（FAS）等基因表达较NC组显著下降(P<0.05),肉毒碱棕榈酰转移酶（CPT1和CPT2）、3-磷酸甘油脱氢酶（GPD-1）和甘油激酶（GyK）基因表达较NC显著升高(P<0.05)。DIO+HE进一步增加CPT1和CPT2表达,但是逆转DIO小鼠的GPD-1和GyK升高(P<0.05)。DIO+HE小鼠MTCO2免疫染色较DIO组显著增强(P<0.05)。 结论 单纯高脂饲料诱导的肥胖模型小鼠并未增加心脏脂质沉积,反而出现脂质减少,一定运动量可逆转此种变化。本研究为高脂饮食和运动影响心脏脂质沉积提供了新的认识。     

基础医学综合实验教学准备的实践

做好机能综合实验教学准备 ,首先明确综合实验内容 ,精心计划周密安排 ;其次抓好细微环节 ,保证实验质量 ,还要充分利用先进实验设备 ,半开放实验教学 ;同时应严格管理制度 ,确保实验室使用安全     

紫花龙胆水煎液对气管纤毛运动的影响

目的：观察紫花龙胆水煎液对大鼠离体气管纤毛运动的影响，以及对10g／L博莱霉素引起纤毛损伤的保护作用。 方法：实验于2004—08／2005-02在解放军第四军医大学基础部药理科完成。①选用15只雌性SD大鼠，8周龄。取出喉头至气管分叉处的整段气管。每条气管分成4段，每段气管纵向剪成两半。分别在3个培养皿中倒人龙胆花水煎液[称取干燥龙胆花2．2g，加300mL冷蒸馏水浸泡15min，煮沸30min。过滤药渣加100mL水继续煎煮，煮沸10min，过滤合并两次滤液水浴浓缩成80mk加NaC18mg药物浓度27．5g/L（相当于生药2.2g）]。10g／L博莱霉素[15mg（效价）日本化药株式会社生产，用时用生理盐水配制成10g／L溶液]。生理盐水。每只大鼠可获取4个标本。②将15只大鼠的60个标本随机分为4组：生理盐水组、紫花龙胆组、博莱霉索组和博莱霉紊＋紫花龙胆花组。用20倍解剖显微镜直接观察气管片。用秒表及两脚规测量墨汁运行速率，每次观察1min。每观察1次后，将气管片漂洗2次，以除去墨汁。5min后将相应离体气管片分别在生理盐水（生理盐水组）、紫花龙胆水煎液（紫花龙胆水煎液组）、10g／L博莱霉素液（博莱霉素组）中浸沾2min按上方法观察不同药物对气管纤毛墨汁运行速率的影响。博莱霉素＋紫花龙胆花组：先将标本在10g/L博来霉素溶液中浸沾2min后，漂洗10min，再浸入紫花龙胆水煎液中2min后记录墨汁运行速率。墨汁清除率（％）=（给药后运行速率一给药前运行速率）／给药前运行速率。③组间计量资料差异比较采用方差分析及Dunnett-t检验，组内差异比较采用配对t检验。 结果：大鼠15只均进入结果分析。①离体气管纤毛运行速率：紫花龙胆组较用药前明显加快，博莱霉素组较用药前明显减慢。②墨汁清除率：紫花龙胆组较用药前增加了37％，明显高于生理盐水组（P〈0．05），博莱霉素组较用药前降低了44％，明显低于生理盐水组（P〈0．01）。博莱霉素＋紫花龙胆组明显高于博莱霉素组（P〈0．01）。 结论：10g／L博莱霉素液可致气管黏膜纤毛上皮对墨汁清除能力减退，紫花龙胆水煎液则有增强气管纤毛上皮清除墨汁的能力，可显著改善由10g／L博莱霉素溶液所致纤毛上皮运动能力受损，增强排痰功能。