基质金属蛋白酶16在食管鳞癌中的表达及其生物学功能

背景与目的：中国是世界上食管癌的高发区,食管癌可发生早期淋巴结及血行转移,这使其表现出临床进展迅速并且预后很差的特性。研究显示癌组织侵袭和转移与其诱导产生的蛋白酶降解细胞外基质、基底膜能力密切相关,因此基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)在肿瘤的发生、发展、转移过程中发挥重要作用,本文研究基质金属蛋白酶16(matrix metalloproteinase-16,MMP-16)在食管癌中的表达及其与食管癌浸润转移的关系,并为食管癌早期诊断及靶向治疗提供理论依据。方法：应用免疫组化、蛋白质印迹法(Western blot)及实时定量聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RTPCR)检测食管癌及相应的正常组织的MMP-16蛋白表达水平和MMP-16 mRNA转录情况,并对其临床意义进行探讨。通过构建针对MMP-16的小片段发夹状RNA(shRNA)干扰表达质粒,应用划痕实验、Transwell小室实验、WST-1及流式细胞仪检测方法,研究shRNA表达质粒沉默MMP-16后对Eca109细胞的迁移、侵袭、增殖及凋亡水平的影响。采用t检验进行统计学分析。结果：在蛋白水平,MMP-16在癌组织和正常组织表达平均指数分别为0.569±0.380和1.483±0.982,差异有统计学意义(P<0.01)。MMP-16表达与食管鳞癌组织分化程度呈正相关(R=0.704,P<0.05),与肿瘤的分期负相关(P<0.05)。干扰MMP-16的表达后Ec109细胞侵袭及迁移能力明显增加(P<0.05),细胞凋亡水平下降,增殖差异无统计学意义(P>0.05)。结论：MMP-16在食管癌组织中低表达,随着细胞分化程度增加而表达增加,在Eca109细胞中干扰MMP-16后能够抑制肿瘤细胞的迁移、侵袭,并减少凋亡水平,MMP-16在食管癌中可能起保护作用。     

低浓度过氧化氢溶液在高温时用于组织脱黑色素的效果

临床上含有黑色素的肿瘤较多,良性的有痣,恶性的有黑色素瘤、原始神经外胚层肿瘤、透明细胞肉瘤等,免疫组化是鉴别上述肿瘤的重要辅助手段,然而黑色素的存在,严重影响免疫组化结果的判读。因此,寻找一种对组织结构及免疫组化指标表达影响尽可能小的脱黑色素方法对病理诊断意义重大。目前,常用的脱色素法有高锰酸钾/草酸法和过氧化氢法,均可以把色素脱除干净,但是会破坏组织。本科室采用两种pH的溶剂配制浓度为1.8%的H 2O 2溶液在70 ℃时对组织进行脱色素处理,并行免疫组化染色,取得良好效果,现报道如下。