免疫旋转生物传感器高灵敏检测HIV-1P24抗原方法的研究

目的 通过构建免疫旋转生物传感器,建立一种高灵敏度的HIV-1 P24定量检测方法.方法 将生物素标记的HIV-1 P24单克隆抗体通过亲和素-生物素-β亚基抗体（Streptavidin-biotin-β antibody）的方式连接到光合作用复合体（Chromatophores）的β亚基上,同时用pH敏感的荧光索F1300标记到Chromatophores上,构建了用于检测P24的免疫旋转生物传感器,并用原核表达的P24抗原对该传感器进行了灵敏度、特异性实验.结果 构建的免疫旋转生物传感器可以将P24抗原结合ATPase造成的旋转速率变化转变为光强度的变化,可以高灵敏的检测HIV-1P24抗原,最低检出度可达0.1 fg/ml.结论 成功建立了基于免疫生物传感器（Immuno-rotary Biosensor,IRB）系统的HIV-1 P24检测方法,该方法操作简单,灵敏度高,为建立基于分子马达HIV-1 P24定量检测方法打下基础.     

含H5N1-HA基因重组腺病毒疫苗的构建及其诱导免疫应答的初步探讨

目的 构建包含H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗并探讨其免疫效果.方法 用Admax系统构建包含H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗,并用PCR、Western-Blot等方法对重组病毒疫苗进行鉴定;疫苗免疫小鼠后,通过HI实验和ELISPOT实验检测其体液免疫和细胞免疫反应,评价其免疫效果.结果 成功得到了含有H5N1-HA基因的重组腺病毒疫苗;基因表达鉴定表明,HA基因能够在细胞中进行表达;血凝抑制实验结果显示小鼠产生的针对HA抗体滴度在1:320和1:640之间;ELISPOT结果显示实验组和对照组(PBS)相比斑点数量差异有统计学意义(P<0.05),以上免疫结果表明重组腺病毒载体疫苗可以诱导小鼠产生良好的特异性体液和细胞免疫反应.结论 含H5NA-HA的重组腺病毒疫苗可以诱导小鼠产生良好的免疫反应,为研制人禽流感疫苗打下基础.