肝癌组织中β—和p^120—连环蛋白的表达

目的 揭示连环蛋白与肝癌的发生发展的关系。方法 应用RT－PCT和免疫组织化学观察细胞黏附与信号转导分子β－和p^120－连环蛋白在正常肝组织、肝癌旁结节性肝硬化组织和肝癌组织中p^120ctn mRNA的蛋白质表达情况及其与β－连环蛋白的关系。结果 所有肝组织中均表达p^120 ctn mRNA同工蛋白1A和3A。2例正常肝组织中β－和p^120-连环蛋白分子表现为胞膜表达而胞质无表达;17例癌旁结节性肝硬化组织表现为胞膜和胞质均有表达,以胞质为主,且胞膜表达有所增强。17例HCC组织中表现为胞膜表达明显减弱或消失,而胞质表达则增强。多数细胞胞膜表达呈现不连续性。结论 肝组织中可检测到p^120ctn同工蛋白1A和3A mRNA。此外,正常肝组织中β－和p^120-连环蛋白分布在胞膜,对维持正常的细胞黏附和信号转导起重要作用;结节性肝硬化肝组织中此2种分子出现了分布变化,而肝癌细胞中此2种分子发生了明显的转位现象,提示肝癌细胞在一定程度上改变了细胞黏附分子的正常功能和其所介导的信号转导作用。     

新型三聚β肽对人肝癌细胞系迁移和侵袭能力的影响

在肿瘤侵袭转移过程中，肿瘤细胞首先脱离原位，与基底膜和细胞外基质中的大分子蛋白成分黏附，并激活与基质蛋白溶解相关的蛋白水解酶类如基质金属蛋白酶(MMPs)，降解基底膜和细胞外基质，从而细胞移动并穿过基底膜和血管壁进入血液循环。在肿瘤细胞与细胞外基质的黏附过程中，整合蛋白起了非常重要的作用。Liu等根据整合蛋白β亚基和部分α亚基的保守序列设计的抗黏附β肽能阻断肿瘤细胞与基质的相互作用，对高转移的人肝癌裸鼠模型LCID20肝癌切除术后肝内转移和肺转移也具有强大抑制作用。     

FAK和整合蛋白α5、β1亚基在胃癌中表达的比较及其临床意义

目的 比较粘着斑激酶（FAK）和整合蛋白（integrin)α5、β1亚基在胃癌及癌旁组织中的表达与肿瘤细胞分化、浸润、转移等生物学行为的关系及相互关系。方法 用免疫组织化学亲合素生物素法（ABC）检测75例胃癌及癌旁组织石蜡标本FAK和整合蛋白α5、β1亚基蛋白的表达水平。结果 FAK、整合蛋白α5和亚基和整合蛋白β1亚基的表达 为 或 分别是胃癌组织57％、29％和25％,癌旁组织4％、76％和84％;低分化胃癌组织68％、18％和16％,高中分化组织42％、45％和39％;有淋巴结转移的组织77％、31％和31％,无转移的组织36％、28％和19％;浸润程度较深的组织68％、29％和25％,浸润程度较深的组织19％、31％和25％。结论 FAK较整合蛋白α5、β1亚基可以更有效地衡量胃癌的发生与发展,FAK的表达量可作为胃癌发生、发展过程中一种较有价值的病理指标。FAK可能既是一种转化相关酶又是一种演变相关酶。     

骨桥蛋白在胆固醇结石患者胆汁中的表达及成核作用研究

目的 探讨骨桥蛋白在人胆固醇结石形成中的作用.方法 36例胆固醇结石患者为结石组,19例肝移植供体为正常组,分别测定骨桥蛋白、钙离子及脂质成分在胆囊胆汁中的含量,用成核时间法研究骨桥蛋白在胆汁中的成核作用.结果 骨桥蛋白呈剂量依赖性地抑制胆固醇自发成核.50 μg/ml的骨桥蛋白可分别使结石组和正常组胆汁的成核时间延缓48.90％和17.07％,100 μg/ml的骨桥蛋白可使成核时间延缓91.51％和32.93％;并可抑制钙离子诱导的促成核作用.50μg/ml骨桥蛋白+钙离子可分别使结石组和正常组胆汁成核时间延缓75.78％和33.96％,而100μg/ml骨桥蛋白+钙离子则使成核时间分别延缓125.90％和62.26％.结石组胆汁中胆固醇、磷脂、胆汁酸及胆固醇饱和指数均显著高于正常组胆汁(P＜0.05),而骨桥蛋白和钙离子含量则明显低于正常组胆汁中的含量(P＜0.05).结论 骨桥蛋白可抑制胆固醇成核,并参与胆结石的发生发展.     

胆道肿瘤的潜在标志物Mrp14

目的 探讨胆道肿瘤特异性的标志物,为胆道肿瘤的早期诊断、判断预后、监测复发以及治疗等提供帮助,同时为进一步研究胆道肿瘤的发病机制提供线索。方法 收集经病理结果证实的胆道癌和胆囊癌患者的组织、胆汁标本以及良件胆道和胆囊疾病患者的组织、胆汁标本,应用双向电泳和MALDI-TOF-MS质谱技术检测出恶性和良性组织、恶性和良性病变患者胆汁之间差异表达的蛋白。对同时高表达于胆道癌、胆囊癌及恶性病变胆汁的蛋白Mrp14进行Western blot、免疫组化验证,RT-PCR监测基因表达水平。结果3组蛋白标本双向电泳后质谱成功鉴定出30个差异表达的蛋白,其中Mrp14同时在胆道癌、胆囊癌及恶性病变胆汁中高表达。Western blot、免疫组化及RT-PCR验证其在蛋白和基因水平于恶性组织中高表达。结论 Mrp14在胆道系统恶变后表达增高,可能为胆道肿瘤发生、发展的候选肿瘤标志物。     

EGFRvⅢ上调FAK磷酸化促进人胶质瘤细胞迁移

目的：探讨表皮生长因子受体突变体Ⅲ（epidermal growth factor receptor mutation typeⅢ，EGFRvⅢ）促进入胶质瘤细胞迁移运动的可能机制。方法：利用反转录病毒感染技术建立EGFRvⅢ过表达的人胶质瘤细胞U87 EGFRvⅢ，琼脂滴细胞迁移实验和Transwell细胞迁移实验观察EGFRvⅢ对细胞迁移运动的影响；Western印迹法检测黏着斑激酶（focal adhesion kinase，FAK）磷酸化的变化。将FAK突变体FAK（Y397F）导入U87 EGFRvⅢ细胞，观察细胞侵袭运动变化。结果：EGFRvⅢ促进入胶质瘤细胞U87的迁移运动，同时使FAK397位点磷酸化水平上调。将FAK突变体Y397F转入U87 EGFRvⅢ细胞，FAK磷酸化水平下调同时细胞迁移能力下降。结论：EGFRvⅢ通过上调FAK397位点磷酸化水平来促进胶质瘤细胞的迁移。     

人肝癌细胞诱导分化的体外研究

作者8年来选用全反式继甲酸（RA）为主要分化诱导剂，用体外细胞培养的方法，并用一系列形态学、生物学、生物化学的分子生物学的新技术和指标来研究RA对人肝癌细胞对SMMC－7721的逆转（分化诱导）作用，获得令人振奋的可喜成果。体外实验有利于药物直接作用于细胞，便于观察指     

亚硒酸钠对人肝癌细胞株甲胎蛋白、纤维连接蛋白及细胞膜糖链的影响

微量元素硒是机体正常生长的必需营养素,它能作为谷胱甘肽过氧化物酶组成部分,参与破坏机体代谢过程中产生的过氧化物,保障细胞膜或蛋白质中特定基团免受损害。随研究深入,发现体内硒水平与肿瘤发生率有密切关系。从实验动物获得的绝大多数资料支持硒是肿瘤细胞抑制剂的论点,特别是对上皮细胞。流行病学调查也提示硒缺乏与某些疾病产生有关。近年来报道用硒治疗消化道肿瘤,有一定成效。但从细胞水平研究硒对消化系     

TNF—α对人肝癌细胞E—钙粘蛋白、α5β1整合蛋白及粘着斑激酶蛋白表达的影响

目的：研究应用肿瘤坏死因子（TNF-α）单独处理SMMC－7721肝癌细胞不能引起肝癌细胞凋亡的原因。方法：采用免疫组化ABC法，结合图像分析仪及流式细胞术和Western印迹方法测定SMMC－7721细胞表面E－钙粘蛋白（E－cadherin)、α5β1整合蛋白（α5β1intergrin)、粘着斑激酶（FAK）表达及粘着斑激酶磷酸化的程度。结果：在肿瘤坏死因子的作用下，E－钙粘蛋白的表达略有下降，但无明显差异。整合蛋白α5亚基的表达明显下降，而整合蛋白β1亚基表达基本无变化。粘着斑激酶的蛋白表达随着肿瘤坏死因子浓度的增加略有下降，但变化不明显，粘着斑激酶的磷酸化程度无明显的变化。结论：单独用肿瘤坏死因子处理SMMC－7721肝癌细胞后，并没有阻断由整合蛋白，α5β1亚基及E－钙粘蛋白介导的2条信号通路，且由胱冬肽酶（caspases)介导的凋亡也没有被完全启动，不足以引起细胞的凋亡。     

醛糖还原酶ELISA测定及意义

从牛睾丸分离纯化醛糖还原酶(AR),皮下注射免疫新西兰兔制备抗血清,血清纯化后用辣根过氧化物酶(HRP)标记制备抗体-HRP交联物,利用夹心ELISA(抗体-抗原-酶标抗体)测定了22例糖尿病人及10例正常对照的红细胞AR水平.结果①糖尿病AR水平显著高于正常人;②AR水平病人约有5倍、正常人约有3倍的变异;③病人AR水平与空腹血糖水平明显相关,正常人无相关;④AR水平与性别、年龄、糖尿病病程无关.结论ELISA测定红细胞AR水平方法简便、特异,为研究AR提供了一个有用的方法.